松江区泖港镇犬狂犬病免疫抗体评价

徐卫青 上海市松江区泖港镇农业服务中心 上海 201607

犬狂犬病是由狂犬病病毒引起的人畜共患病，临床上以恐水、畏光、吞咽困难、狂躁等为主要表现特征[1]，是一种危害严重的人畜共患传染病。该病一般通过被带有病毒的动物咬伤、舔舐或者抓伤等引起感染，病死率几乎为100%，是迄今为止人类病死率最高的急性传染病[2]。据世界卫生组织等调查发现，疫苗免疫接种是预防人感染狂犬病最有效的手段，当犬群体免疫覆盖率达到70%以上时，可有效抑制狂犬病传播[3-4]。随着农村地区散养犬饲养数量的不断增加，狂犬病的潜在威胁也变得越来越严峻。为了解泖港镇犬狂犬病免疫抗体水平，于2014-2017年有计划地对泖港镇的散养犬开展了狂犬病免疫抗体检测，并进一步作出分析，为更好地做好犬狂犬病的防控工作提供依据。

1 材料和方法

1.1 材料

1.1.1 待检血清 随机采自泖港镇散养犬。

1.1.2 检测试剂 狂犬病病毒抗体酶联免疫吸附试验（ELISA）定性检测试剂盒由北京世纪元亨动物防疫技术有限公司生产，生产批号为：20140603、20150302、20160608、20170202。

1.2 方法

1.2.1 试验操作 将被检血清及诊断试剂置21℃平衡至试验要求；用超纯水将浓缩洗液作10倍稀释；用样品稀释液将被检血清作1∶100稀释；将阴阳性对照及临界对照直接取100 L加入相应孔中，临界对照加3孔，阴阳性对照各加1孔；在微量反应板其余相应孔中加入己处理被检血清100 L，另留1孔不加样品作空白对照，振荡混匀，封膜，置37℃下孵育30 min；用约300 L洗涤液洗涤板孔，重复3次，每次静置60 s，最后一次洗涤后将板拍干；除空白对照外，每孔加酶标记物50 L，混匀，封膜，37℃下孵育30 min；用约300 L洗涤液洗涤板孔，重复3次，每次静置60 s，最后一次洗涤后将板拍干；每孔加入底物和显色剂各50 L，振荡混匀，封膜，置37℃下孵育10 min；每孔加入终止液50 L，混匀，使反应终止；酶标仪上在单波长450 nm读取结果。

1.2.2 结果判定 在试验成立 (阴性对照值应小于或等于0.15，临界对照平均值应在0.20～0.80)条件下：若样品OD值≥临界对照平均值，该样品为狂犬病抗体阳性；若样品OD值＜临界对照平均值，该样品为狂犬病抗体阴性。

2 结 果

2.1 血清样品数量 共采集了326份犬血清，见表1。

表1 2014-2017年散养犬血液样品采集情况

2.2 结果 用ELISA方法共检测犬血清326份，总抗体合格率为82.2%，其中2014年合格率较低，为71.1%，见表 2。

3 讨 论

1）该次对犬狂犬病免疫抗体检测的血液样品是采用随机抽样进行的，由于是散养犬，流动性大、攻击性较强，加上有些犬主不配合，给样品的采集工作加大了难度，虽然样本数量不够多，但也具有一定的代表性，基本上反映了犬群狂犬病免疫抗体的现状。

表2 2014-2017年散养犬狂犬病免疫抗体检测结果

2）从结果可以看出，虽然近四年犬狂犬病免疫抗体合格率有升有降，但近三年的结果显示，犬群狂犬病免疫抗体水平逐步维持在一个相对平衡的状态。免疫抗体水平的高低与疫苗免疫及样品来源有关，相关研究表明狂犬病疫苗最后一次免疫时间与免疫抗体合格率存在相关性[5]。首先是免疫质量，由于散养犬的攻击性及犬主不配合，造成免疫剂量不足及漏免等现象存在；其次是免疫时间，散养犬的流动性及不同年龄犬的混合，使疫苗免疫在时间上参差不齐；最后，人们对狂犬病危害的认识不够，主动预防意识不强，存在侥幸心理，认为免疫与不免疫无所谓，使免疫犬与未免疫犬共存，导致免疫抗体合格率的差异。

3）防治。由于狂犬病是一种危害严重的人畜共患急性传染病，应采取一系列综合的防控措施。首先，加强监测仍然是控制和消灭狂犬病的有效措施[6]，通过监测，及时掌握犬群狂犬病的抗体水平现状，为防控计划提供依据；其次，加大对犬猫狂犬病的免疫工作力度，做到不留死角、杜绝漏免，并做好适时补针工作；再次，加强宣传，提高人们对狂犬病的认知度，增强自我防护意识，一旦被犬猫咬伤、舔舐或抓伤，应及时对伤口进行正确处理，并就医；最后，健全基层动物防疫体系建设，巩固并提高兽医从业人员的专业技术及操作技能，力争做到狂犬病免疫密度达100%，免疫抗体合格率达100%，为控制和消灭狂犬病而不懈努力。