分化型甲状腺癌患者的NIS表达情况及其与甲状腺超声特征的关系

吕彦利,康秀梅,岳胜南,王燕

郑州市人民医院超声科,郑州4500000

甲状腺癌是一种常见的内分泌系统恶性肿瘤,占所有恶性肿瘤的1%,且发病率呈逐年递增趋势,根据分化程度,可以将其分为分化型甲状腺癌和未分化型甲状腺癌,分化型甲状腺癌又可以根据组织学来源分为甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma,PTC)和甲状腺滤泡状癌(follicular thyroid carcinoma,FTC)[1-3].钠/碘转运蛋白(sodium/iodide symporter,NIS)是一种跨膜蛋白,近年来随着对NIS基因序列以及分子结构的深入研究,发现其表达水平与甲状腺癌的发生发展有着密切的关系[4].超声检查具有操作方便、及时、准确等特点,在临床中已获得广泛应用.随着高分辨率彩超仪的普及,超声检查逐渐成为诊断甲状腺癌的首选方法,目前超声诊断良恶性甲状腺疾病主要是通过观察病灶形态、边界、回声强度以及血流分布[5-7].本研究通过检测甲状腺结节、PTC和FTC患者中NIS的表达情况,分析NIS表达与甲状腺超声特征的关系,旨在为分化型甲状腺癌的诊断和治疗提供依据,现报道如下.

1 资料与方法

1.1 一般资料

回顾性分析2016年2月至2017年2月于郑州市人民医院治疗的甲状腺结节或甲状腺癌患者的临床资料.纳入标准:①经甲状腺结节和分化型甲状腺癌诊治指南(2006年版)[8]确诊为甲状腺结节或PTC或FTC;②接受过彩色多普勒超声检查.排除标准:合并其他重大疾病的患者.根据纳入和排除标准,本研究共纳入45例甲状腺结节患者(甲状腺结节组)、51例PTC患者(PTC组)和21例FTC患者(FTC组).甲状腺结节组中,男12例,女33例;年龄 39～59岁,平均(43.2±2.8)岁.PTC组中,男20例,女31例;年龄35～63岁,平均(46.1±3.3)岁.FTC组中,男6例,女15例;年龄36～64岁,平均(48.1±3.1)岁.3组患者的年龄和性别比较,差异均无统计学意义(P>0.05),具有可比性.

1.2 免疫组织化学检测

将石蜡切片脱蜡、水化,使用双蒸水冲洗两次,采用3%的双氧水对内源性过氧化氢酶进行灭活,置于磷酸盐缓冲液中,微波加热进行抗原修复,滴加兔抗人NIS多克隆抗体,室温孵育1 h,然后滴加兔抗鼠多克隆抗体,室温孵育30 min,滴加二氨基联苯胺(diaminobenzidine,DAB)进行显色,然后自来水冲洗终止染色,采用苏木素复染1～2 min,使用梯度酒精脱水,二甲苯透明,然后封片,显微镜下观察.

1.3 结果判断

按照Soslow等[9]提出的方法对免疫组织化学染色结果进行评分.根据染色程度进行评分:未染色为0分,浅黄色为1分,黄色为2分,棕黄色为3.根据阳性细胞比例进行评分:0分,阳性细胞比例为0;1分,阳性细胞比例为1%～25%;2分,阳性细胞比例为26%～50%;3分,阳性细胞比例为51%～75%;4分,阳性细胞比例为76%～100%.每个切片选取5个视野,取平均值.每张切片的最后得分为两项评分之和,免疫组化评分(immunohistochemical score,IHS)>6分为阳性.

1.4 统计学方法

采用SPSS 22.0软件对-数据进行统计分析.计量资料以均数±标准差()表示,组间比较采用t检验;计数资料以例数和率(%)表示,组间比较采用χ2检验或Fisher确切概率法.以P<0.05为差异有统计学意义.

2 结果

2.1 3组患者NIS表达情况和IHS评分的比较

PTC组和FTC组患者的NIS阳性表达率分别为72.5%(37/51)和66.7%(14/21),均高于甲状腺结节组的24.4%(11/45),差异均有统计学意义(P<0.05);PTC组和FTC组患者的NIS阳性表达率比较,差异无统计学意义(P>0.05).PTC组患者的IHS评分为(7.83±0.34)分,高于FTC组的(5.29±0.26)分,差异有统计学意义(P<0.05);甲状腺结节组患者的IHS评分为(3.07±0.24)分,低于PTC组和FTC组患者,差异均有统计学意义(P<0.05).

2.2 PTC组和FTC组患者甲状腺超声特征的比较

甲状腺超声结果显示,FTC组患者的肿瘤直径为(1.77±0.10)cm,大于PTC组患者的(1.68±0.11)cm,差异有统计学意义(P<0.05).两组患者的颈部淋巴结肿大情况比较,差异无统计学意义(P>0.05);两组患者在回声、形态、边界、钙化以及血流方面比较,差异均有统计学意义(P<0.05)(表1).

表1 PTC组和FTC组患者甲状腺超声特征的比较

2.3 PTC组和FTC组患者NIS表达情况与甲状腺超声特征的关系

PTC组中,NIS阳性表达患者的肿瘤直径为(1.70±0.11)cm,明显大于NIS阴性表达患者的(1.64±0.10)cm,差异有统计学意义(P<0.01).FTC组中,NIS阳性表达和阴性表达患者的肿瘤直径分别为(1.77±0.12)cm和(1.76±0.09)cm,差异无统计学意义(P>0.05).PTC组中,NIS阳性表达和阴性表达患者在回声、形态、边界、钙化以及颈部淋巴结肿大方面比较,差异均无统计学意义(P>0.05);而血流方面比较,差异有统计学意义(P<0.05),NIS阳性表达患者血流表现以点条状为主,NIS阴性表达患者则以血流丰富为主.FTC组中,NIS阳性表达和阴性表达患者的上述甲状腺超声特征比较,差异均无统计学意义(P>0.05)(表2).

表2 PTC组和FTC组患者的超声特征和NIS蛋白表达情况[n(%)]

3 讨论

NIS作为一种跨膜蛋白,含有13个跨膜片段,在人体内不同组织中均有不同程度的表达,但在甲状腺中的表达水平最高,其功能主要是转运钠离子和碘离子,从而为人体合成甲状腺激素提供原料[10].研究报道,在不同的甲状腺疾病中,NIS的表达水平有所不同[11-13].Lazar等[14]研究报道,甲状腺癌患者对放射性核素的摄取能力较低,这是由NIS低表达造成的,并且肿瘤分期越高,NIS的表达水平越低.Dohán[15]则得出了与之相反的结论,其应用免疫组织化学方法和逆转录聚合酶链反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)对57例甲状腺恶性肿瘤患者的NIS表达水平进行检测,结果发现超过60%的甲状腺癌组织的NIS表达水平与正常组织相当,甚至超过正常组织.Saito等[16]采用蛋白质免疫印迹法对PTC患者的NIS表达水平进行检测,发现甲状腺癌中NIS出现了过表达,分化良好的甲状腺癌组织的NIS表达水平高于分化较差的甲状腺癌组织,且NIS在未分化癌中不表达.也有研究认为,不同病理分型甲状腺癌患者的NIS表达水平也有不同,其中乳头状癌中的NIS表达水平最高,其次是滤泡状癌,而滤泡型乳头状癌中NIS的表达水平最低[17].NIS不能正确定位于甲状腺滤泡基底膜,可能是造成131I治疗效果不佳的主要原因.本研究通过免疫组织化学方法检测甲状腺结节、PTC和FTC患者中NIS的表达水平,结果显示PTC组和FTC组患者的NIS阳性表达率均高于甲状腺结节组,差异均有统计学意义(P<0.05);PTC组患者的IHS评分高于FTC组,PTC组和FTC组患者的IHS评分均高于甲状腺结节组,差异均有统计学意义(P<0.05).

彩色多普勒超声的分辨率较高,可以清晰地从形态上对甲状腺病变进行评价,根据超声特征可以有效地诊断甲状腺癌.研究报道,PTC的超声特征多表现为单发、低回声且伴有钙化、血流丰富等,FTC的超声特征多表现为低回声、不均质肿块等[18],未分化癌的超声表现为体积大、回声多样化、出现钙化等[19].钙化在甲状腺超声图像中最为常见,研究表明,微钙化、低回声、形态不规则以及边界不清晰是甲状腺恶性肿瘤的征象[20].本研究中彩色多普勒超声检查结果显示,FTC组患者的肿瘤直径大于PTC组,差异有统计学意义(P<0.05);两组患者在回声、形态、边界、钙化以及血流方面比较,差异均有统计学意义(P<0.05).提示术前彩色多普勒超声可以有效地对PTC和FTC进行鉴别.PTC组中,NIS阳性表达和阴性表达患者在肿瘤直径和血流方面比较,差异均有统计学意义(P<0.05);NIS阳性表达患者的肿瘤直径大于NIS阴性表达的患者,NIS阳性表达患者的血流表现以点条状为主,NIS阴性表达患者则以血流丰富为主.提示NIS表达情况与血流丰富程度和肿瘤直径相关.FTC组中,NIS阳性表达和阴性表达患者的上述甲状腺超声特征比较,差异均无统计学意义(P>0.05).

综上所述,术前采用彩色多普勒超声可以有效鉴别PTC和FTC.尽管NIS阳性表达和阴性表达的甲状腺癌患者在血流方面存在差异,但本研究样本量较少,尚不足以证明超声可以预测分化型甲状腺癌组织中NIS的表达情况,有待于进一步扩大样本量进行证实.