不同受体羊同期发情及胚胎移植效果的研究

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(1.甘肃省畜牧兽医研究所；甘肃 平凉 74400；2. 甘肃省畜牧产业管理局；3.甘肃省华池县畜牧兽医局)

湖羊和小尾寒羊都是我国优秀绵羊品种，成述儒(2009)等对湖羊和小尾寒羊系统发育研究，这两个品种绵羊亲缘关系近，可能起源于共同祖先。湖羊和小尾寒羊都具有性成熟早，多胎性好和非季节性发情等特点，这两种羊分别被引入陇东地区进行舍饲圈养，很快了适应陇东气候条件，并保持原有的高效繁育性能。绵羊同期发情技术是利用外源激素控制或者改变绵羊卵巢的活动规律，使母羊卵巢处于相同的发育阶段，在预定的时间内集中发情排卵，从而用于人工授精配种或胚胎移植，有报道山羊和绵羊同期发情和胚胎移植受胎率与季节性和处理药品影响比较大。本试验旨在研究陇东地区湖羊和小尾寒羊在繁殖季节秋季同期发情处理效果，并选择同期发情整体度高和黄体质量好的羊，作为胚胎移植的受体羊，研究其受胎率，以提高当地肉羊胚胎移植技术水平，通过以点带面的作用，加快陇东地区肉羊繁殖新技术的推广，促进陇东地区舍饲肉羊产业提质增效示范作用。

1 材料与方法

1.1 试验羊的时间、地点和天气

本试验于2017年9月～2017年10月在庆阳市华池县绿野公司羊场进行，试验期间天气以晴朗为主，最低温度1℃，最高温度23℃，平均气温16℃，平均日照10.5 h/d。

1.2 试验羊的选择及饲养管理

选择舍饲养殖的湖羊和小尾寒羊，通过虎红平板检测无布氏杆菌传染病，无繁殖性疾病，泌乳性好，经产3～4胎次的母羊。湖羊和小尾寒羊各60只，进行分组和隔离，试验羊粗饲料以玉米青贮30%，小麦秸秆和干苜蓿70%，每天采食2～3 kg，精料玉米、胡麻渣和麸皮为主，每天饲喂0.5～1 kg，羊圈悬挂矿物质盐砖，自由饮水，水中添加多维电解质。

1.3 试验药品

羊用孕酮海绵栓(CIDR，Zoetis Australia公司，新西兰生产)，内含孕酮0.3 g/支；孕马血清促性腺激素(PMSG，宁波市三生药业有限公司生产)，规格1 000 IU/支；氯前列腺烯醇(PG，上海市计划生育科学研究所)，规格0.2 mg/支。

1.4 试验设计

本试验将60只湖羊随机分2组，为A组和B组，每组30只，每组分3个重复，每个重复相隔1 d，60只小尾寒羊随机分为2组，为C组和D组，每组分3个重复，每个重复相隔1 d。A组和C组同期发情采用“CIDR+PG+PMSG”处理方案I，B组和D组同期发情采用“CIDR+PG”处理方案II。

表1 湖羊和小尾寒羊同期发情处理方案

试验羊放栓前，用温水清洗尾部，并擦拭干净，将CIDR栓温柔放置于试验羊阴道，用量为1枚/只，A组和C组试验羊颈部肌肉注射PMSG，量为250 IU/只，A组、B组、C组和D组试验羊PG用量用法相同，臀部肌肉注射，均为0.1 mg/只，同期发情方案见表1。

1.5 试情和发情鉴定

撤栓后12 h开始试情，用性欲旺盛、无疾病并戴有试情布的公羊上午、下午各试情1次，间隔12 h，以母羊摇尾、外阴肿胀并接受爬跨视为发情。

1.6 黄体检查及胚胎移植

受体羊根据同期发情状况，受体羊和供体羊发情相差在12 h内，对受体羊做腹腔手术检查黄体，确定黄体数量和大小，受体羊2个卵巢中有一个大黄体(表面积在0.5×0.5 cm2以上)或者2个以上小黄体，均可作为胚胎移植合格受体羊。本试验胚胎来自黑头萨福克供体羊，供体羊与受体羊经过同期发情处理，供体羊同时做超数排卵处理，通过冲胚，镜检优质胚胎，手术法移植给受体母羊[2]。对移植后35 d不返情的羊，再经过B超妊娠诊断，确定有胎儿者为受孕羊。

1.7 数据分析

试验数据同期发情率，黄体合格率，受胎率等用百分数表示，差异显著性采用SPSSl9.0中t检验统计分析。

2 结果与分析

2.1 不同品种受体羊同期发情效果

由表2可知，经药物和激素同期发情处理试验羊，湖羊组和小尾寒羊组的同期发情率分别为88.33%(52/60)和85%(50/60)，两者差异不显著(P>0.05)。而且湖羊同期发情主要集中在撤栓后13～60 h，期间发情率为83.33%，小尾寒羊同期发情主要集中在撤栓后0～48 h，期间发情率为81.67%。这可能是不同品种间遗传因素和对激素敏感程度不同造成的结果。

表2 湖羊和小尾寒羊同期发情的效果

注:同列数据肩标小写字母不同表示差异显著(P<0.05)，相同表示差异不显著(P>0.05)。

2.2 不同处理方案同期发情效果

应用不同同期发情方案处理试验羊，由表3可知，同期发情方案I和方案II的发情率分别是90%(54)和80%(48)，两者差异显著(P<0.05)，方案I同期发情率显著高于方案II的发情率10%，说明不论受体羊是湖羊还是小尾寒羊，方案I的同期发情效果明显。

表3 不同处理方案对两种羊的同期发情效果

注:同列数据肩标小写字母不同表示差异显著(P<0.05)，相同表示差异不显著(P>0.05)。

2.3 不同受体羊胚胎移植效果

根据受体羊和供体羊发情的同期性，供体羊在撤栓后13～36h之间集中发情，并做间隔12h的2次本交配种，对发情的102只受体羊采用手术法打开腹腔，观察黄体大小和质量，并选择合格黄体羊进行鲜胚移植。由表4可知，其中发情的52只湖羊和50只小尾寒羊中，黄体合格羊分别为37只和32只，黄体合格率分别为71.17%(37/52)和64%(32/50)，两者差异不显著(P>0.05)，对黄体合格者，做单胚胎移植，妊娠数分为别25只和21只，受胎率分别为67.57%(25/37)和65.63%(21/32)，两者差异不显著(P>0.05)，37只受体湖羊组中有2只难产，小尾寒羊组全部顺产，但两者差异不显著(P>0.05)。

表4 不同品种受体羊胚胎移植效果

注:同列数据肩标小写字母不同表示差异显著(P<0.05)，相同表示差异不显著(P>0.05)。

3 讨论

3.1 不同品种对同期发情和胚胎移植的影响

湖羊和小尾寒羊都是我国高繁殖率绵羊，一般作为商品肉羊的基础繁殖母羊，普通绵羊发情是季节性明显，一般集中在春秋两季发情。湖羊和小尾寒羊引入陇东地区继续保持了它们的多胎性和全年四季发情的优良特点。本试验用不同方案处理对两个种绵羊进行同期发情，湖羊和小尾寒羊在撤栓后，湖羊有88.33%发情，集中在撤栓后13～36 h，小尾寒羊同期发情率低于湖羊发情率3.33%，而且集中在撤栓后0～48 h，而供体羊发情配种在撤栓后13～36 h，基本与湖羊集中发情时间段相吻合，结果是湖羊组胚胎移植受胎率高于小尾寒羊组，说明供体羊和受体羊发情时间越接近，受胎率越高。另外，湖羊组整体发情率高于小尾寒羊组，可能与舍饲环境有关，湖羊从南方浙江到引进北方陇东地区，一直舍饲养殖，该品种习惯于舍饲环境，而小尾寒羊养殖习惯用半舍饲半放牧，舍饲养殖下，需要充足的运动场，故两种都在全舍饲养殖下，运动量不知可能是影响小尾寒羊同期发情率低的因素之一。

3.2 不同处理方案对同期发情的影响

Keith J Btteridge(2003)研究表明，同期发情技术是胚胎移植体系中重要环节，某一个品种家畜同期发情方法和途径还不具体。本试验采用两种同期发情方案处理胚胎移植受体羊，方案I中应用“CIDR+PG+PMSG”，其同期发情率显著高于方案II“CIDR+PG”，手术后对发情的受体羊黄体检查，方案I组中黄体质量和大小优于方案II组。这与聂竞舟(2013)等人研究小尾寒羊同期发情结果一致，“CIDR+PG+PMSG”处理同期发情效果优于“CIDR+PG”，这可能孕马血清促性腺激素(PMSG)类似促卵泡素(FSH)和促黄体素(LH)的双重活性，但以FSH的作用为主，因此有着明显的促卵泡发育的作用，同时有一定的促排卵和黄体形成的功能，故形成功能黄体效果好。因此，在舍饲肉羊胚胎移植受体羊同期发情处理中，应用“CIDR+PG+PMSG”激素组合优先采纳。