3种软枣猕猴桃的离体快繁技术

2019-01-06 09:12韩德伟关丽霞
现代园艺 2019年2期
关键词:软枣离体试管

韩德伟,关丽霞

(辽宁农业职业技术学院,辽宁营口 115009)

软枣猕猴桃(Kiwi berry),别名:奇异莓、软枣子、圆枣子,是猕猴桃科猕猴桃属多年生木质藤本植物,有“水果之王”的美称,主要分布在我国的华北、西北、东北及长江流域,其它国家也有分布。其中,我国东北南部山区较多见,是珍贵的抗寒果树资源,也是当今世界新兴小浆果类树种之一。目前,丹东地区野生资源最为丰富。软枣猕猴桃果实翠绿无毛,细嫩多汁,酸甜可口,风味独特,营养丰富。软枣猕猴桃享有“水果之王,维C之冠”的美誉。软枣猕猴桃不仅抗病虫害,而且维生素C含量极高,果实无污染、口感好,全株根、茎、叶、果实均可入药。因此,市场对软枣猕猴桃需求量不断增加,但软枣猕猴桃种质资源缺乏,采用播种方式有性繁殖难以区分雌雄株,通过嫁接、扦插等常规无性繁殖方式,繁殖系数低、周期长、繁殖困难,且品种间差异显著,故而影响了优良软枣猕猴桃品种的大面积推广。为了快速满足市场需要,及时提供大量整齐一致、优良的种苗,本文对3种市场深受欢迎的软枣猕猴桃进行了深入的离体快繁技术研究。

1 材料与方法

1.1 试验材料

供试材料为桓优1号、龙成2号、魁绿。上述材料均取自辽宁营口盖洲惠顺果蔬合作社春季当年生枝条。

1.2 试验方法

在春季温室内软枣猕猴桃萌动20d后,剪取直径0.5cm左右、无病虫害、健壮、未木质化的枝条。剪去枝上叶片,留下0.3cm长的叶柄,切割为4~6cm左右长的茎梢,然后置于流水下冲洗0.5~1h,再在无菌操作工作台上,用70%乙醇溶液消毒30s,2.0%NaClO浸泡消毒8~10min,最后用无菌水冲洗3次,沥干水分备用。

1.2.1 初代诱导培养。将备用材料,剪切成1.5~2.5cm长、带1~2节的茎段,接种于初代诱导培养基中,诱导培养基设3个处理:①MS+BA 0.7mg/L+NAA 0.1mg/L(附加蔗糖 30g/L、琼脂 7g/L,pH 值 5.8~6.0,下同),②MS+BA 1.0mg/L+NAA 0.1mg/L,③MS+BA1.5mg/L+NAA 0.1mg/L。3个品种3种培养基各接种30瓶,重复2次。培养条件:温度 18~21℃、光照强度 1800~2300Lx、光照14h/d。

1.2.2 继代增殖培养。将外植体诱导出的腋芽,切割成含1~2节的茎段或茎尖,接种于继代增殖培养基上进行增殖培养。增殖培养基同样设3个处理:①MS+6-BA 0.5mg/L+NAA 0.05 mg/L,②MS+6-BA 0.7mg/L+NAA 0.05mg/L,③MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.05mg/L,3个品种3种培养基各接种30瓶,重复2次。培养条件同上。

1.2.3 试管生根及移栽驯化。将要进行生根培养的增殖苗,剪切成高3cm以上的单苗,接种到生根培养基1/2 MS+IBA 0.1mg/L+NAA 0.05mg/L中进行生根培养。培养条件同上:温度18~21℃,光照强度20000~30000 Lx、光照14h/d。生根培养15d后,将根长0.5cm以上的试管苗进行驯化移栽和养护管理。

2 结果与分析

2.1 3种软枣猕猴桃的初代诱导

3种软枣猕猴桃的外植体在初代诱导培养基上培养,7d后,陆续可见茎段叶腋处有芽萌出,随着时间延长,芽逐渐长大,28d后长成5cm高以上新梢。在诱导培养基①MS+BA 0.7mg/L+NA 0.1mg/L上,3个品种软枣猕猴桃均可萌出1~4个不等新梢,在相同培养条件下,新梢生长时间长,生长速度相对较慢;在诱导培养基②MS+BA 1.0mg/L+NAA 0.1mg/L上,3个品种软枣猕猴桃均可萌出3~6个不等新梢,在相同培养条件下,新梢生长时间较短,生长速度相对较快;在诱导培养基MS+BA 1.5mg/L+NAA 0.1mg/L上,3个品种软枣猕猴桃均可萌出4~8个不等新梢,在相同培养条件下,新梢生长时间最长,生长速度相对最慢,且均伴有玻璃化苗产生。但3个品种软枣猕猴桃在相同的初代诱导培养基中差异不明显。所以,MS+BA 1.0 mg/L+NAA 0.1mg/L是3种软枣猕猴桃诱导的最佳培养基。

2.2 3种软枣猕猴桃的增殖培养

转接到增殖培养基中培养的增殖苗,12d后,在基部或叶腋处分化出新的芽苗,随着时间延长,芽苗逐渐长大,30d左右统计各个品种在各培养基上的增殖情况,从而发现桓优1号、魁绿2个品种在增殖培养基MS+6-BA 0.7mg/L+NAA 0.05mg/L上增殖效果最好,增殖系数可达8以上;龙成2号在增殖培养基MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.05mg/L上增殖效果最好,增殖系数在7以上。

2.3 3种软枣猕猴桃的生根培养及驯化移栽

增殖苗转接到生根培养基中培养,7d后,苗基部形成根原基,15d左右,长成具有2~3条、0.5cm长的根,从而形成完整植株。3种软枣猕猴桃试管苗瓶内生根率可达98%以上。此时,将有根试管苗移至温室,上覆遮阳网,闭瓶炼苗3d,然后再开瓶炼苗3d,最后开盖取苗,洗去苗基部培养基,移栽到灭菌过的河沙、中草炭(2∶1)的混合基质中。栽后前期,上边要搭小拱棚,栽培管理条件:空气湿度80%以上,温度20~25℃,光强5000Lx以下。1个月后,有新叶长出,代表成活,成活率在90%以上。

3 小结与讨论

软枣称猴桃果实清香适口、营养丰富、维生素含量较高,同时是制作饮料和食品的美味原料。为满足市场对软枣猕猴桃种苗的需求,选育出了产量高、果实大、品质好的优良单株。为达到短期、规模化增殖,对3个品种的优良单株进行了离体快繁的研究,结果表明:3种软枣猕猴桃的初代诱导最佳培养基为MS+BA 1.0mg/L+NAA 0.1mg/L;桓优1号、魁绿2个品种的最适宜增殖培养基为MS+6-BA 0.7mg/L+NAA 0.05mg/L,龙成2号的最适宜增殖培养基为MS+6-BA 1.0mg/L+NAA0.05mg/L;3种软枣猕猴桃在培养基1/2 MS+IBA 0.1mg/L+NAA 0.05mg/L中生根率达90%以上。

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