啶氧菌酯原药中有机杂质的鉴定分析

项 军，胡 礼，孙 炯，张 萍，黄 路

(1.湖南加法检测有限公司，湖南 长沙 410017；2.湖南化工研究院有限公司，国家农药创制工程技术研究中心，湖南 长沙 410017)

农药全组分分析是农药原药登记资料的重要组成部分，随着农药毒理学研究的进一步发展，人们逐渐认识到农药杂质对环境的潜在危害，因此对农药杂质的研究显得尤为重要。

啶氧菌酯(picoxystrobin)化学名称为(E)-3-甲氧基-2-[2-(6-三氟甲基-2-吡啶氧甲基)苯基]丙烯酸甲酯，是一种具有广谱和内吸特性的甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂。张继伟等[1]对啶氧菌酯的一个主要杂质进行了液质研究，但对该农药其它杂质的分析研究还未见报道。

本文使用高效液相色谱-质谱联用法对啶氧菌酯原药中的不同有机杂质进行了分离分析和鉴定。

2 试验部分

2.1 试剂和溶液 甲醇：色谱纯；水：新蒸二次蒸馏水；啶氧菌酯杂质1((Z)-3-甲氧基-2-[2-(6-三氟甲基-2-吡啶氧甲基)苯基]丙烯酸甲酯)标样：已知质量分数，99.6%(湖南化工研究院)；啶氧菌酯杂质2((E)-3-甲氧基-2-[2-(6-三氟甲基-2-吡啶氧甲基)苯基]丙烯酸乙酯)标样：已知质量分数，99.0%(湖南化工研究院)；啶氧菌酯杂质3((E)-3-乙氧基-2-[2-(6-三氟甲基-2-吡啶氧甲基)苯基]丙烯酸甲酯)标样：已知质量分数，99.0%(湖南化工研究院)；试样：啶氧菌酯原药一、啶氧菌酯原药二。

2.2 仪器 高效液相色谱-质谱联用仪：Agilent 1260/6120 LC/MS；Millipore超纯水制备系统。

2.3 仪器操作条件 色谱柱：Eclipse Plus C18，5μm，150mm×4.6mm(i.d.)；流动相：甲醇∶水=60∶40(V/V)；流量：1.5mL/min；柱温：35℃；离子源：APCI+源；质量数范围：50～800m/z；相对保留时间：原药一：啶氧菌酯约13.4min，杂质约20.5min；原药二：啶氧菌酯约13.3min，杂质1约11.7min、杂质2约20.0min。

2.4 操作步骤

称取试样约0.3g (精确至0.000 2g)，置于10mL容量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀。在上述色谱条件下，将仪器连续运行至基线稳定，开始进样，记录各峰的保留时间并进行质谱检测。

3 结果与讨论

3.1 啶氧菌酯原药中有机杂质结构解析 啶氧菌酯原药一的液相色谱图(图1)，啶氧菌酯原药一的杂质和啶氧菌酯杂质2标样的APCI质谱图(图2、3)。

图1 啶氧菌酯原药一的液相色谱图

图2 啶氧菌酯原药一杂质的APCI质谱图

图3 啶氧菌酯原药二杂质2标样的APCI质谱图

啶氧菌酯原药二的液相色谱图(图4)，啶氧菌酯原药二的杂质和啶氧菌酯杂质1、3标样的APCI质谱图(图5、6、7、8)。

图4 啶氧菌酯原药二的液相色谱图

图5 啶氧菌酯原药二杂质1的APCI质谱图

图6 啶氧菌酯原药二杂质2的APCI质谱图

图7 啶氧菌酯杂质1标样的APCI质谱图

图8 啶氧菌酯杂质3标样的APCI质谱图

啶氧菌酯原药一样品中的杂质与啶氧菌酯原药二样品中的杂质2保留时间、质谱图极其相似，根据关键碎片191与205的区别，判断为CH-OCH3与CH-OC2H5的区别。啶氧菌酯杂质谱图解析(表1)。

表1 啶氧菌酯杂质和杂质标样谱图解析

续表

3.2 啶氧菌酯原药中杂质形成分析

3.2.1 杂质1形成 3-羟基-2-邻甲苯基丙烯酸甲酯的反应过程中，产生Z-式和E-式，最后反应形成Z-啶氧菌酯(杂质1)。

3.2.2 杂质2形成 啶氧菌酯合成后，用甲醇结晶过程中，甲醇中可能存在少量乙醇，形成了杂质2。

3.2.3 杂质3形成 在(Z)-3-甲氧基-2-邻甲苯基丙烯酸甲酯的合成过程中，反应生成过程中，原料硫酸二甲酯中含极少量的硫酸二乙酯，反应生成(Z)-3-乙氧基-2-邻甲苯基丙烯酸甲酯，最后反应形成杂质3。

4 结论

本文建立了啶氧菌酯原药中有机杂质的定性分析方法，鉴定了啶氧菌酯原药中的有机杂质(Z)-3-甲氧基-2-[2-(6-三氟甲基-2-吡啶氧甲基)苯基]丙烯酸甲酯、(E)-3-甲氧基-2-[2-(6-三氟甲基-2-吡啶氧甲基)苯基]丙烯酸乙酯、(E)-3-乙氧基-2-[2-(6-三氟甲基-2-吡啶氧甲基)苯基]丙烯酸甲酯，其中(E)-3-甲氧基-2-[2-(6-三氟甲基-2-吡啶氧甲基)苯基]丙烯酸乙酯与(E)-3-乙氧基-2-[2-(6-三氟甲基-2-吡啶氧甲基)苯基]丙烯酸甲酯保留时间、质谱图极其相似，极易混淆。该方法是一种实用、便捷的分析方法。