探析冰冻机采血小板复融出现絮状物凝块的原因

广东省清远市中心血站（511515）杨颜菁

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取我站2012年5月～2018年5月冰冻机采血小板240份，其中男性132名，女性108名，年龄20～53岁。所有献血者均知情同意本研究，一般资料具有可比性（P＞0.05），同时经过市输血研究所批准。仪器设备：血小板振荡保存箱，HJX-IA海尔恒温融浆机，-80℃深低温冰箱(日本 SANYO公司)，二甲基亚砜(DMSO)原液由上海博光有限公司提供，75%DMSO液的配制是由DMSO原液与浓度为0.9%NaCl以3∶1的比例进行配制。其中配制溶液需要在无菌条件下进行。

1.2 方法

1.2.1 血小板的采集 根据PLT、HCT、献血者的体重以及身高等情况对血小板的采集量进行设置，在血小板采集完毕之后，取50ml血小板作为血小板采集样本，将其密封装至血小板专用保存袋，并且将其放置于血小板振荡箱中进行振荡约一天时间。

1.2.2 冰冻血小板的制备 DMSO原液组冰冻血小板的制备。在百级无菌室内进行振荡，振荡的速度一般是一分钟内频率为80～90次，同时向其中缓慢加入DMSO原液，加入DMSO原液至其浓度达到5%，然后对DMSO原液与血小板悬液进行摇动使两者均匀混合[1]。

75%的DMSO溶液组冰冻血小板的制备。取浓度为75%的DMSO溶液将其储存在温度为-50℃的冰箱中，在需要使用之前取出即可，按照血小板净重量的0.71（注意需要去除血小板采集袋的重量），抽取浓度为75%的DMSO溶液将其直接注入血小板袋内至DMSO原液浓度达到5%，对DMSO原液与血小板悬液进行摇动使两者均匀混合。经过DMSO化的血小板均保存在温度为-80℃的低温冰箱进行储存。

1.2.3 冰冻血小板的融化 在进行临床输注之前，医务人员需要从温度为-80℃的深低温冰箱中将冰冻血小板取出，然后迅速将其置入温度为38℃～42℃的解冻箱中将冰冻血浆进行解冻融化，在确保血小板融化后没有渗漏、没有絮状物并且满足可以输注的条件下，可以对患者进行血小板输注。

1.3 统计学方法 数据应用SPSS18.0进行分析，其中计数资料（%）进行X2检验，计量资料（±s）进行t检测检验，P＜0.05提示有显著差异。

2 结果

2.1 不同浓度冷冻液出现絮状物比较 75%的DMSO溶液组冰冻机采血小板出现絮状物的例数（1例）明显少于DMSO溶液组（14例）（P＜0.05）。

2.2 储存温度变化不同冷冻液出现絮状物比较 DMSO溶液组冰冻机采血小板出现絮状物的例数为13例，与75%的DMSO溶液组的14例相比，无显著差异性（P>0.05）。

3 讨论

DMSO是医疗机构普遍使用的将血小板进行冰冻的冷冻保护剂，相关研究人员指出，将DMSO溶液稀释至75%的浓度能够释放一部分热量，减少了血小板的损伤情况，同时，将DMSO溶液稀释至75%的浓度还可以利用低温溶液对溶液混合产生的热量进行有效地吸收。除此之外，该操作相对安全简便，并且效率比较高。我院在本次研究过程中，75%的DMSO溶液组冰冻机采血小板出现絮状物的例数明显少于DMSO溶液组（P＜0.05），与很多学者的研究结果具有一致性。

研究资料显示，在降温过程中进行温度控制容易导致冰冻血小板产生絮状物，并且血小板胞内冰晶容易导致血小板出现严重损伤[2]。我站在本次研究过程中，加入两种不同浓度的冷冻液的血小板，控制温度不同并且在储存过程中温度出现巨大变化，两组均有絮状物凝块出现，并且DMSO溶液组冰冻机采血小板出现絮状物的例数与75%的DMSO溶液组无显著差异性（P>0.05）。因此，需要在低温进行血小板的保存过程中，必须控制温度防止细胞出现严重损伤。在血小板的日常保存过程中，需要注意在降温过程中避免打开冰箱门，同时在其他时间应该尽量减少打开冰箱门的次数。除此之外，要保证冰箱的供电情况。

综上所述，DMSO原液的浓度的不同容易导致冰冻机采血小板复融出现絮状物凝块，储存温度的变化对冰冻机采血小板复融出现絮状物凝块没有显著影响。