丙氨酸氨基转移酶试剂盒在不同检测系统下的可比性

彭琳，颜敏，黄海萍，刘园园，罗洁

湖南省医疗器械检验检测所 （湖南长沙 410014）

丙氨酸氨基转移酶（alanine aminotransferase，ALT）是 一种参与人体蛋白质新陈代谢的酶，可加快蛋白质和氨基酸在体内的转化，广泛存在于人体各组织、器官、肌肉和骨骼中，以肝细胞细胞质中最多。当人体内各组织器官损伤或病变时，ALT被释放到血液中，使血液中ALT水平增加。仅少量的肝细胞损伤，即可使ALT水平增高，因此，ALT被世界卫生组织（World Health Organization，WHO）推荐为肝功能损伤最敏感的检测指标之一。

通过查询国家食品药品监督管理总局数据库获悉，ALT检测试剂盒的有证生产企业有446家，但各企业生产规模、技术水平和产品质量参差不齐。经调研发现，部分生产企业将未取得医疗器械注册证的质控品、校准品，以诊断试剂盒打包赠送的形式，赠送给医院，用于医院诊断试剂质控和诊断设备校准。为了了解市场上ALT试剂盒的质量情况，探讨不同企业ALT试剂盒测得结果之间的可比性，为检测结果的互认提供数据支持，并初步探讨校准与溯源在临床生化检验质量中的重要作用，我们在东芝TBA-120FR全自动生化分析仪上，利用国家及国际标准物质对不同检测系统试剂盒测定结果的准确度进行验证，并对不同检测系统结果的溯源性和可比性进行分析，现报道如下。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 仪器

采用东芝TBA-120FR全自动生化分析仪。

1.1.2 检测系统组成

目标检测系统采用北京、广州、湖南、四川等省市的12家企业生产的ALT试剂盒及其配套校准品，将12家企业试剂盒分别用A～L表示，将各试剂盒提供的校准品相应用a～l表示，从而组成相应的检测系统Aa～Ll。自建检测系统[1]是将以上12家企业生产的ALT试剂盒分别采用国际标准物质[定值结果：103.8 IU/L（1 ml/支）；来源：ERM]校准组成相应检测系统，国际标准物质校准时统一用j表示，组成相应的检测系统 Aj～Lj。

1.1.3 国家标准物质

采用人血清基质ALT活性浓度标准物质[证书编号：GBW（E）090352；定值日期：2017年12月；定值结果：52.3 IU/L（1 ml/支）；生产单位：嘉兴博泰生物科技发展有限公司]。

1.2 方法

1.2.1 目标检测系统准确度评价

将12家企业的试剂盒均按其说明书设定分析参数，并用各自配套的校准品进行校准，分别检测国家及国际标准物质，批内连续测定10次，计算批内变异系数（coefficient of variation，CV）及相对偏差（relative deviation，RD）。

1.2.2 自建检测系统准确度评价

将12家企业的试剂盒均按其说明书设定分析参数，并用国际标准物质进行校准，分别检测国家标准物质，批内连续测定10次，计算批内CV及RD。

1.3 统计学处理

准确度：取已知浓度的标准物质，按试剂盒说明书的规定进行测定，重复10次。计算样本测定结果均值（X），用RD表示测定结果的准确度（见公式1）。重复性：取标准物质进行检测，用同一试剂盒重复测定10次，计算测定值的CV，CV表示测定结果的重复性。见公式2。

（公式1，T为参考值，X为Xi的平均值）

（公式2，Xi为10次测定结果， X为Xi的平均值）

2 结果与分析

2.1 目标检测系统测定结果

对12家企业的ALT试剂盒采用配套校准品进行校准后，分别测定国际标准物质及国家标准物质，结果显示：12家企业试剂盒的CV介于0.35%～2.74%，其中国家标准物质的CV介于0.61%～2.74%，国际标准物质的CV介于0.35%～2.22%。RD介于1.30%～8.96%，其中国家标准物质的RD介于1.30%～8.35%，国际标准物质的RD介于1.32%～8.96%。见表1。

表1 目标检测系统CV及RD统计结果（%）

2.2 自建检测系统测定结果

对12家企业的ALT试剂盒采用国际校准品进行校准后，分别测定国家标准物质，结果显示：12种试剂盒的CV介于0.49%～4.32%，RD介于8.93%～20.07%，见表2。

表2 自建检测系统CV及RD统计结果（%）

2.3 统计结果分析

目标检测系统检测样本的重复性（＜5%）及准确度（＜10%）均较小，用国际校准物质校准后自建检测系统检测样本的重复性仍较小（＜5%），但准确度（8.93%～20.07%）明显增高，其中约83%的试剂盒准确度偏差＞10%。

3 讨论

检测系统是指完成一个检测项目涉及的仪器、试剂、校准品、操作程序等的组合[2-3]。标准化、系统化及溯源规范性对加强实验室质量管理及提高临床检验质量具有重要意义[4-5]。在目前国内检测系统质量参差不齐的情况下，应对自建系统进行评估，以保障临床检验结果的准确度及各实验室结果的可比性。

本研究结果显示，自建检测系统准确度偏差较目标检测系统明显增高，原因可能是一方面试剂盒配套校准品与国际标准物质的基质不同而产生基质效应，另一方面两者溯源链不统一而导致的产品差异。校准品、质控品和参考物质均为处理过的样本，但由于其来源、生产工艺的不同，检测中产生的基质效应也不同。为避免校准过程中引入系统偏倚，在进行任何一种项目检测前均需进行比较，按要求配套使用仪器、试剂、校准品。目前我国各企业校准品溯源不统一，各试剂企业校准品可比性不强，还未能实现通用或互换使用，在血清ALT检测时仍需要使用各自配套的校准品。

市场上存在未经注册的校准品、质控品，不确定其量值是否能溯源，赋值是否准确，其测定结果准确度可能存在问题，给临床使用带来风险。因此建议监管部门严格要求校准品和质控品的注册审批，并严格监管生产和经营。国家应加快参考物质的研制，以便企业在研制和生产产品过程中规范产品溯源，并引导不同企业产品溯源统一，为实现试剂盒结果互通互换奠定基础。