细胞因子表达水平与体外受精-胚胎移植术后早产的关系▲

陈巧佩 杨钦灵 潘平山 赵江阳 周晖登 王立芳

(广西壮族自治区妇幼保健院1 检验科，2 产科，南宁市 530003，电子邮箱：chenqiaopei@163.com)

目前，体外受精-胚胎移植(invitrofertilization-embryo transfer，IVF-ET)已成为治疗不孕症的主要手段，术后临床妊娠率不断提高，但移植术后早产率也与之俱增。广西地处中国的西南部，孕妇早产率，尤其是IVF-ET术后的早产率更高，严重影响了优生优育的推进[1]。因此，积极寻找早产的病因是产科医生面临的重要问题。目前引起早产的原因尚未完全明了，可能与遗传、免疫、感染等因素相关[2]。本文检测IVF-ET术后早产孕妇及自然妊娠早产孕妇、孕周相当正常妊娠孕妇的外周血中干扰素(interferon，IFN)-γ、白细胞介素(interleukin，IL)-2、IL-4的表达差异，探讨免疫调节异常与IVF-ET术后早产的关系，为预防、诊治IVF-ET术后早产提供一定的理论与临床参考依据。

1 资料与方法

1.1 临床资料 回顾性分析2015～2017年在我院分娩的79例产妇的资料，均排除严重心肝肾疾病、糖尿病、甲状腺功能异常、肿瘤、血液性疾病及免疫性疾病及正在服用免疫药物者。根据妊娠结局分为IVF-ET术后早产组32例，自然妊娠早产组31例，正常足月妊娠组16例。根据有无感染(绒毛炎症、宫内感染)，将IVF-ET术后早产和自然妊娠早产产妇分为感染组及非感染组。IVF-ET术后早产感染组16例，年龄(29.68±2.24)岁，分娩时孕周(32.69±3.05)周；IVF-ET术后早产组非感染组16例，年龄(30±2.48)岁，分娩时孕周(33±2.22)周；自然妊娠早产感染组15例，年龄(28.6±2.75)岁，分娩时孕周(31.07±3.15)周，自然妊娠早产非感染组16例，年龄(28.88±2.78)岁，分娩时孕周(31.63±3.14)周；正常妊娠组均为无临床感染的孕妇，年龄(28.25±1.61)岁，分娩时孕周(39.13±1.09)周。5组年龄比较，差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。

1.2 细胞因子检测方法 各组产妇于妊娠20～25周时采集其外周静脉血2～4 ml，取血清置于-80℃中保存备用。采用定量酶联免疫吸附法检测外周血血清IFN-γ、IL-2、IL-4水平，酶联免疫吸附试剂盒购自eBioscience公司(IFN-γ批号：85-BMS228，IL-2批号：85-BMS221/2，IL-4批号：85-BMS225/2)，严格按照产品说明书操作。

1.3 统计学分析 应用SPSS 16.0统计学软件进行统计学分析。计量资料以(x±s)表示，多组均数比较采用单因素方差分析，两两比较采用LSD-t法。以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

5组IFN-γ水平比较，差异均无统计学意义(P>0.05)。IVF-ET术后早产感染组、自然妊娠早产感染组、正常妊娠组IL-4水平高于IVF-ET术后早产非感染组、自然妊娠早产非感染组(均P<0.05)；IVF-ET术后早产感染组IL-4水平高于自然妊娠早产感染组、正常足月妊娠组(均P<0.05)；正常妊娠组、自然妊娠早产非感染组、IVF-ET术后非感染组IL-4水平依次降低(均P<0.05)。各组均未检测到IL-2表达。见表1。

表1 各组血清IFN-γ、IL-2及IL-4水平比较(x±s，pg/ml)

注： LDL表示检测低于IL-2的下限值(18.8 pg/ml)，无法得到具体数值。*除自然妊娠早产感染组与正常足月妊娠组外，其余组间两两比较均P<0.05。

3 讨 论

早产是导致80%围生儿死亡及50%以上存活新生儿患病的主要原因[3-4]。早产的机制复杂，与宫内感染、子宫颈口关闭不全、妊娠合并症、免疫失衡等有关[2]。IVF-ET术后的临床妊娠率不断提高，但移植术后自发早产率也随之增高，其早产率为48.4%[1]。我院近5年IVF-ET术后早产率为25%～30%，远高于5%～15%的自然妊娠早产率[3]。因此，分析IVF-ET术后自发早产的相关因素，对指导临床预防早产有重要意义。血清中细胞因子表达异常提示机体免疫功能失调，但其在早产产妇中的变化及其意义尚不清楚。

细胞因子是机体免疫细胞和非免疫细胞合成和分泌的小分子多肽类因子，既是炎症介质又是免疫调节因子。Th1细胞介导细胞免疫，主要分泌IL-2、IFN-γ、肿瘤坏死因子-α、IL-12等因子；Th2细胞介导体液免疫，主要分泌IL-4、IL-6、IL-10等因子。Th1型细胞因子有免疫杀伤作用，可抑制胚胎着床、滋养细胞生长，对妊娠无益；而Th2型细胞因子主要介导B细胞增殖，抗体产生，同种排斥反应的免疫耐受，有利于妊娠[5]。因此，正常妊娠时以Th2型细胞因子为主，自然流产时则出现Th1型细胞因子增多的现象。有研究结果显示，原因不明之复发性流产产妇的外周血IL-2、IFN-γ水平升高[6]。 Kedzierska-Markowicz等[7]也发现，早产产妇宫颈分泌物中的IL-1β、 IL-8、 IFN-γ水平高于足月产产妇。但本研究结果显示，各组产妇IFN-γ水平无明显差异(P>0.05)，因此IFN-γ水平与早产的关系仍需进一步证实；在各组产妇血清中均没有检测到IL-2，可能与试剂盒的检测灵敏度相关。此外，IVF-ET术后早产非感染组、自然妊娠早产非感染组IL-4水平均低于正常足月妊娠组(均P<0.05)，且以IVF-ET术后早产非感染组IL-4水平最低(P<0.05)。提示在无感染的情况下，IL-4水平降低可能与IVF-ET术后早产有关，这与既往研究结果相似[6]。

IL-4 由活化的Th2细胞产生，是一种抗炎性因子，可诱导T、B淋巴细胞的活化增殖，促进感染的发生，且与感染的严重程度呈正相关[8]。此外，IL-4通过拮抗IFN-γ活性作用而抑制细胞介导的免疫反应，抑制Th1细胞活化，促进T细胞向Th2分化，Th2细胞形成后分泌更多的IL-4，形成循环[9]。在本研究中，IVF-ET术后早产感染组、自然妊娠早产感染组血IL-4水平均高于IVF-ET术后早产非感染组、自然妊娠早产非感染组，且IVF-ET术后早产感染组血IL-4水平均高于自然妊娠早产感染组、正常足月妊娠组(均P<0.05)，这可能是感染诱发并激活了自然杀伤细胞等免疫细胞，导致IL-4水平升高，因此在IVF-ET术后，感染所导致的IL-4过度表达也可诱发早产，这与Dudley等[10]的研究结果相似。

综上所述，IL-4水平异常可能与IVF-ET术后早产有关，在无感染的情况下，IL-4水平下降或可引起早产，而感染所导致的IL-4过度表达也可诱发早产。