血清中INF-γ、ADA和TB-IGRA水平变化与结核性胸膜炎患者病情严重程度的关系研究

崔魁丽，刘卫国，李秋玉，李四清

(新乡医学院第一附属医院结核内科，河南 卫辉 453100)

流行病学研究表明，我国部分地区结核性胸膜炎的发病率可接近485～683/1万人左右[1]。临床上结核性胸膜炎的发生，不仅能够导致患者生活质量的下降，同时还能够增加远期致残率和病死率[2]。现阶段缺乏对于结核性胸膜炎患者病情评估的可靠性指标，血清学相关细胞因子的检测，能够为结核病患者的病情评估提供参考。干扰素（INF－γ）的表达上升，能够诱导患者T淋巴细胞的免疫功能紊乱，抑制T淋巴细胞对于结核杆菌的吞噬能力，导致结核病灶组织肉芽肿的形成[3，4]；腺苷脱氨酶（ADA）主要存在于T淋巴细胞内，在T淋巴细胞持续性增殖的过程中，ADA可显著的释放，进而促进外周血中ADA的表达浓度的上升；干扰素释放相关因子（IGRA）能够评估患者体内炎症性因子的激活程度，进而参与到肉芽肿的形成和结核病灶的病理性进展过程中[5]。为了揭示INF－γ、ADA和TB－IGRA的表达与结核性胸膜炎患者的病情关系，从而为临床上结核性胸膜炎患者的病情评估提供参考，本次研究选取2016年5月－2017年8月在我院接受治疗的结核性胸膜炎患者为研究对象，探讨了INF－γ、ADA和TB－IGRA及不同白细胞介素在结核性胸膜炎患者中的表达情况，报告如下。

1 对象与方法

1.1 研究对象 选取2016年5月－2017年8月在我院接受治疗的结核性胸膜炎患者为研究对象。纳入标准：⑴成年者；⑵诊断为结核性胸膜炎者；⑶无其他呼吸系统疾病者；排除标准：⑴临床资料不全者；⑵近期有感染性疾病者。根据纳入排除标准共纳入病例数80例，男42例，女38例，年龄32～65 岁，平均 49.68±2.16 岁，其中合并胸腔积液组35例，未合并胸腔积液组45例。对照组纳入排除标准：成年者，无呼吸系统同疾病者，共纳入50例，男 30 例，女 20 例，年龄 30～67 岁，平均 49.65±3.01岁。本项研究经医院伦理委员会评审通过，且所有患者均知情同意。

1.2 检测方法 采集患者的静脉血3ml，加入IL－2、IL－4 和 IL－6 单抗，标本和标准品中的 IL－2、IL－4和IL－6会与单抗结合，PBS液体洗涤5min。按照1：500的比例加入羊标志的一抗5ml，4℃放置过夜，PBS缓冲液洗涤3次，每次5min，加入鼠来源的二抗（1：1000）2ml，室温放置 2h，PBS 液体洗涤5min。加入显色底物，辣根过氧化物酶会使无色的显色剂显蓝色，加终止液变黄。在450nm处测OD值。

采集入院后静脉血，1000r/min离心5min，离心半径10cm，离心后收集上清液，采用电化学发光法检测INF-γ、ADA和TB-IGRA水平，加入检测试剂，配套试剂盒购自南京博奥生物检测公司，微型离心机HITETIC购自上海精密仪器有限公司。

1.3 评价指标 观察各组血清中INF-γ、ADA和TB-IGRA水平，比较各组患者炎症因子、肺功能指标的差异，分析结核性胸膜炎患者中INF-γ、ADA和TB-IGRA水平与炎症因子、肺功能的相关性。

1.4 统计学处理 数据录入后，采用SPSS 11.5软件进行分析。计数和计量资料分别采用例和均数±标准差表示。各组血清中INF-γ、ADA和TB-IGRA水平、炎症因子、肺功能指标的比较采用方差分析进行处理，采用Pearson相关分析法分析结核性胸膜炎患者中INF-γ、ADA和TB-IGRA水平与炎症因子、肺功能的相关性。P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 各组血清INF-γ、ADA和TB-IGRA水平的比较 结核性胸膜炎患者的血清INF-γ、ADA和TBIGRA水平均高于对照组，且合并胸腔积液组患者的血清INF-γ、ADA和TB-IGRA水平高于未合并胸腔积液组。见表1。

表1 各组血清INF-γ、ADA和TB-IGRA水平的比较

2.2 各组血清炎症因子水平的比较 结核性胸膜炎患者的血清IL-2、IL-4和IL-6水平均高于对照组，且合并胸腔积液组患者的血清IL-2、IL-4和IL-6水平高于未合并胸腔积液组。见表2。

表2 各组血清炎症因子水平的比较

2.3 各组肺功能指标的比较 结核性胸膜炎患者的FVC、FEV1和FEV1/FVC水平均低于对照组，且合并胸腔积液组患者的FVC、FEV1和FEV1/FVC水平低于未合并胸腔积液组。见表3。

表3 各组肺功能指标的比较

2.4 结核性胸膜炎患者中INF-γ、ADA和TB-IGRA与炎症因子、肺功能的相关性 结核性胸膜炎患者中INF-γ、ADA和TB-IGRA水平与IL-2、IL-4和IL-6水平正相关，与 FVC、FEV1和 FEV1/FVC水平负相关。见表4。

3 讨论

自身免疫力的下降或者结核杆菌的细菌感染载量的增加，均能够促进结核性胸膜炎的发生，特别是在合并有T淋巴细胞功能紊乱的患者中，结核性胸膜炎的发生率可进一步的上升[6]。结核性胸膜炎的发生，不仅能够导致患者胸部临床症状的出现，同时还能够限制肺通气和肺换气过程，导致肺功能的限制下降[7]。临床上对于结核性胸膜炎的病情评估具有重要的意义，其能够指导结核性胸膜炎患者的治疗预后的评估。胸部CT检查虽然能够在结核性胸膜炎患者的病情评估过程中发挥作用，但一项囊括了209例样本量的病情评估分析研究可见，依靠CT检查评估结核性胸膜炎的灵敏度不足45%，其评估患者病情严重程度的一致性率不足40%[8]。而本次研究对于血清中细胞因子的研究，能够为临床上结核性胸膜炎患者的病情评估提供参考。

表4 结核性胸膜炎患者中INF-γ、ADA和TB-IGRA水平与炎症因子、肺功能的相关性

INF-γ是炎症性相关因子，其能够诱导下游肿瘤坏死因子的激活，进而促进结核患者病灶组织的破坏和肉芽组织的机化，导致结核组织空洞的形成；ADA是反应体内T淋巴细胞增殖分化程度的指标，在结核杆菌感染和致病的过程中，T淋巴细胞的激活，能够显著促进ADA的释放[9]；IGRA是干扰素激活程度的指标，在局部结核病灶破坏的过程中，炎症反应的激活能够显著促进IGRA的上升[10]；IL-2是th1淋巴细胞分泌的效应因子，IL-4和IL-6是th2淋巴细胞分泌的效应因子，IL-2、IL-4和IL-6的表达紊乱能够影响到th1/th2淋巴细胞的平衡，进而促进体内炎症性瀑布反应的发生，加剧结核病灶的进展速度[11]。

本次研究中可以发现，在结核性胸膜炎患者中，INF-γ、ADA和IGRA的表达均明显上升，高于非结核组，差异较为明显，同时在合并有明显的胸腔积液的患者中，INF-γ、ADA和IGRA的表达浓度可进一步的上升，提示了相关血清学细胞因子能够显著参与到结核性胸膜炎症的病情进展过程。通过汇集不同的类似文献，这主要考虑与INF-γ、ADA 和 IGRA 的下列作用机理特征有关[12，13]：⑴INF-γ的上升能够导致体内抗原提呈细胞功能的异常，加剧T淋巴细胞的功能抑制，导致结核杆菌病原体清除能力的下降；⑵结核杆菌感染的过程中，由于T淋巴细胞的分化和增殖，ADA可显著的释放；⑶IGRA是评估结核患者体内炎症性因子的指标，由于局部结核脂多糖对于炎症反应的诱导，IGRA可明显上升。熊子波等[14]研究者也认为，在结核性胸膜炎症患者中，INF-γ的表达浓度可平均上升35%以上，特别是在合并有明显的肺外播散病灶的患者中，INF-γ的表达上升更为明显。在合并有胸腔积液的患者中，相关指标的表达上升更为明显，这主要由于合并有胸腔积液的患者，其结核病情的严重程度较高，炎症反应的激活更为明显，进而可以促进INF-γ、ADA和IGRA的上升。IL-2、IL-4和IL-6是评估th1/th2淋巴细胞功能的指标，在结核性胸膜炎症患者中明显上升，同时在合并有胸腔积液的患者中，IL-2、IL-4和IL-6的表达浓度可进一步的上升，这主要由于合并有胸腔积液的患者，其T淋巴细胞的紊乱更为明显，th1/th2平衡的移动更为明显，进而影响到了IL-2、IL-4和IL-6的合成和释放速度[15]。结合性胸膜炎症患者的肺功能明显的恶化，这主要由于胸腔积液的发生，能够限制肺扩张过程，导致肺通气的障碍，影响到了肺功能。相关关系分析也可见，INF-γ、ADA和IGRA水平与IL-2、IL-4和IL-6水平正相关，同时与肺功能指标也密切相关，进一步提示了INF-γ、ADA和IGRA的表达与结核性胸膜炎症患者的病情关系。

综上所述，在结核性胸膜炎症患者中，INF-γ、ADA和IGRA的表达明显上升，同时INF-γ、ADA和IGRA的表达与IL-2、IL-4和IL-6及肺功能指标密切相关。