不同病情程度妊娠期高血压疾病患者血清APN、胎盘MMP-9水平变化及临床意义探讨

张永梅，王睿

(1.郑州市妇幼保健院门诊内科；2.郑州市妇幼保健院检验科，河南 郑州 450000)

妊娠期高血压疾病（Pregnancy-induced hypertension syndrome，PIH）属产科严重并发症之一，易导致不良妊娠结局，但其发病机制及病因尚未完全清楚，临床需及早发现，以对症治疗，控制病情进展。脂联素（APN）是近年发现的由脂肪组织分泌的一种蛋白质激素，临床研究发现，其血清中水平变化与糖尿病、肥胖、脂代谢紊乱及高血压等关系密切[1]。基质金属蛋白酶-9（MMP-9）是由内皮细胞、滋养细胞等分泌的Zn2+依赖肽链内切酶，是引起滋养细胞侵袭的主要物质之一，相关研究指出，随妊娠期高血压病情进展，绒毛上皮组织MMP-9表达迅速降低，其侵蚀能力显著下降[2，3]。本研究选取我院PIH患者174例作研究对象，旨在探讨不同病情程度间血清APN水平及胎盘MMP-9阳性表达率变化及临床意义。现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2014年3月-2018年2月我院PIH患者174例作研究对象，根据病情程度不同分单纯妊娠期高血压组（n=60）、轻度子痫前期组（n=56）、重度子痫前期组（n=58），另选同期健康体检者57例作对照组。3组年龄、体质量指数、孕周、孕次、产次、居住地等基础资料对比无显著差异（P＞0.05），见表 1。

1.2 纳入及排除标准 ⑴纳入标准：均符合PIH诊断标准[4]；均为单胎；均知情本研究并签署同意书。⑵排除标准：伴有高血压、癫痫、糖尿病史者；伴有精神异常者；合并血液系统疾病者；临床资料缺失者等。

1.3 方法

1.3.1 血清APN检测方法 入院后均于次日晨抽取空腹肘静脉血 5ml，离心 10min（3000r/min），取上层血清置入-70℃冰箱待测。酶联免疫吸附试验（ELASA）检测APN水平。所用试剂及试剂盒均由南京轩凯生物科技有限公司提供，操作严格按照试剂盒说明书进行。

1.3.2 胎盘MMP-9阳性表达率检测 a、胎盘组织取材、制备，于胎盘娩出30min后取母面中央1cm×1cm×1cm左右组织块，注意避开坏死、钙化区，以生理盐水漂洗后用福尔马林溶液（10%）固定＞24h，常规石蜡包埋，4μm连续切片。b、主要试剂，试剂一抗、试剂盒 （南京轩凯生物科技有限公司，SP9000）、磷酸氢二钾、磷酸氢二钠、氯化钾、氯化钠等。化学试剂均由万华化学集团股份有限公司提供，均为分析纯。c、免疫组化测定，均由相同检验科医师严格按照说明书进行。以已知阳性标本作阳性对照，以BSA（1%）替代一抗作阴性对照。以细胞出现棕黄色沉着颗粒视MMP-9阳性反应；以免疫组织化学法（SP）测定胎盘组织MMP-9阳性表达率。与背景一致计0；胞浆内或胞核内见少量淡黄色颗粒，显著高于背景计1；胞浆内或胞核内见稍多深棕色颗粒计2；胞浆内或胞核内见大量褐色或深棕色颗粒计3。阳性细胞百分比，无阳性细胞计 0；＜25%计 1；25%～50%计 2；＞50%计 3。 取上述两项乘积：0～1 为（-）；2～3 为（+）；4～5 为（++）；＞5为（+++）。

表1 基础资料

1.4 观察指标 ⑴分析不同分组间血清APN水平及胎盘MMP-9阳性表达率。⑵分析血清APN水平及胎盘MMP-9阳性表达率与PIH病情程度相关性。

1.5 统计学处理 通过SPSS 21.0处理数据，以n（%）表示计数资料（胎盘MMP-9阳性表达率），行χ2检验，以（x±s）表示计量资料（血清 APN 水平），行t检验，组间比较用独立样本t检验，多组间比较用单因素方差分析，两两比较采用LSD-t检验，采用Spearman分析法进行相关性分析，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 PIH患者与健康者血清APN水平及胎盘MMP-9阳性表达率 PIH患者血清APN水平及胎盘MMP-9阳性表达率低于健康对照组（P＜0.05），见表2。

表2 PIH患者与健康者血清APN水平及胎盘MMP-9阳性表达率

2.2 不同病情程度血清APN水平及胎盘MMP-9阳性表达率 经单因素方差分析，不同病情程度间血清APN水平及胎盘MMP-9阳性表达率对比，差异有统计学意义（P＜0.05）；两两比较，轻度子痫前期组血清APN水平及胎盘MMP-9阳性表达率低于单纯妊娠期高血压组，重度子痫前期组低于轻度子痫前期组（P＜0.05），见表 3。

表3 3组血清APN水平及胎盘MMP-9表达率对比

2.3 血清APN水平及胎盘MMP-9阳性表达率与PIH病情程度相关性分析 经Spearman分析，血清APN水平及胎盘MMP-9阳性表达率与PIH病情程度呈负相关 （r1=-0.714，P1=0.013；r2=-0.614，P2=0.021）。

3 讨论

PIH多发于孕20周后，据临床统计，我国发病率约10%[5]。其临床表现蛋白尿、血压升高、水肿等，严重者会出现抽搐、昏迷，累及多器官损伤，终止妊娠可迅速缓解病情。该疾病主要病理变化是全身小动脉痉挛，且血管内皮细胞功能缺失、损伤为PIH发病中心环节。

APN是由脂肪细胞分泌的一种含244个氨基酸内源性激素多肽，高分子复合体是其主要活性形式。该物质于机体糖代谢、脂肪酸氧化、稳定血管内皮功能中起重要调节作用，据动物实验证实，给予高血压大鼠外源性APN可降低其血压水平[6]。另外，学者张艳等[7]研究指出，高血压患者血清APN呈低水平状态，认为交感神经过度兴奋抑制了APN表达。本研究通过检测174例PIH患者血清APN水平发现，其低于健康对照组，且经单因素方差分析，不同病情程度间血清APN水平对比，差异有统计学意义（P＜0.05）；两两比较，轻度子痫前期组血清APN水平低于单纯妊娠期高血压组，重度子痫前期组低于轻度子痫前期组（P＜0.05），表明随PIH病情程度加重，血清APN水平呈降低趋势，尤其是重度子痫前期组降低更为显著。临床研究指出，于胚胎植入中，滋养细胞沿子宫螺旋小动脉浸润子宫内膜、肌层尤为关键，若侵蚀螺旋动脉不足、植入过浅会影响胎盘血管重塑过程，致使胎盘缺氧缺血，引起各种细胞因子入血损伤血管内皮，诱发蛋白尿、水肿等多种PIH临床症状[8，9]。MMP-9主要作用于Ⅰ及Ⅴ型明胶、Ⅳ及Ⅴ型胶原，能降解细胞外基质，参与调解月经周期、创伤修复、胎盘形成、胎膜破裂等过程[10]。临床研究证实，MMP-9的表达会直接影响滋养细胞浸润能力，其降解蛋白多糖、胶原蛋白等细胞外基质，能促进滋养细胞侵袭[11，12]。本研究发现，PIH患者胎盘MMP-9阳性表达率低于健康对照组（P＜0.05），且对不同病情程度患者进行对比发现，轻度子痫前期组胎盘MMP-9阳性表达率低于单纯妊娠期高血压组，重度子痫前期组低于轻度子痫前期组（P＜0.05），表明胎盘MMP-9表达不足是导致滋养细胞侵袭能力低，影响胎盘着床的主要因素之一。另外，本研究经Spearman分析得知，血清APN水平及胎盘MMP-9阳性表达率与PIH病情程度呈负相关（P＜0.05），表明血清APN水平及胎盘MMP-9阳性表达率与PIH患者病情程度密切相关，及时了解其水平变化可有效防治PIH。

综上可知，血清APN水平及胎盘MMP-9阳性表达率与PIH患者病情程度密切相关，为临床探讨其发病机制提供了新途径。