化学发光免疫分析法检测乙型肝炎病毒感染性标志物的应用

张 璐

（本溪钢铁（集团）歪头山医院检验科，辽宁 本溪 117006）

乙型肝炎病毒（HBV）有着比较高的感染率，一旦感染，就有可能发生肝炎、肝硬化甚至是肝癌等临床表现，对患者的身心健康及生命安全造成严重危害。因此，为有效防治乙型肝炎，就需要积极做好HBV的检测工作[1]。临床以往在诊断乙型肝炎感染时，主要采取ELISA法来检测患者体内的HBV血清标志物，但是无法实现定量分析，也不能对患者感染HBV的复制情况做出准确判断[2]。基于此，本文以我院320例疑似乙型肝炎患者为例，就CLIA 法在HBV感染性标志物检测中的应用效果展开探讨。报道如下。

表1 两种方法HBV感染性标志的阳性检出率对比[n（%）]

1 资料与方法

1.1 一般资料：选取我院收治的320例疑似乙型肝炎患者为研究对象，入选时间为2015年8月至2017年9月。其中男女分别有208例与112例；年龄为18~67岁，平均（42.5±2.7）岁。所有患者均检测，均符合《病毒性肝炎防治方案》中的相关诊断标准。

1.2 方法：①仪器及试剂：CLIA法中使用的仪器为郑州安图生物LUMO化学发光仪，检测试剂同样由安图绿科生物工程有限公司提供；ELISA法中使用的仪器是由深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司提供的型号为MR-96A的酶标仪，试剂由上海科华生物工程股份有限公司提供。严格按说明书开展相关操作。②检测方法：早晨空腹状态下抽取患者10 mL的静脉下，以3000 r/min的速率离心15 min，随后将血清析出。将血清样本分成两份，分别应用CLIA法与ELISA法对血清中的HBV感染性标志物（包括HBsAg、HBeAb、HBeAg、HBsAb及HBcAb等）进行检测。

1.3 判定标准：测定值达到或高于参考值上线，则为阳性。其中，HBsAg的参考值上限为0.2 ng/mL，HBeAb为2.0 NCU/mL，HBeAg为0.05 NCU/mL，HBsAb为10.0 mIU/mL，HBcAb为1.5 NCU/mL。在灵敏度试验中，采取卫生部临检中心提供的定值参比血清，即1.0 ng/mL的HBsAg。

1.4 统计学处理：采用SPSS21.0统计学软件分析数据，计数资料用百分比（%）、计量资料采用均数±标准差（±s）表示，分别用χ2与t进行检验，P＜0.05表示差异具有统计学意义。

2 结 果

2.1 HBV感染性标志物两种方法的检测结果：应用CLIA法检测时，血清HBsAg、HBeAb及HBeAg的阳性检出率相比于ELISA法明显升高（P＜0.05），见表1。

2.2 两种方法对低水平HBsAg的检测结果及灵敏度：实验显示，当HBsAg低水平的检测值不足1.0 IU/mL时，CLIA法的阳性检出率显著高于ELISA法（P＜0.05）。采取定值参比血清，并用阴性血清展开倍比稀释，同时应用两种方法进行灵敏度检测，结果发现CLIA法与ELISA法检出的最低浓度分别为0.031 IU/mL与0.128 IU/mL。

3 讨 论

现阶段，临床主要通过对HBV感染性标志物进行检测，从而达到诊治乙型肝炎的目的。以往主要采取ELISA法来对乙型肝炎患者进行诊断，此种方法有着较高的准确率，且操作简便，但无法展开定量分析，检测结果也有可能出现不稳定的情况。而作为一种新型的分析技术，CLIA法的灵敏度较高，其主要通过发光底物自身所具备的发光强度来进行检测，具有准确率高、线性宽、操作简便等优势，可有效弥补ELISA法的不足之处[3]。

本实验结果显示，CLIA法对HBsAg、HBeAb及HBeAg的阳性检出率相比于ELISA法明显升高（P＜0.05），这是因为CLIA法采用的是体积小但表面积大的固相载体来作为顺磁性微粒，有着更大的反应面积。此外，标志物可进行循环利用，因而将发光时间有效延长，增加了强度，将HBV的感染进程准确显示出来，实现了阳性检出率及检测灵敏度的提高。

此外，CLIA法对低水平HBsAg的检测敏感性显著高于ELISA法（P＜0.05），且CLIA法与ELISA法检出的最低浓度分别为0.031 IU/mL与0.128 IU/mL。这一结果表明对乙型肝炎患者展开CLIA检测时，可将其血清中的HBsAg快速检测出来，充分防止低水平HBsAg样本漏检以及假阴性等情况的发生。综上所述，相比于ELISA法，CLIA法对HBV感染性标志物的检测准确率更高，可作为诊断乙型肝炎的一项重要检测方法，并动态监测患者的病情，具有重要的临床应用价值。