不同检测方法在EDTA依赖性假性血小板减少症中的应用效果比较

刘咏菊1 陈炜玺2

（1武警山西总队医院检验科，山西 太原 030006；2太原市中心医院检验科，山西 太原 030006）

血常规检查是临床疾病诊断及疗效评估的一项常见辅助手段，可让医师了解到患者血清中血细胞状态、血细胞数量以及血小板计数等情况。其中，血小板计数检测结果是临床诊断止血性、血栓性疾病的主要依据。因此，准确检测血小板计数具有重要的意义。然而，在实际工作中我们可以发现，乙二胺四乙酸（EDTA）可使血液中血小板发生凝集，导致假性血小板减少现象，引起疾病误诊误治[1]。为避免患者进行不必要的检查，寻找一种有效、准确的检测方法以对EDTA依赖性血小板减少症进行排查十分有必要。为此，本研究将对比手工草酸铵法、全血细胞分析法、仪器间接稀释法在EDTA-PTCP检测中的应用效果，报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料：收集2016年3月至2018年3月到我院就诊的37例EDTAPTCP患者的全血样本作为实验对象，其中有17例女性、20例男性，年龄19～52岁，平均年龄（43.82±5.39）岁。上述患者在血常规检查中可见其血小板计数显著减少，但血红蛋白、白细胞计数以及肝肾功能、凝血功能检查结果均正常，无出血倾向，最后经外周血涂片检查证实为EDTA-PTCP。

1.2 方法

1.2.1 试剂和仪器：日本希森美康（sysmex XT-1800i）全自动血液分析仪及其配套试剂、质控品；1%草酸铵稀释液（为我科检测人员依据《全国临床检验操作规程》中的步骤自行配制）；采血管为EDTA-K2抗凝试管（美国BD公司）；日本奥林巴斯双目显微镜。

1.2.2 检测方法：①手工草酸铵法：抽取37例患者的肘静脉血2 mL。在不同时间点5、10、20、30、60、120 min取适量血样本将其置于0.38 mL的1%草酸铵稀释液（不含EDTA）中，待其充分混匀后，放置在计数池内，静置10～15 min，待血小板完全下沉后，在1 h内用显微镜进行血小板计数。②全血细胞分析法：抽取37例患者的肘静脉血2 mL，置于含有乙二胺四乙酸二钾（EDTA-K2）的抗凝试管中并摇匀，在采集的2 h内用sysmex-1000i全自动血液分析仪测定采集后5、10、20、30、60、120 min不同时间点的血小板计数水平。③仪器间接稀释法：抽取患者的肘静脉血2 mL于含有EDTA-K2的抗凝试管中，并在采集后不同时间点（5、10、20、30、60、120 min）吸取20 μL血样本，并将其加入到血细胞分析仪稀释液中，混匀，最后用sysmex-1000i全自动血液分析仪测定血小板计数水平。观察上述3中检测方法不同时间点（5、10、20、30、60、120 min）测定血小板计数的差异。

1.3 统计学方法：选用SPSS24.0软件，计数数据以率（%）形式表示，用χ2检验；计量数据以（±s）表示，两组组间比较用独立样本t检验，多组样本比较则使用方差分析。P＜0.05，表示差异具统计学意义。

2 结 果

采集5 min内，手工草酸铵法检测未完成，无血小板计数结果，而全血细胞分析法和仪器间接稀释法检测的血小板计数结果比较，差异无统计学意义（P＞0.05）；但在采集后10、20、30、60、120 min进行检测发现，全血细胞分析法检测的血小板计数结果明显少于采集5 min，且与手工草酸铵法、仪器间接稀释法有显著性差异（P＜0.05）；手工草酸铵法与仪器间接稀释法的血小板计数结果比较差异不明显（P＞0.05），见表1。

表1 三种检测方法复检血小板的结果比较（±s，×109/L）

表1 三种检测方法复检血小板的结果比较（±s，×109/L）

注：与全血细胞分析法比较，*P＜0.05

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3 讨 论

EDTA-PTCP主要是发生在体外且因使用EDTA抗凝剂而引起的血小板假性减少的现象，其本身不具有病理性意义，但也有可能见于某些严重性病症中，如免疫系统疾病、癌症等。相关数据显示[2]，在我国EDTA-PTCP的发生率占0.08%～0.25%，而且随着EDTA抗凝剂的应用越来越广泛，其发生率呈逐年上升的趋势。因此临床对于EDTAPTCP的诊治必须加以重视。目前临床对于初步怀疑EDTA-PTCP的患者，均需重新检测。本研究为提高EDTA-PTCP检测的准确性，探析手工草酸铵法、全血细胞分析法、仪器间接稀释法的检测效果，结果显示，采集5 min内，手工草酸铵法难以完成检查，而全血细胞分析法和仪器间接稀释法检测血小板计数结果差异不明显（P＞0.05），但在采集后10、20、30、60、120 min全血细胞分析法检测的血小板计数结果明显少于手工草酸铵法、仪器间接稀释法（P＜0.05），且手工草酸铵法与仪器间接稀释法的检测结果的差异不显著，与查有艳[3]的研究报道基本相符，提示三种检测方法中，在采血后5min内应用仪器间接稀释法复查EDTA-PTCP的准确性较高。综上所述，手工草酸铵法、仪器间接稀释法检测EDTA-PTCP效果相当，均优于全血细胞分析法，但仪器间接稀释法操作简单，能够有效缩短检测时间，降低实验室成本，可将其作为本病检测的常用手段之一。