HPLC法测定油类香精（桂子油）桂皮醛的含量

张伟　陈雪梅　冯彦勇　杨玉娟　肖伟　匡凤军　匡凤姣 刘钰 徐凯

摘 要：目的：建立HPLC法测定油类香精（桂子油）中桂皮醛的含量的方法。方法：采用HPLC法，乙腈-水（45∶55）为流动相，C18色谱柱（4.6 mm×250 mm，5 μm）;流速：1 mL/min;检测波长：290 nm。结果：桂皮醛在49.81～2490.50μg/mL范围内呈良好的线性关系（r=0.999656），平均回收率为99.27%，RSD=0.44%（n=9）。结论：该方法简便、准确、重复性好，可用于油类质量控制，填补了油类香精桂皮醛的含量测定方法的空白。

关键词：HPLC;桂子油;桂皮醛;含量测定

桂子油香精由植物油和食品用香精组成，具有桂子香气，是大众喜欢的味道。现在在食品生产领域具有非常广泛的运用。目前国家、行业或地方检验标准中没有油类香精桂皮醛的含量测定方法，文献中也没有收录其标准检测方法及检测限，且食品用香精提取用原料[1]、提取的工艺和香精厂添加量存在一定的差异，这样就导致桂子油中桂皮醛的含量差别较大。因此为了更好的控制食品的口感，控制桂子油香精中桂皮醛的含量是十分重要的，该方法填补了油类香精桂皮醛的含量测定方法的空白。

1 仪器与试剂

仪器：岛津20A高效液相色谱仪;紫外检测器;岛津色谱柱Wondasil C18-WR（4.6 mm×250 mm，5 μm）、Thermo色谱柱ODS-2 HYPERSIL（4.6 mm×250 mm，5 μm）、Waters

色谱柱SPHERISORB 5um ODS1。试剂：甲醇为色谱纯（默克公司），乙腈为色谱纯（默克公司），其余溶剂为分析纯。

对照品：桂皮醛对照品，由中国食品药品检定研究院提供（含量测定用，批号110710-201821，含量以99.6%计）。

样品分别由长沙曼尼食品科技有限公司、广州市凯虹香料有限公司、长沙大河香业有限公司提供。

2 方法与结果

2.1 标准溶液的制备

精密称定桂皮醛标准品适量，置棕色量瓶中，加甲醇制成50μg/mL的溶液。

2.2 供试溶液的制备

称取样品100mg，精密称定，置50mL棕色容量瓶[3]中，加入甲醇25mL，置超声波中，超声处理（功率250 W，频率33 kHz，）10 min，放冷，用甲醇定容到刻度，摇匀，作为供试溶液。标准溶液进样量10 μL，供试溶液进样量10 μL，进行测定。

2.3 色谱条件与系统适用性试验

色谱柱：Thermo色谱柱ODS-2 HYP

ERSIL（4.6 mm×250 mm，5 μm）。

2.4 波长选择

参考中国药典（一部）2015版肉桂的含量测定[2]，故选择290nm为检测波长。

柱温：室温;流速：1.0 mL/min。

流动相：乙腈-水（45∶55）。

方法學考察测定样品选用长沙曼尼食品科技有限公司的产品（20180906批）。

2.5 提取时间的考察

供试品制备采用超声处理方法，分别采用超声提取[3]10、20、30 min进行考察，结果表明超声提取10 min时已提取完全，且节能省时（见表1）。

表1 提取时间考察数据一览表

提取时间（min） 10 20 30

含量（μg/mg） 371.2 373.1 372.4

2.6 专属性实验

取植物油（非转基因），按本品制法及供试品溶液的制备方法制成阴性对照溶液，按照上述方法进行测定，结果阴性样品无干扰，方法可行

（见图1）。

2.7 精密度考察

吸取桂皮醛标准溶液（249.05μg/mL），重复进样6次，测定结果见表2。结果表明该方法精密度良好。

2.8 线性范围的考察

分别精密吸取桂皮醛对照品溶液（49.81μg/mL），进样量分别为1、5、10、15、20μL及50μL，测定其峰面积，以峰面积为纵坐标，桂皮醛浓度为横坐标绘制标准曲线，测得回归方程为：Y=0.000114146X+5.44921，r=0.999656，结果见表3。结果表明在49.81～2490.50μg/mL范围内，桂皮醛的吸收峰面积与桂皮醛浓度有良好的线性关系。

2.9 稳定性实验

称取同一批次的桂子油（批号：20180906）的供试溶液，每间隔一定时间进样一次，桂皮醛含量测定结果见表4。结果表明供试溶液在24h内基本稳定。

2.10 重复性试验

取同批样品桂子油（批号20180

906，长沙曼尼食品科技有限公司），依法平行测定6份，分别计算桂皮醛的含量，结果见表5。结果表明该方法的重复性良好。

2.11 准确度试验

取桂子油（批号20180906，长沙曼尼食品科技有限公司）样品约100mg，精密称定，分别精密加入标准品适量，按上述方法制备、测定供试品溶液，结果见表6。结果表明该方法回收率高、准确度好。

2.12 耐用性实验

分别更换不同试剂。改用默克公司的乙腈、迪马科技公司的乙腈进行实验;不同色谱柱：Thermo 色谱柱ODS-2 HYPERSIL（4.6 mm×250 mm，5 μm）、岛津色谱柱Wondas-ilC18-WR（4.6 mm×250 mm，5 μm）、Waters色谱柱SPHERISORB 5um ODS1。都达到了分离度大于2的分离效果。

2.13 样品测定

按本文中的含量测定方法，分别对9批样品进行测定[4]，结果见表7。测定结果表明，不同生产企业以及同企业不同批次间产品间的桂皮醛含量差异较大，可能与原料质量、提取工艺、厂家生产工艺以及贮藏条件等因素有关，故很有必要控制其质量，以保证食品的口感稳定。

3 讨论

目前国家、行业或地方的检验标准中没有油类香精桂皮醛的含量测定方法，文献中也没有收录其标准检测方法，在检测过程中发现，同一厂家和每个厂家的桂子油香精中桂皮醛的含量差别较大，所以开发测定桂子油香精中的桂皮醛的含量测定方法具有重要意义。该方法填补了油类香精桂皮醛的含量测定方法的空白，且、简便、快捷，具有准确度高、精密度好、重现性好等特点，且分离度良好，阴性无干扰，通过此检测方法能客观地控制和评价桂子油香精中桂皮醛的含量，也能准确检测出食品中的桂皮醛添加量。因桂皮醛遇光不稳定，因此实验操作应尽可能避光，确保测定过程不受环境因素的影响。

参考文献

[1]罗晋萍，张中苏，田晨，等.高效液相色谱法测定桂枝中桂皮醛的含量[J].中国中药杂志，2000，25（9）：544.

[2]国家药典委员会.中华人民共和国药典（一部）2015版[M].北京：中国医药科技出版社，2015.

[3]罗晋萍，冯贞，田晨.HPLC法测定桂龙咳喘宁片中桂皮醛的含量[J].中药杂志，2018，19（3）：30-35.

[4]马蓉蓉，唐意红，孙兆林，等.RP-HPLC测定不同产地肉桂中桂皮醛和肉桂酸的含量[J].中国现代中药，2008，10（4）：9.