T淋巴细胞亚群、VEGF、MMP-14检测对肝癌射频消融术后残癌临床评估的价值

霍传红 陈静 高玉莲

摘要：目的探讨T淋巴细胞亚群、VEGF、MMP-14检测对肝癌射频消融术后残癌临床评估的价值。方法选取2017年11月-2018年11月我院收治的100例肝癌患者，随机分为两组，对照组为肝硬变患者，研究组为原发性肝癌患者。比较两组患者的VEGF指标、MMP-14指标和T淋巴细胞亚群因子指标。结果治疗后，研究组VEGF指标好于对照组（P<0.05），治疗后，研究组MMP-14指标好于对照组（P<0.05），治疗后，研究组T淋巴细胞亚群因子指标好于对照组（P<0.05）。结论对肝癌患者进行射频消融术治疗，效果显著，能够有效改善患者T淋巴细胞亚群、VEGF、MMP-14等相关指标，安全性高，改善患者临床症状，提高患者生活质量。

关键词：T淋巴细胞亚群;VEGF;MMP-14;肝癌射频消融术后残癌;评估价值

肝癌是临床上常见的一种病症，对患者的生活造成了极大的影响。随着医学水平的不断提升，对该病的治疗方法越来越多，当前，临床上主要采用射频消融术进行治疗^[1]。射频消融术能够有效的改善患者的临床症状，降低患者病痛，但是，该治疗方法也存在一定的弊端，主要表现在病灶的残留方面。临床数据表明，残癌的发生率较高，患者局部残癌的发生率高达30-40%^[2]。肝癌具有危害性大和复发率高等特点，其中残癌是肝癌复发率高的主要原因。所以，应对治疗过程中残癌发生引起足够的重视，本着早发现早治疗的原则，为患者提供有效的治疗，改善患者病情，保证患者预后^[3]。本研究通过对患者治疗前后T淋巴细胞亚群、VEGF、MMP-14等指标的变化，对患者治疗过程中残留癌进行有效的临床分析，效果显著，报道如下。

1资料与方法

1.1一般資料

选取选取2017年11月-2018年11月我院收治的100例肝癌患者。纳入标准^[4]：①患者治疗前没有进行肝癌相关治疗;②通过相关的检查，确诊为肝癌;③2cm<单个癌灶<5cm，或多个癌灶<3个，癌灶<5cm;④患者及家属了解这次研究的相关内容，并签署知情同意书。排除标准^[5]：①不愿参与研究这次研究或临床数据不完善的患者;②伴有心绞痛或急性心肌梗死的患者;③对研究的药物有过敏史的患者。将患者随机分为两组，研究组（n=60），男37例，女23例，年龄38-75岁，平均年龄（55.8士4.6）岁，住院时间16-29d，平均住院时间（17.2±5.1）d;对照组（n=40），男28例，女12例，年龄36-74岁，平均年龄（53.2士3.4）岁，住院时间15-28d，平均住院时间（16.3±4.4）d。本研究已经得到患者同意，资料具有可比性（P>0.05），经过医院伦理委员会批准。

1.2方法

1.2.1T细胞亚群的检测，方法如下：首先，使用不同荧光物质对抗CD3、CD4、CD8抗体进行有效标记，标记完成后，使其与待测成分进行充分作用，然后使用流式细胞仪对细胞进行相关检测^[6]。等待检测的细胞会随着流动鞘液而呈现单列排列，并快速的通过激光聚焦区域。聚焦完成后，激光会对每个细胞进行照射，照射过程中，能够得到侧向角散射和前向角散射两种不同的散射光，同时能够得到应用荧光标记物质产生的信号。通过该信号，能够有效的计算出CD3⁺、CD4⁺、CD8⁺的数值，进而算得T细胞亚群的比值^[7]。

1.4.2 VEGF的检测，方法如下：使用双抗体两步夹心酶联免疫吸附法对VEGF进行测定，首先将待测样本和标准品放入事先盛有VEGF的抗体酶标包被板中，然后对其进行充分的温育，之后将没有进行结合的成分进行洗涤，洗涤完成后将其放入酶标工作液，再次进行温育，在对没有进行结合的成分进行洗涤^[8]。完成后，将底物A、B依次加入其中，氧化物酶（HRP）会对底物（TMB）进行有效的催化，进而生成蓝色产物，该产物会在酸的作用下呈现黄色，样品中VEGF的浓度会与颜色的深浅呈现正比关系。上述操作完成后，在波长为450nm下，对OD值进行测定，并依据样品和标准品OD值，对样本中VEGF含量进行计算。

1.4.3MMP-14的检测，方法如下：检查，应用ELISA法对受检标本进行测定，并将其与固相载体表面抗体或抗原进行有效反应。然后，使用洗涤的方法将液体中的其他物质与抗原抗体复合物进行有效分开^[9]。然后，将其加入适量的入酶标记抗体或抗原，应用其反应将其在固相载体上进行有效结合。这时，标本中受检物质会与固相上的酶含量呈现正比关系^[10]。然后将酶反应底物加入，这样底物就会被酶进行催化，进而形成有色产物，标本中受检物质量和产物量与具有直接的关系，所以，能够通过颜色的深浅对其进行有效的分析。

1.3观察指标

比较两组VEGF指标，MMP-14指标和T淋巴细胞亚群因子指标，并且数值越接近正常值，说明患者的治疗效果越显著。

1.4统计学方法

应用SPSS18.0对数据进行分析，计量时，进行t检测（`x±s）检验，计数时，进行X²（%）检验，当P<0.05时，说明存在明显区别。

2结果

2.1患者VEGF指标比较

治疗前，两组VEGF指标无差异（P>0.05），治疗后，研究组VEGF指标好于对照组（P<0.05），见表1。

2.2患者MMP-14指标比较

治疗前，两组MMP-14指标无差异（P>0.05），治疗后，研究组MMP-14指标好于对照组（P<0.05），见表2。

2.3T淋巴细胞亚群因子指标比较

治疗前，两组T淋巴细胞亚群因子指标无差异（P>0.05），治疗后，研究组T淋巴细胞亚群因子指标好于对照组（P<0.05），见表3。

3讨论

肝癌是危害性极大的一种恶性肿瘤，随着年龄的不断增长，该病的发病率出现了不断上升的趋势，当前发病人数已经达到全球的50%左右^[11]。过去，主要采取外科手术的方法进行治疗，效果欠佳。随着医学水平的不断进步，当前临床上应用射频消融（RFA）术进行治疗，效果显著。该治疗方法不仅操作简单，而且不对患者进行开腹手术，大大缩短了患者的住院时间，进而降低了家属的经济负担。因此，该治疗方法在临床上得到了广泛的应用。相关报道表明，射频消融术不仅对肿瘤细胞杀灭和毁损方面起到重要作用，同时能够对增强机体的对肿瘤的免疫作用，这就进一步对患者的治疗和预后发挥了重要的作用。T淋巴细胞在肿瘤免疫过程中发挥了重要的作用，依据该细胞因子分泌的不同，分为Th2和Th1两个不同亚群，但是Th2和Th1亚群又存在相互联系，如果Th2和Th1亚群出现平衡问题，就会对机体的免疫功能造成影响^[12]。如果Th2和Th1亚群维持平衡，则机体会保持正常的免疫功能。MMPs（基质金属蛋白酶）在对肿瘤细胞的转移和侵袭方面发挥了重要的作用，MMP-14又是是MMPs家族中一种重要的蛋白酶，不仅能够对肿瘤细胞进行直接降解和破坏，同时能够对患者细胞外基底膜和介质进行破坏，进而阻挡肿瘤细胞浸润作用^[13]。另外，对新血管的形成具有有效的促进作用。MMP-14对血管内皮生长因子（VEGF）调节起到了一定的转录作用，进而对肿瘤血管的形成起到了一定的促进作用。治疗后，研究组MMP-14指标好于对照组（P<0.05），该结果充分表明了，对患者进行射频消融术治疗，能够有效改善患者MMP-14指标，增强了对肿瘤细胞的破坏作用，促进了新细胞的形成。

VEGF对促血管生长因子的形成具有较强的促进作用，在肿瘤浸入、肿瘤细胞、炎症细胞、病变肿瘤组织中，能够分泌较高水平的VEGF^[14]。VEGF对肿瘤血管内皮细胞起到一定的刺激作用，对心血管的增值、迁移和新生血管诱导形成过程起到了一定的促进作用，进而对血管通透性进行有效提升，使得血管周围组织纤维蛋白进行进一步的沉着，对血管基质的形成起到了明显的促进作用，使得肿瘤有效进入新生血管，对细胞的转移起到了有效的促进作用^[15]。研究结果显示，治疗后，研究组VEGF指标好于对照组（P<0.05），该结果充分表明了，对患者进行射频消融术治疗，能够有效改善患者VEGF指标，改善患者病情，对肿瘤细胞的转移起到了有效的促进作用。另外，研究结果显示，研究组T淋巴细胞亚群因子指标好于对照组（P<0.05）。该结果充分表明了，对患者进行射频消融术治疗，能够有效改善患者T淋巴细胞亚群因子指标，降低患者炎性并发症发生率，有利于病情的恢复。

综上所述，对肝癌患者进行射频消融术治疗，效果显著，能够有效改善患者T淋巴细胞亚群、VEGF、MMP-14等相关指标，安全性高，改善患者临床症状，提高患者生活质量。

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