刘亚乔,郭 磊
(大窑湾海关,辽宁 大连 116000)
目前,兽药残留及抗生素耐药性问题已成为影响畜牧业发展的重要障碍,国家对兽药的使用越来越严格,《兽药禁用清单》中对部分抗生素、镇定类、兴奋类药物进行了全面禁止或限制,依据现在国内的兽药使用情况及国际形势,未来兽药发展方向是我国被禁用兽药会不断增多。
中兽药是依据中兽医基础理论、中药理论和临床辨证原则对疾病进行辨证组方治疗,对腹泻病有着较好的临床效果,任杰(2015)等研究发现,复方中兽药对仔猪的生长发育有明显的促进作用,对仔猪的腹泻病具有良好的治疗效果。万长华(2017)等研究发现,中兽药制剂芪贞增免颗粒、四黄止痢颗粒可减少仔猪腹泻病的发病率,并对仔猪腹泻有良好的治疗效果。本研究主要针对仔猪的脾虚泄泻进行组方并治疗,以期望得到一个对脾虚泄泻有良好治疗效果的中兽药处方。
本研究采用具有补肝肾,强筋骨的女贞子、具有敛肺,涩肠,具有温中驱寒、回阳通脉的干姜组成,生津的乌梅及补气升阳、固表止汗的黄芪。按照3 ∶2 ∶2 ∶1 的比例组方。进行中药复方的药理学研究,主要包括脾虚泄泻仔猪(靶动物)的治疗试验,从而观察自拟中药复方的安全性和有效性。
1.1.1 试验动物
50 头健康仔猪25 ~30 日龄,品种为PIC 猪。
1.1.2 试验药物及处理
中药复方由女贞子、黄芪、干姜和乌梅等药材按照一定比例组合而成。先将中药浸泡1 h 后,加水煎煮3 次,每次1 h,混合提取液浓缩至1 mL 药液含原生药1 g。
1.1.3 主要仪器
血细胞分析仪;酶标仪;恒温培养箱;冷冻离心机;水浴锅;电子天平。
1.1.4 主要试剂
免疫球蛋白IgG ELISA 试剂盒,免疫球蛋白IgM ELISA 试剂盒;胃动素、胃泌素检测试剂盒。
1.2.1 试验仔猪的饲养管理
本试验仔猪采用圈养形式,每组1 个圈舍,每个圈舍10 头。试验仔猪饲喂相同的饲料(正大乳猪配合饲料),均自由饮水和采食,仔猪按照猪场免疫程序进行免疫,驱虫。
1.2.2 试验动物的分组及处理
将50 头健康仔猪适应性饲喂3 d 后进行分组,分组按照对等分配原则按照试验动物的体重、性别随机分为空白对照组、模型组、中药复方高、中、低剂量组5 组,每组10 头,除空白对照组外,其余4 组参照文献[1,2]使用利血平复制脾虚泄泻模型(利血平按照0.1 mL/kg 剂量肌肉注射,连续注射3 d),模型建立成功后进行给药,空白组不做任何处理,正常采食和饮水;模型组只造模型不给药,中药复方组造模同时给药,连续灌服给药5 d,每天2 次。具体处理方法见表1。
1.2.3 中药复方对脾虚泄泻仔猪生长性能的影响
试验前和试验结束时对仔猪称重,试验期间每天记录加料量和剩余饲料量,计算日均增重,日均采食量和料重比。日均增重=(试验后每组猪的体重- 试验前每组猪的体重)/ 试验天数。日均采食量=总采食量/ 试验天数;料重比= 平均采食量/ 日均增重。
表1 试验分组及处理
1.2.4 中药复方对脾虚泄泻仔猪治疗效果的影响
试验期间对试验动物进行临床观察,主要观察仔猪的精神状态、被毛状态、运动量,粪便情况、采食和饮水状况,并进行评价。治愈:试验仔猪精神状态、采食、运动量恢复正常,粪便成形,无稀便。有效:上述症状均有好转。无效:症状无明显改善甚至更加严重。
1.2.5 中药复方对脾虚泄泻仔猪血液生理指标的影响
试验结束后, 禁食不禁水12 h,进行前腔静脉采血,置于抗凝管中,使用全自动血液分析仪检测血液生理指标,包括白细胞数、红细胞数、血红蛋白含量。
1.2.6 中药复方对脾虚泄泻仔猪血清免疫球蛋白IgG、IgM 的影响
试验结束后,禁食不禁水12 h,进行前腔静脉采血,置于促凝管中,3 000 r/min 离心,离心10 min,分离血清,用于免疫球蛋白IgG、IgM检测,免疫球蛋白IgG、IgM 严格按照试剂盒说明书进行。
1.2.7 中药复方对脾虚泄泻仔猪十二指肠淀粉酶、脂肪酶的影响
试验结束后, 禁食不禁水12 h,解剖仔猪,取十二指肠内容物,按照重量体积比1 ∶9 加入生理盐水,并进行匀浆,制成10% 的组织匀浆液,用于淀粉酶、脂肪酶检测,淀粉酶、脂肪酶检测方法步骤严格按照试剂盒说明书进行检测。
试验数据均采用EXCEL 进行收集,使用分析统计软件 SPSS 20.0软件进行分析,采用单因素方差分析、多重比较进行分析,结果用 “平均值± 标准差” 表示,P <0.05 为差异显著,P <0.01 为差异极显著。
1.4.1 中药复方对脾虚泄泻仔猪生长性能的影响
由表2 可知:试验前各组试验动物体重无显著性差异;造模后,除空白组外,体重均下降,与空白组相比, 差异显著(P <0.05);试验结束后,药物组体重增高,中药复方高剂量组与空白组相比,差异不显著(P >0.05),与模型组相比差异极显著(P <0.01),中药复方中剂量组与低剂量组相比,差异显著(P <0.05);中药复方组日增重增加,其中中药复方高、中剂量组与空白对照组相比,差异不显著(P >0.05),与模型组相比, 差异极显著(P <0.01)。给药后,中药复方组试验仔猪的日均采食量增加, 与空白组相比,差异不显著(P >0.05),与模型组相比,差异亦不显著(P >0.05);给药后,中药复方组试验仔猪的料重比的降低,但各个试验组之间无显著性差异。
1.4.2 中药复方对脾虚泄泻仔猪治疗效果
造模型后,仔猪精神状态不佳,食欲降低,采食量减少,运动量少,粪便不成形,稀便,被毛不整齐,杂乱无光泽。给药后,试验猪精神状态好转,采食量明显增加,运动量增多,粪便成形。中药复方对脾虚泄泻仔猪治疗效果:高剂量组治愈率达到70%,有效率为90%,中剂量组治愈率达到50%,有效率为80%,其结果详见表3。
1.4.3 中药复方对脾虚泄泻仔猪血液生理指标的影响
由表4 可知,给药后,中药复方高、中剂量组白细胞数增加,与空白组相比,无显著性差异(P >0.05),与模型组相比,差异显著(P <0.05);而红细胞及血红蛋白含量,各个试验组之间无显著性差异(P >0.05)。
1.4.4 中药复方对脾虚泄泻仔猪血清免疫球蛋白IgG、IgM 的影响
由表5 可知,给药后,各个试验组仔猪血清中免疫球蛋白IgG 的含量无显著性差异(P >0.05);而中药复方组仔猪血清中免疫球蛋白IgM 的含量升高,其中中药复方高、中剂量组与空白组相比,无显著性差异(P >0.05),与模型组相比,差异显著(P <0.05)。
表2 中药复方对脾虚泄泻仔猪生长性能的影响
1.4.5 中药复方对脾虚泄泻仔猪十二指肠淀粉酶、脂肪酶的影响
由表6 可知, 给药后, 中药复方组十二指肠组织淀粉酶含量升高,其中高、中剂量组,与空白组相比,差异不显著(P >0.05),与模型组相比,差异显著(P <0.05);给药后,中药复方组十二指肠组织脂肪酶含量升高,其中高、中剂量组,与空白组相比,差异不显著(P >0.05),与模型组相比,差异显著(P <0.05)。
脾虚泄泻是由于脾脏运化、升清的功能受碍,以脾虚湿盛的为病机的一种疾病,临床上以腹泻、精神状态不佳、食欲减退,易复发为主要特征。目前,对该病的治疗主要是对症治疗和支持治疗,多用抗生素等药物治疗,治疗效果并不明显,且抗生素的长期使用会有较大的弊端[3,4]。本研究主要依据脾虚泄泻的临床症状对脾虚泄泻进行辨证组方,从而达到较好的治疗效果,研究结果表明自拟的中药复方对脾虚泄泻仔猪有较好的治疗效果,其中高剂量组治愈率能达到70%,有效率达到90%。还可以提高机体脂肪酶的活性,从而提高机体的消化功能。
中药复方对脾虚泄泻仔猪有较好的治疗效果,同时可以提高脾虚泄泻仔猪的末重、日增重,降低其料重比,升高仔猪血清中免疫球蛋白IgM 含量。
表 3 中药复方对脾虚泄泻仔猪治疗效果
表4 中药复方对脾虚泄泻仔猪血液生理指标的影响
表5 中药复方对脾虚泄泻仔猪血清免疫球蛋白IgG、IgM 的影响 μg/mL
表6 中药复方对脾虚泄泻仔猪十二指肠淀粉酶、脂肪酶的影响 U/L