连续流动分析法比对实验能力验证样品的均匀性和稳定性检验

彭丽娟，李 苓，王春琼，陈 丹，刘宇晨，刘恩芬

（1.云南省烟草质量监督检测站，云南 昆明 650000；2.云南中烟再造烟叶有限责任公司，云南 昆明 650000）

能力验证利用实验室间比对来确定实验室的检测或校准能力，是实验室认可活动中的重要内容，受到国际实验室认可合作组织及世界各国实验室认可组织的高度重视[1]。用于能力验证的试样，其均匀性和稳定性是进行能力验证的基础和保证，所有参加能力验证实验室所用的试样都应均匀一致，稳定可靠，才能确保能力验证中出现任何可疑结果或离群结果均不能归因于试样之间的变异，而是实验室的能力差异所引起的[1-3]。本论文介绍了连续流动分析仪共同实验所采用的能力验证试样制备和均匀性、稳定性检验过程。

1 材料与方法

1.1 材料和仪器

连续流动分析仪（法国ALLIANCE公司），调速振荡器（常州国华电器有限公司）。

纯水（昆明珍茗食品有限责任公司），盐酸（AR，广东汕头市西陇化工厂），无水碳酸钠（AR，广州化学试剂厂），新亚铜试剂（AR，），冰醋酸（AR，天津市风船化学试剂科技有限公司），葡萄糖（AR，广州化学试剂厂）。

1.2 验证试样的制备及分装

验证试样的制备：选择同一个品牌、类型、名称的烟草薄片样品2kg，按[4]制备成烟末试样，第一步，先将烟末试样放入一个体积大约10L的干净的不锈钢容器中，用长把大号样品勺反复搅拌，顺时针搅拌至少50次，逆时针搅拌至少50次，上下翻搅至少50次。第二步，把混合均匀的烟末试样全部倒入大约50cm×60cm的大号封口袋中封口，反复来回颠倒试样至少50次，再次充分混合均匀。第三步，随机抽取对角线上四个部位的试验各20.00g，分别过40目筛网，分别收集未过筛网的样品称重，重量在0.3～0.6g之间，均小于1g，证明试样95%以上物理特征一致、粒度均匀。

验证试样的分装：随机抽取验证试样若干份，重量分别在20～30g，分装在5号封口袋中封口、编号，密封储存在0～4℃的冰柜里备用。

对需要保存1年以上的试样，没有条件进行辐射灭菌、紫外线灭菌处理的实验室，可将制备好的试样置于几个干净瓷方盘中，于烘箱中高温灭菌（100℃，1h）处理后，冷却后再进行分装。

2 结果与讨论

2.1 均匀性检验

均匀性是指对于物质的一种或多种指定特性具有相同特性量值或相同结构或相同组份的一种物质状态。如果物质的一部分（子样）特性值与另一部分 (另一子样）特性值之间的差异很小，甚至不能被实验检测所区分，则该物质就该特性而言，可以认定为是均匀的[3]。

我实验室参照 [2]和 [3]，通过检测样品中的总糖含量，采用单因子方差分析进行能力验证试样的均匀性检验。从已分装成小袋的能力验证样品中随机抽取10个，按照 [5]，在重复性条件下测试2次，单因子方差分析结果见表1和表2。

F临界值F0.05(9,10)=3.02,计算的F值为0.326，该值

表1 能力验证试样均匀性检测数据Tab.1 The homogeneity testing data of the specimen for proficiency testing

表2 能力验证试样单因子方差分析结果Tab.2 The result of single factor variance analysis of the specimen for proficiency testing

2.2 稳定性检验

稳定性是指所研究的物质在规定的贮存和使用条件下，在规定的时间间隔内，这种物质的特性量值或结果或组份保持在规定的范围之内的能力。对于应用于实验室间比对的能力验证试样，就是要通过定期的稳定性检验，以确保在整个能力验证期间验证样的特性量值或结构式组份是稳定的，这样能力验证中出现的任何可疑结果或离群结果皆不能归因于验证样的不稳定，而是实验室的检测能力所引起[3]。

我实验室参照 [2]和 [3]，通过检测样品中的总糖含量，采用t检验进行能力验证试样的稳定性检验。从验证样中随机抽取18个验证样，按照[5]方法，每个样测定一次，共18次重复测试。在验证样品制备出来后1年、2年、3年分别进行同样的操作，结果见表3。如表3所示，3年以内的t计算

2.3 历年比对实验结果比较

通过分析验证样品自制备出来后历年的比对实验数据可知（表4），3年以来，该验证样品的t计算均小于t表，说明样品历年来的总糖检测值无明显差异，同时也证明了该验证样品的稳定性良好。

3 结论

实验室制备的验证样品均匀性满足比对实验要求，稳定性检验及历年来比对实验结果比较均表明：在0～4℃，密封条件下保存的验证样品自制备后3年以来一直能满足比对实验要求。

表3 验证样品稳定性检验Tab.3 The stability testing of the specimen for proficiency testing

续表3

表4 历年比对实验结果比较Tab.4 The data of the interlaboratory comparison over the years