全自动生化分析仪吸样致样本污染对乙肝病毒检测的影响

丹东市妇女儿童医院（丹东市中心医院妇儿院区）医学检验科 （辽宁 丹东 118002）

内容提要：目的：分析全自动生化分析仪在样本交叉污染情况下检测乙型病毒性肝炎的结果，评价临床是否可共用标本进行免疫生化检测。方法：从2019年6月～2020年6月本院受检血液样本中选择30例拥有不同含量的HBsAg的乙型病毒性肝炎阳性血液标本，同时同样选择30例乙肝病毒检测结果为阴性的血液样本，共同作为本次研究观察对象。依据血液标本采集时间顺序分别在分析仪监测前提下，分析血液标本被轻度污染后酶标仪HBsAg含量及HBV-DNA含量，将检测结果与被污染前数据进行对比，分析吸样污染后对HBsAg及HBV-DNA的结果影响。结果：样本交叉污染前后，生化分析仪提示HBsAg数据结果波动不大，而PCR定量检测时可见HBVDNA含量有较大波动。结论：临床工作中全自动生化仪器对样本进行检测时可能造成样品被污染情况发生，但是其检测结果只对PCR定量检测HBV-DNA时影响较大，而对酶免HBsAg检测结果并无明显影响，可见，检测仪器自身的状态决定样本可能受到污染的程度，所以在计划应用同一份标本进行生化和免疫检测时，应提前评估生化仪对检测免疫的影响程度，再决定是否采用同一样本进行。

全自动生化分析仪对标本交叉检测时允许绝对误差为0.32～0.7mmol/L，相关报道指出，在绝对误差范围内的交叉污染不会影响一般生化检测项目的实际指标[1]。部分学者研究指出因全自动生化仪具备自动清洗功能，因此在标本交叉检测时如果自动清洗功能仍具备，那么在免疫及生化检测共有同一标本对HBV检测结果影响甚微[2]。作者用酶免法对标本HbsAg值进行检测，采用PCR定量分析HBV-DNA数值，以研究临床诊断时是否可以生化免疫项目共用一个血液样本，具体汇报如下。

1.资料与方法

1.1 临床资料

血液样本选自2019年6月～2020年6月本院收治患者，共选取60份，其中30份为明确感染乙肝病毒样本，分大三阳、小三阳、弱阳性等20份；将三组分别编号D1-D10，X1-X10，R1-R10，其中大小三阳组即D组和X组HbsAg含量均为阳性，且S/CO值均为30～50，弱阳性组及R组标本HbsAg含量亦为阳性且S/CO值＜10。选取的60分标本HBV-M均为非阳性，对应的编号分别为d1-d10，x1-x10，r1-r10。所有入选标本，均多次检测确保指标符合研究要求[3]。

仪器设备：仪型号为TOSHIBA TBA-40FR，Wellscan全自动酶标仪，美国ABI 7500PCR仪。

1.2 方法

以上标本经生化分析仪操作前，先酶标平行3次检测，经酶标仪读数取均值，记录数据。同时，进行平行3次PCR定量检测HBV-DNA，取均值，记录数据。

1.3 观察指标

检测并记录污染前后酶标仪HBsAg的结果，HBV-DNA的含量，最后把数据结果进行分析对比，评价全自动生化分析仪的工作时存在的下交叉污染程度，以判断对样本检验结果影响的程度[4]。

1.4 统计学分析

应用SPSS 20.0分析统计软件对样本检测结果进行统一运算统计分析，对统计数据部分应用±s表示，以t为计量资料检验，计数资料的检验则通过χ2计算，当数据结果提示P＜0.05时判断为具有统计学差异。

2.结果

HBV-M血清样品生化仪检测前后HBsAg酶标结果对比时，各组HBsAg数据结果波动不大，而PCR定量检测时可见HBV-DNA含量有较大波动。

3.讨论

由此可见，全自动化分析仪在检测时候可能对血液样品造成一定程度污染，在阴性血液样本HBV-DNA检测过程中可以明显地体现出来，但是针对于酶免HBsAg读数中的阳性标本HBV-DNA定量影响却不明显[5]。造成这个现象的原因可能有多种因素，其中试验设计本身也可能存在缺陷，其中酶免HBsAg用样品量（50μL）数值过大。研究中，全自动生化仪检测交叉污染对酶免HBsAg标值的干扰，结果表明是在合理范围内的，不过如果检测过程中存在吸样后不清洗或者清洗不充分情况下，就可能存在较大污染，严重干扰实际检测结果[6]。研究指出ELISA检测灵敏度较高，但是依然存在假阳性可能[7]。不同厂家不同型号的仪器，样品自身可能携带的污染程度也有较大区别，因此工作中应对仪器进行必要的维护和清洁保养。污染率都在1%以下，都不会对实验带来很大的污染，但是会造成免疫分析假阳性。因此，生化项目与免疫分析不宜共用标本，如果迫不得已，需要根据自身实际情况进行设计实验。确定全自动生化分析仪样本携带污染的影响程度并不是很大的时候，才可以进行实验。