饮用微生态制剂对雏鸡生产性能、免疫器官指数和肠道益生菌的影响

张雷，王欢欢，葛莹，章学东

(杭州市农业科学研究院，浙江 杭州 310024)

微生态制剂作为抗生素替代品，已被广泛应用于家禽生产[1]。微生态制剂能有效补充家禽肠道内有益微生物，改善肠道菌群平衡，提高动物机体抗病能力、代谢能力及饲料吸收利用能力，从而达到防治肠道疾病和促进生长的双重作用[2-4]。在日常应用中，微生态制剂常作为添加剂加入饲料中，由于难于混匀使得使用效果不佳。同时，低聚糖的吸湿性和粘性会导致饲料结块从而影响均匀度和饲喂效果。本试验通过饮水饲喂不同组合的微生态制剂，研究其对雏鸡生产性能、免疫器官指数和肠道益生菌群的作用。

1 材料与方法

1.1 材料

低聚果糖(FOS)购自量子高科(中国)生物股份有限公司，果糖含量≥95%，粉末状固体，饲料级。枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和丁酸梭菌水溶性制剂采购自浙江惠嘉生物科技股份有限公司。雏鸡全价配合饲料采购自上海超越饲料有限公司，原料组成中不含微生态制剂。

1.2 方法

选择1日龄白羽乌骨雏鸡140羽，随机分为四组，每组35羽，每只鸡为1个重复。通过饮水饲喂不同组合的微生态制剂：对照组，不添加微生态制剂；试验Ⅰ组，添加0.25% FOS；试验Ⅱ组，添加0.125% FOS+0.01%复合益生菌制剂；试验Ⅲ组，添加0.02%复合益生菌制剂。复合益生菌制剂中，丁酸梭菌≥1.0×109L-1，枯草芽孢杆菌≥1.0×1012L-1，地衣芽孢杆菌≥1.0×1012L-1。采用地面平养方式，自由采食和饮水，试验期42 d。各组的疫苗免疫和饲养管理条件保持一致。

1.3 指标测定

1.3.1 体重

试验第1、42天，以个体为单位空腹称重，并记录。

1.3.2 免疫器官

试验第42天，各处理随机选取6只，放血处死，摘取脾脏、两侧胸腺、法氏囊，吸干血液并去除结缔组织后称重并计算免疫器官指数。免疫器官指数=免疫器官重量(g)/活体重(kg)。

1.3.3 肠道菌群检测

试验第42天，各处理随机选取6只，放血处死，无菌操作下分离十二指肠和盲肠，从各部位取出一定量肠道内容物并装入无菌试管中，-20 ℃下保存，用于细菌DNA的提取。应用DNA提取试剂盒提取基因组DNA，使用NanoDrop 2000超微量分光光度计测定DNA浓度，并通过1%琼脂凝胶电泳确认其完整性和大小，储存于-30 ℃冰箱中备用。随后通过Real-time PCR测定样品中双歧杆菌和乳酸菌，进行定量分析。特异性引物由上海生工生物工程技术服务有限公司合成，引物Bif164序列(5′-3′)，F: GGGTGGTAATGCCGGATG，R: TAAGCCATGGACTTTCACACC，扩增长度440 bp；引物Lac序列(5′-3′)，F: AGCAGTAGGGAATC TTCCA；R: ATTYCACCGCTACACATG，扩增长度344 bp。

1.4 数据处理

数据采用SPSS软件进行方差分析，结果用平均值±标准误表示。

2 结果与分析

2.1 对雏鸡生产性能的影响

如表1可见，添加42 d后，复合益生菌+低聚果糖组和复合益生菌组鸡体重显著高于对照组。各处理间平均日增重差异不显著。

表1 饮用微生态制剂对雏鸡生产性能的影响

注：同列数据后无相同小写字母表示差异显著(P<0.05)，表2～3同。

2.2 对雏鸡免疫器官的影响

如表2可见，试验结束时，复合益生菌+低聚果糖组鸡胸腺指数、法氏囊指数显著高于对照组，各处理间脾脏指数无显著差异。

表2 饮用微生态制剂对雏鸡免疫器官的作用

2.3 对雏鸡肠道菌群的影响

如表3所示，试验结束时，复合益生菌+低聚果糖组十二指肠双歧杆菌数量和盲肠乳酸杆菌数量显著高于对照组，复合益生菌组十二指肠乳酸杆菌和双歧杆菌数量显著高于对照组。

表3 饮用微生态制剂对雏鸡肠道菌群的影响

3 讨论

复合微生态制剂能改善鸡的生产性能，而且优于单独应用1种微生态制剂的效果，其中复合芽孢杆菌制剂,应用最为广泛。薛冬玲等[5]发现，枯草芽孢杆菌能够提高试验组肉鸡末期的平均体重、净增重和日增重；邓文等[6]发现，同时添加丁酸梭菌和低聚木糖能显著提高肉鸡平均日增重，两者有明显的互作效应，而单独添加对肉鸡平均日增重的影响不显著；任冰等[7]发现，果寡糖-地衣芽孢杆菌组肉仔鸡体重显著高于对照组，而果寡糖组的体重增加不显著。本试验结果与戴晋军等[8]、Rosidi等[9]研究结果一致。

微生态制剂具有提高动物免疫功能的作用，能增强动物对病原的抵抗能力，降低发病率，进而提高生产性能[10]。国内外大量研究表明，益生芽孢杆菌、丁酸梭菌和低聚果糖都能够提高机体免疫功能。赵希彦[11]利用芽孢杆菌微生态饲料添加剂饲喂雏鸡，发现试验组各免疫器官指数均显著高于对照组。本试验结果表明，饮用复合微生态制剂显著提高鸡胸腺指数和法氏囊指数，对试验组鸡胸腺和法氏囊的发育均有促进作用，有助于提高动物体液免疫水平和细胞免疫水平，增强机体抗病力[12-13]。

改善肉鸡的生产性能还可能是通过调节肠道微生物区系，使其维持良好平衡，由此促进肠道功能[14]。稳定的肠道微生物区系对宿主抵御病原菌的入侵有重要作用[15]。已有研究表明，微生态制剂通过调节肠道菌群来改善家禽的生产性能[12-13,16]。芽孢杆菌微生态制剂具有拮抗肠道病原细菌、维持和调整肠道微生态平衡的作用[17]。低聚果糖在体内能够促进双歧杆菌和乳酸杆菌增殖，进而发挥有益作用，抑制有害菌增殖并通过拮抗作用减少有害菌对肠道上皮的黏附[18-19]。丁酸梭菌产生的丁酸是结肠黏膜的主要能量物质，对维持正常的肠道绒毛形态和吸收功能有重要作用[11]，丁酸梭菌还能促进肉鸡肠道内双歧杆菌和乳酸杆菌的增长[20]。本试验中，复合微生态制剂对十二指肠乳酸杆菌、双歧杆菌，以及盲肠内乳酸杆菌都有明显的增殖作用，但是对盲肠内的双歧杆菌的作用不显著。