不同接种途径免疫侯豆平在预防传染性喉气管炎的效果研究

吴凤明 王 辉 高晓磊 韩明宝

（1.天津市广源畜禽养殖有限公司，天津 301800；2.瑞普（保定）生物药业有限公司，河北保定 071000；3.天津瑞普生物技术股份有限公司，天津 300308）

传染性喉气管炎是由传染性喉气管炎病（infectious laryngotracheitis virus，ILTV）引起的一种急性接触性呼吸道鸡的传染病[1]，该病毒属于疱疹病毒科，A型疱疹病毒属，具有疱疹病毒潜伏感染特性[2]。该病1925年第一次发生于美国洛岛，主要导致鸡的死亡和产蛋量下降，目前已蔓延至全球各地，给养鸡业造成很大的损失。该病发病率接近100%，死亡率10%～40%，产蛋鸡群感染后产蛋下降可达35%，甚至完全停产。我国于1959年在贵州省贵阳市首次发现 ILT，1992年首次分离到病毒。1992年以后该病在我国一些地区呈地方性流行，给我国的养鸡业造成了很大损失。近年随着ILTV弱毒疫苗的广泛使用，使得该病得到一定控制。由于弱毒疫苗存在毒力返强的风险，从而导致免疫鸡群和非免疫鸡群一样存在感染隐患。目前尚不清楚温和型是否就是由疫苗毒毒力返强所导致的[3-4]，但疫苗毒和野毒都可以造成病毒的潜伏感染，病鸡康复后长期带毒和排毒会成为主要传染源，给鸡传染性喉气管炎的防控带来了极大的困难[5-7]。因基因疫苗比传统苗具有很多优势，王晓丽等[8]随着分子生物学和基因工程的发展，使基因工程疫苗的研制日益受到重视。孙新峰[9]与之研制有关的质粒、启动子、增强子、内含子和免疫佐剂等的选择多个目的基因插入同一载体后是否互相干扰以及经不同方式接种后引起的免疫机理和效果等进一步加深了对基因工程疫苗的研究[10]，基因疫苗优点是：生产工艺简单、易于大量生产、造价低廉，不易变质、质量可控、免疫期长，运输和储存方便。且其表达产物虽然分子量较小，但由于在宿主细胞内部，可刺激免疫系统即产生细胞免疫又产生体液免疫，免疫效果与弱毒活疫苗差不多，易于做成多联苗，发展前景良好[11]。

目前该病防治的疫苗多为常规疫苗，但是存在诸多不足。为了解决这些问题和保障畜禽养殖业健康发展，瑞普生物依据哈尔滨兽医研究所研制的“鸡传染性喉气管炎重组鸡痘病毒基因工程疫苗”进行糖基化，使疫苗在7日龄，甚至1日龄即可进行免疫，达到早期预防传染性喉气管炎的目的，从而满足现今养殖预防传喉疾病的需要。瑞普生物从SPF鸡、蛋鸡等不同品种、不同日龄采用不同免疫方法进行传染性喉气管炎攻毒试验，小日龄颈部皮下注射对于鸡传染性喉气管炎有很好的保护率。具体试验如下：

1 试验材料

1.1 疫苗

侯豆平--鸡传染性喉气管炎重组鸡痘病毒基因工程苗

1.2 试验动物

1日龄SPF鸡、1日龄蛋鸡、7日龄蛋鸡

2试验方法

1日龄SPF鸡40只，1日龄蛋鸡35只、 7日龄蛋鸡35 只。每个日龄鸡只均随机分成4组，均是1组颈部皮下注射0.1ml（1羽份）喉痘疫苗，1组翼下刺种喉痘疫苗1 羽份，1组阳性（攻毒）对照、1组阴性（空白）对照。

免疫28日后，连同条件相同的1日龄 SPF 鸡 30 只、1日龄蛋鸡30只、7日龄蛋鸡30只，分别喉囊内接种传染性喉气管炎流行株病毒0.4ml。具体分组情况和处理情况见表1、2、3，观察 10日或20日龄，对所有鸡只进行称重、发病情况进行统计分析。

1日龄SPF鸡传喉攻毒保护试验鸡分组与试验方法

1日龄蛋鸡传喉攻毒保护试验鸡分组与试验方法

7日龄蛋鸡传喉攻毒保护试验鸡分组与试验方法

3 试验结果

3.1 SPF鸡1日龄不同免疫途径传喉攻毒对比试验结果

分组 只数 免疫日龄死亡数 保护率28d 39d 增重攻毒日龄攻毒前后体重g 发病数试验1组 10 1 29 216.11 359.28 143.17 1 0 9/10试验2组 10 1 29 203.55 336.13 132.58 2 0 8/10攻毒对照组 10 1 29 243.97 349.45 105.48 10 2 --空白对照组 10 -- -- 234.60 387.62 153.02 0 0 --

3.2 1日龄蛋鸡不同免疫途径传喉攻毒对比试验结果

攻毒前后体重g发病数死亡数保护率30d 50d 增重试验1组 10 1 30 190.0 530.6 340.6 1 0 9/10试验2组 10 1 30 201.0 493.2 292.2 2 1 8/10攻毒对照组 10 -- 30 261.7 527.9 266.2 9 1 --空白对照组 5 -- --255.0 559.0 304.0 0 0 --分组 只数 免疫日龄攻毒日龄

3.3 7日龄蛋鸡不同免疫途径传喉攻毒对比试验结果

攻毒前后体重g发病数死亡数保护率35d 55d 增重试验1组 10 7 35 275.0 608.8 333.8 1 0 9/10试验2组 10 7 35 264.0 572.3 308.3 2 0 8/10攻毒对照组 10 -- 35 310.8 602.7 291.9 10 0 --空白对照组 5 -- -- 299.0 649.0 350.0 0 0 --分组 只数 免疫日龄攻毒日龄

4 试验结论

从以上3次试验可以看出，1日龄和7日龄免疫侯豆平，均对传染性喉气管炎有很好的保护效果；同时在辽宁、福建、山西等地区田间实际使用情况来看，1日龄颈部皮下注射或10日龄刺种侯豆平后传染性喉气管炎均得到有效控制。

通过实验室攻毒实验和田间实际使用来看，对于高发地区且早日龄发生传染性喉气管炎的鸡只完全可以在1日龄或7日龄颈部皮下注射（8～10日龄也可以翼膜刺种）进行首免，从而更好的避免早期发生传染性喉气管炎。

5 侯豆平使用注意事项

本品仅用于接种健康鸡。体质瘦弱、接种过鸡痘疫苗或自然感染过鸡痘病毒 的鸡不能使用，否则影响免疫效果。

接种疫苗后3～4日，刺种部位出现轻微红肿，偶有结痂，14日恢复正常。

使用前应仔细检查，如发现疫苗瓶破裂、无瓶签、苗中混有杂质等，均不能使用。

疫苗应现用现配，稀释后的疫苗限当日用完。

用过的器具应进行消毒。