咸阳地区经皮冠状动脉介入术后冠心病患者CYP2C19基因多态性分析*

许 涛，高玉芳，杨 磊，王 蕊

(陕西省咸阳市中心医院检验科，陕西咸阳 712000)

冠心病是指冠状动脉粥样硬化使血管腔狭窄或阻塞，和(或)因冠状动脉功能性改变导致心肌缺血、缺氧或坏死而引起的心脏病，亦称缺血性心脏病。既往研究表明，冠心病是人类病死率最高的常见疾病之一[1]，居我国人群死亡原因的第2位[2]。国内冠心病指南推荐冠心病经皮冠状动脉介入术(PCI)后抗栓采用抗血小板药物进行治疗，常用药物氯吡格雷(商品名：波立维)可与阿司匹林联合使用或单独使用[3]。随着氯吡格雷的广泛应用，有报道显示部分患者在服用氯吡格雷后，抗栓效果不佳，出现对氯吡格雷无反应或低反应[4]。氯吡格雷是一种前体药物，本身无抗血小板聚集活性，需经细胞色素氧化酶P450(CYP450)酶家族催化生成活性的中间产物，影响抗血小板聚集活性[5]。目前研究较多的基因是CYP450中的重要成员CYP450 2C19(CYP2C19)，其基因的多态性可影响氯吡格雷活性产物生成[6]。本研究通过探讨咸阳地区PCI后冠心病患者CYP2C19基因多态性的分布情况，为指导临床个性化抗血小板治疗提供理论依据。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取咸阳地区于本院心血管中心行PCI并服用氯吡格雷进行抗血小板治疗的冠心病患者279例作为研究对象，患者间无血缘关系，年龄42～78岁，其中男180例，女99例。采集患者静脉血2 mL于EDTA-K2抗凝管中待测。

1.2试剂与仪器 采用乐普(上海)医疗器械有限公司的CYP2C19基因突变检测试剂盒(PCR-荧光探针法)，ABI stepone Plus荧光PCR仪，高速离心机，涡旋振荡器。

1.3方法 严格按照试剂说明书配制扩增反应液，取1 μL抗凝全血与扩增反应液混匀后进行PCR扩增。

1.4统计学处理 采用SPSS19.0统计软件进行数据分析处理。按Hardy-Weinberg遗传平衡定律验证数据的群代表性。计数资料以例数或百分率表示，采用χ2检验进行比较。以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1样本人群经Hardy-Weinberg平衡检验结果 本文检测CYP2C19基因的2个位点(681位点和636位点)，经Hardy-Weinberg遗传平衡定律检验，2个位点的等位基因频率符合遗传平衡法则，说明样本与群体差异无统计学意义(χ2=10.49,P>0.05)。在279例冠心病患者中，CYP2C19基因型分布以正常代谢型(*1/*1)、中间代谢型(*1/*2)最多，分别占109例(39.07%)、109例(39.07%)。见表1。

表1 CYP2C19基因型分布情况(%)

2.2CYP2C19等位基因频率分布结果 CYP2C19基因多态性分布中，等位基因*2的出现频率最高，为32.08%；等位基因*1的出现频率为61.83%;等位基因*3的出现频率为6.09%。

2.3CYP2C19基因代谢型频率分布结果 咸阳地区CYP2C19基因代谢型分布显示，CYP2C19正常代谢型(*1/*1)为109例(39.07%)，CYP2C19中间代谢型(*1/*2、*1/*3)为127例(45.52%)，CYP2C19慢代谢型(*2/*3、*2/*2、*3/*3)为43例(15.41%)。见表2。

表2 CYP2C19基因代谢型频率分布

2.4不同地区CYP2C19基因代谢型分布结果 将国内不同地区(咸阳、沈阳、华南、喀什)汉族冠心病人群CYP2C19基因代谢型分布结果进行比较，发现正常代谢型、中间代谢型、慢代谢型分布差异均无统计学意义(χ2=1.954，P=0.924)。见表3。

表3 不同地区CYP2C19基因代谢型分布结果比较[n(%)]

3 讨 论

氯吡格雷是噻吩吡啶类抗血小板药物，广泛应用于治疗心血管疾病。氯吡格雷是一种前体非活性药物，需经肠道吸收后在肝脏经CYP2C19酶氧化为活性中间产物[7]，是血小板二磷酸腺苷受体亚基12(P2Y12)受体的强效特异性拮抗剂。P2Y12受体是抑制血小板聚集和预防动脉粥样硬化血栓事件的有效药物靶点[8]。氯吡格雷活性中间产物可阻断二磷酸腺苷(ADP)与血小板表面P2Y9受体结合，使纤维蛋白原无法与血小板糖蛋白GPⅡb/Ⅲa受体结合，从而抑制血小板相互聚集，约15%的给药剂量发挥抗血小板主要作用[12]。在形成活性中间代谢产物过程中，由CYP2C19基因合成的CYP2C19酶起更重要的作用[10]。

CYP2C19至少有35个等位基因，而等位基因的多态性将影响酶的表达及活性。在亚洲人群中，CYP2C19等位基因*2、CYP2C19等位基因*3是两种最常见的功能缺失型基因。在本研究中，咸阳地区冠心病患者CYP2C19*1/*1与*1/*2基因型所占比例最高，然而，CYP2C19*1/*2、*1/*3、*2/*3、*2/*2、*3/*3基因型所占比例高达60.93%，CYP2C19多态性与氯吡格雷的代谢有关[11]，影响人体的药物疗效。CYP2C19等位基因*2频率为32.08%，高于CYP2C19等位基因*3的6.09%。有研究报道，CYP2C19等位基因*2、*3的携带者与氯吡格雷血浆活性有关，可导致氯吡格雷抗血小板聚集能力减弱[12-13]。

本研究中，咸阳地区汉族冠心病患者CYP2C19基因的3种代谢型(正常代谢型、中间代谢型、慢代谢型)分布和沈阳[14]、华南[15]、喀什[10]地区汉族的CYP2C19基因代谢型分布基本一致，但咸阳地区CYP2C19基因的代谢型分布中，中间代谢型和慢代谢型分别占比为45.52%和15.41%，慢代谢型发生率(15.41%)略高于其他地区。有研究报道，在接受氯吡格雷经PCI治疗的患者中，中间代谢型和慢代谢型会明显增加重大心血管不良事件的发生率[16-17]。

美国食品药品监督管理局根据CYP2C19*2*3基因表达产物代谢氯吡格雷的能力，将人群分为三类代谢型：正常代谢型(*1/*1)、中间代谢型(*1/*2、*1/*3)、慢代谢型(*2/*2、*2/*3、*3/*3)。对于中间代谢型，可加大氯吡格雷剂量或换用普拉格雷；对于慢代谢型，则可用普拉格雷或替卡格雷米替代。

由于本研究仅收集279例标本代表咸阳地区，可能会引起结果的偏差，有待后续研究纳入更多的地区和更多的数据进行验证。

综上所述，咸阳地区汉族冠心病患者有相当一部分人群携带CYP2C19等位基因*2*3，通过对CYP2C19基因型的检测，有助于个性化使用抗血小板聚集药物或调整抗血小板聚集药物剂量，以减少因用药不当造成的血栓事件发生。