贵州某地区猪O 型口蹄疫血清学免疫抗体调查

蒋泽敏

（贵州省平塘县农业农村局，贵州 平塘 558300）

口蹄疫是由口蹄疫病毒引起偶蹄动物的一种急性、热性、高度接触性传染病。发病的主要特征为口腔黏膜、蹄部、皮肤出现水疱，继而发生溃疡。由于口蹄疫病毒寄生于广泛，传染性强，爆发后传播迅速，如不采取有效措施，能造成巨大经济损失，加之病毒的血清型较多，使防治工作更加复杂，因此，口蹄疫已成为世界各国重视的疫病之一。笔者通过ELISA 方法对2019 年5 月至11 月期间当地送检的猪血清进行了O 型口蹄疫检测和分析。

1 材料与方法

1.1 被检血清

2019 年5 月至11 月由当地送检的194 份猪血清，其中134 份来自10 个规模猪场，60 份来自10 个散养户，被检血清按规模场和散养户进行口蹄疫抗体检测。

1.2 检测试剂

猪O 型口蹄疫ELISA 抗体检测试剂盒为深圳真瑞生物科技有限公司产品。

1.3 操作方法

（1）取出抗原包被待检板，记录好样本的位置。

（2）每次试验均设置阳性对1 孔、阴性对照2 孔。

（3）将待检板条按20ul/孔加入样本稀释液。

（4）将待检样品和阴阳性对照品按20ul/孔加入孔内（移液器枪头请勿混用）。

（5）每孔加酶结合物60ul，轻微震荡混匀，盖上封板膜，置37℃温育45 分钟。

（6）甩掉板孔中的溶液，每孔加入洗涤液250ul，甩去孔内溶液，以上步骤重复4-6 次，最后在干净吸水纸上拍干。

（7）每孔加显色液100ul,混匀，盖上封板膜37℃闭光显色15 分钟。

（8）每孔加终止液50ul，使反应终止。

（9）10 钟内测量并记录样本和对照的吸光度OD450nm。

（10）计算结果。

1.4 结果判定

检测结果判定：阴性对照（N）OD 值＞0.5，同时阳性对照（P）阻断率＞45%；判定为有效，否则判结果无效。口蹄疫抗体检测结果根据PI(阻断率)计算：PI=[1-(样品OD 值/阴性OD 均值）]*100%,当PI(阻断率）＞45%时被检样品判为阳性；当PI(阻断率）≤45%时被检样品则判为阴性。

2 结果与分析

2.1 规模化养猪场抗体检测结果

对当地送检的规模化猪场血清进行O 型口蹄疫抗体检测。检测结果表明，规模猪场送检 134 份血清，阳性血清105 份，合格率78.35%，其中有8 个规模化猪场的合格率达70%以上。

表1 规模化猪场O型口蹄疫抗体检测结果

2.2 散养户抗体检测结果

对送检的散养户血清进行O 型口蹄疫抗体检测。检测结果表明，散养户送检60 份血清，阳性血清36 份，合格率60%，其中有2 户散养户的合格率达70%以上。

2.3 不同日龄抗体检测结果

将194 份血清按不同年龄进行分群，不同年龄阶段的猪血清中抗体合格率差异较大，母猪、育肥猪、保育猪、仔猪的血清抗体合格率分别为96.67%、51.16%、75%、95.65%。

3 小结与讨论

此次试验采用的ELISA 试剂盒，灵敏性高、特异性强、稳定性良好，使检测结果更加可靠准确，真实的反应了当地免疫抗体水平高低，为动物防疫工作提供可靠的依据。

通过对送检的10 个规模场，10 个散养户的194 份血清进行了检测，口蹄疫免疫抗体合格率为72.68，总体达到农业部规定的70%以上。但规模养殖场的免疫合格率为78.35%，散养户的免疫合格率60%，规模养殖场高于散养户。可见规模养殖场对防疫比较重视，免疫规范，科学养殖。散养户免疫不理想，养殖方式传统，对防疫不够重视。

通过对不同年龄阶段的194份血清抗体检测结果进行比较，母猪抗体合格率最高，然后依次是仔猪、保育猪，育肥猪抗体水平最低。

通过血清抗体的检测，可以准确的掌握各养殖场（户）的免疫效果，然后对疫情进行预警预报和风险评估，再制定科学的补免程序，有效的指导养殖场（户）科学养殖。