牙龈间充质干细胞治疗慢性移植物抗宿主病的机制分析

李红瑛 XI DANG

（1 古巴哈瓦那医科大学 古巴 哈瓦那 999075）

（2 罗西奥大学 西班牙 塞维利亚 999023）

器官移植是目前很多疾病治疗的重要方法，能够代替衰竭器官维持正常功能。慢性移植物抗宿主病是器官移植术后常见并发症，常规免疫抑制药物在该病治疗中的效果不够理想，甚至增加了患者身体的负担[1]。慢性移植物抗宿主病的发病时间常见于术后3 个月之后，除了T 细胞激活外，还伴随B 细胞以及体液免疫激活[2]。间充质干细胞能够分泌多种生长因子以及免疫保护细胞因子，对于促进组织修复、抑制免疫细胞活化具有较好的效果，随着临床研究的深入，发现其在细胞移植、器官移植等领域有着较高的应用价值[3]。文章主要针对牙龈间充质干细胞治疗慢性移植物抗宿主病的机制展开分析，报道如下。

1. 资料与方法

1.1 材料与试剂

本次研究实验小鼠由医院实验室提供，相关试剂为美国Gibco 公司进口。

1.2 方法

从人牙龈组织中采集牙龈间充质干细胞，通过建立慢性移植物抗宿主病小鼠样本，并分为观察组与对照组，然后将牙龈间充质干细胞注入观察组慢性移植物抗宿主病小鼠模型。

牙龈间充质干细胞采集方法：牙龈组织剪碎并使用PBS 缓冲液冲洗，然后放在0.4% 分散酶的PBS 缓冲液中，置于37℃孵育箱中30min，剥离牙龈上皮组织并加入I 型胶原酶静置50min，然后使用70mm 滤网过滤并加入培养液，使用DMEM 培养基进行培养。使用显微镜进行单细胞采集并转移至生长培养基。

慢性移植物抗宿主病小鼠样本建立方法：第1 天从小鼠尾静脉注射60mg/kg 环磷酰胺，第2 天全身照射200cGy 放射线，观察组小鼠第3 天尾静脉注射间充质干细胞（2×106）,。

1.3 观察指标

观察两组小鼠模型的病情变化，从而分析其治疗机制。

1.4 统计学方法

采用SPSS16.0 统计学软件进行统计学分析，计量资料采用t值检验，P＜0.05 时为差异有统计学意义。

2. 结果

观察组小鼠IL-4、IL-6、IFN-γ 以及TNF-α 水平明显低于对照组小鼠（P＜0.05），见表1。

表1 两组小鼠炎症因子指标差异（±s）

表1 两组小鼠炎症因子指标差异（±s）

组别 IL-4（pg/ml） IL-6（pg/ml） IFN-γ（ml/U） TNF-α（pg/ml）观察组 122.5±23.6 88.6±14.8 65.8±11.5 74.6±11.5对照组 145.6±36.5 110.6±25.6 86.9±16.4 94.2±17.8 t 5.485 5.201 5.124 5.220 P 0.044 0.042 0.041 0.042

3. 讨论

目前临床研究证实了牙龈间充质干细胞在多种免疫性疾病临床治疗中具有较好的应用效果，本次研究主要针对其在慢性移植物抗宿主病中的治疗机制展开分析。目前牙龈间充质干细胞主要是通过口腔组织获取，创口较小且采集难度低，具有较好的扩增能力，在保持一定数量的前提下具有较好的免疫调节效果，能够通过控制细胞数量来减小成瘤风险[4]。随着现代医学研究的深入，发现牙龈间充质干细胞能够有效抑制B 细胞分泌免疫球蛋白，从而减少自体免疫性疾病的发生风险，例如IgG可引起慢性免疫相关炎症，IgM 可引起风湿性关节炎等，因此通过抑制B 细胞的表达能力能够减轻自体免疫疾病的发生率。B 细胞主要在机体中起到介导体液免疫的作用，成熟的B 细胞能够分化增殖为浆细胞，合成抗体，从而达到免疫的效果。

白细胞介素（IL）是多种细胞产生的一类细胞因子，功能复杂，在免疫细胞成熟、活化、增殖以及免疫调节中起到了重要的作用，同时参与人体多种生理与病理反应。IL-4 能够促使B 细胞分裂防止，增强B 细胞的抗原递呈能力，还能够促使B 细胞分泌IgE。IL-6 能够促使B 细胞繁殖，参与炎症反应，作用靶细胞较多，包括巨噬细胞、B 细胞以及浆细胞等[5]。TNF 是由巨噬细胞分泌的一种小分子蛋白，TNF-α 主要是由单核巨噬细胞分泌，能够刺激IL-1 的表达，其与感染性休克、病毒复制以及恶液质的发生有密切的相关性，健康人血清TNF 水平较低，但在风湿性关节炎、肾移植以及硬化症患者中可检测到TNF 水平升高，且与患者的病情水平呈正相关性，由此可见TNF 水平升高与患者病情发展有密切的相关性。本次研究中观察组小鼠IL-4、IL-6、IFN-γ 以及TNF-α 水平明显低于对照组小鼠（P＜0.05），这说明通过注射牙龈间充质干细胞能够有效降低小鼠炎症因子水平，通过抑炎效果来治疗慢性移植物抗宿主病。牙龈间充质干细胞具有采集方法简单、创口小、数量稳定的特点，因此在牙龈间充质干细胞中具有较好的应用价值，能够有效改善患者的炎症因子水平，从而改善患者的临床症状。

综上所述，牙龈间充质干细胞能够通过抑制炎症因子表达从而达到治疗慢性移植物抗宿主病的效果。