膀胱出口梗阻对大鼠膀胱逼尿肌生物力学特性的影响

陈进军 刁宏旺 姜俊海 李守林

（深圳市儿童医院 广东 深圳 518026）

膀胱的生理功能主要有两个，即排尿、储尿，具体表现为储尿期逼尿肌在容纳性、顺应性舒张作用良好的情况下将膀胱容量扩大，并对低压状态进行保持，对尿失禁的发生进行积极预防，并对上尿路功能进行保护；排尿期逼尿肌将整体协调性收缩速度、强度发挥出来，将膀胱中的尿液有效排空，对残余尿的出现进行有效预防[1]。本研究探讨了大鼠膀胱逼尿肌生物力学特性受到膀胱出口梗阻的影响。

1. 资料与方法

1.1 实验动物

购买第三军医大学实验动物中心提供的54 只雌性Wistar大鼠，月龄3 ～4 个月，体质量180 ～200g。依据充盈期膀胱压力分为梗阻2 周逼尿肌稳定组（DS2 组，n=11）、梗阻2 周逼尿肌不稳定组（DI2 组，n=8）、梗阻4 周逼尿肌稳定组（DS4 组，n=15）、梗阻4 周逼尿肌不稳定组（DI4 组，n=10）、对照组或假手术组（C 组，n=10）。

1.2 方法

1.2.1 梗阻模型制作

给予大鼠腹腔注射40mg/kg 1% 苯巴比妥进行麻醉，将切口开在下腹部正中，向尿道探入聚乙烯探子，直径为1mm，稍微分离近端尿道，用2-0 丝线对尿道进行结扎，以能够轻易拔出探子、对探子周围组织进行牵拉能够随之移动确定松紧，将探子拔出后将切口关闭。对照组或假手术组不对尿道进行结扎，其余操作同上。

1.2.2 充盈期膀胱压力测定

给予大鼠皮下注射1g/kg 乌拉坦进行麻醉，帮助大鼠取仰卧位，将其固定下来，经尿道向膀胱插入硬膜外导管，将其和7号针头连接起来，经三通道将其和微量灌注泵、尿动力仪连接起来。以轻柔的动作对腹部进行按压，将尿液排净。以0.2ml/min 的速度给予大鼠膀胱灌注生理盐水。

1.2.3 离体逼尿肌条制备

对大鼠头部进行猛击，使其昏迷，将其下腹部剪开，将其膀胱全切下来，对其质量进行称量。第一时间在平皿中放置，其盛有4℃ Krebs 营养液，将膀胱体部组织取下来，镜下解剖，将粘膜仔细剔除，将肌条纵行切取下来，规格为8mm×2mm×2mm，每个膀胱将2 ～3 根肌条制备出来。用丝线结扎肌条两端，在灌流机槽底部固定下端，其盛有37℃ Krebs 液，在Krebs 液中完全进入肌条，将上端和拉力传感器连接起来，将拉力传感器和四通道多功能生理信号放大器连接起来，向计算机中输入检测信号。将5%CO2+95%O2混合气体通入Krebs 液中。氯化氨基甲酰胆碱（Carbachol）收缩试验：平衡静息张力到0.5g，依次用浓度为10-7mmol/L、10-6mmol/L、10-5mmol/L、10-4mmol/L、10-3mmol/L、10-2mmol/L 的carbachol 对肌条进行刺激，对肌条产生的收缩力进行测定，将逼尿肌对乙酰胆碱的敏感性反映出来。每种浓度试验后均对肌条进行3 次冲洗，并进行10min 的平衡，从而将残留的carbachol 清除。

1.3 统计学方法

2. 结果

2.1 膀胱出口梗阻模型建立情况

梗阻组大鼠的膀胱容量显著大于对照组（P＜0.05），膀胱湿质量显著高于对照组（P＜0.05），见表1。

表1 膀胱出口梗阻模型建立情况（±s）

表1 膀胱出口梗阻模型建立情况（±s）

组别 膀胱容量（ml） 膀胱湿质量（g）梗阻组 3.2±1.0 10.3±1.7对照组 1.5±0.4 7.1±1.4 t 4.303 4.541 P＜0.05 ＜0.05

2.2 滴度浓度Carbachol 刺激逼尿肌条产生的收缩力分析

DS2 组大鼠的逼尿肌条收缩力显著高于C 组（P＜0.05），DS4 组大鼠的逼尿肌条收缩力显著低于C 组（P＜0.05），DI2 组、DI 组大鼠的逼尿肌条收缩力均显著低于C 组（P＜0.05）。

2.3 膀胱出口梗阻模型建立后膀胱顺应性改变分析

DS2组、DS4组大鼠的膀胱顺应性均显著高于C组（P＜0.05），DI2 组、DI4 组大鼠的膀胱顺应性均显著低于C 组（P＜0.05），见表2。

表2 膀胱出口梗阻模型建立后膀胱顺应性改变分析（±s，ml/cmH2O）

表2 膀胱出口梗阻模型建立后膀胱顺应性改变分析（±s，ml/cmH2O）

组别 n 膀胱顺应性DS2 组 11 0.247±0.083 DI2 组 8 0.108±0.030 DS4 组 15 0.312±0.141 DI4 组 10 0.140±0.054 C 组 10 0.185±0.052

3. 讨论

平滑肌是空腔脏器管壁，通常情况下，其功能、长度会随着腔内压力的变化而变化，具体表现在能够正常适应一定范围内的压力刺激作用，但是自身生物力学性质会在前内压力比该范围大的情况下发生异常[2-3]。因此，在对逼尿肌的生物力学特性进行实验研究的过程中，对膀胱出口梗阻进行分析具有极为重要的临床意义[4-5]。相关医学研究表明[6-7]，梗阻后稳定性、不稳定性逼尿肌收缩性分别有双相性改变、受损发生，膀胱顺应性分别提升、降低，二者显著相关。本研究结果表明，梗阻组大鼠的膀胱容量显著大于对照组（P＜0.05），膀胱湿质量显著高于对照组（P＜0.05）。DS2 组大鼠的逼尿肌条收缩力显著高于C 组（P＜0.05），DS4 组大鼠的逼尿肌条收缩力显著低于C 组（P＜0.05），DI2 组、DI 组大鼠的逼尿肌条收缩力均显著低于C 组（P＜0.05）。DS2 组、DS4 组大鼠的膀胱顺应性均显著高于C 组（P＜0.05），DI2 组、DI4 组大鼠的膀胱顺应性均显著低于C 组（P＜0.05），和上述研究结果一致。

综上所述，大鼠膀胱逼尿肌生物力学特性受到膀胱出口梗阻的直接影响，值得重视。