粗须白甲鱼人工繁殖试验

陈飞雄， 张显波*， 周其椿， 赵 飞， 樊均德，廖泽龙，贺兵，李正友，袁再孝，李建光

(1.贵州省农业科学院 水产研究所， 贵州 贵阳 550025； 2.铜仁学院 生物与农林工程学院， 贵州 铜仁 554300； 3.江口县农业农村局， 贵州 江口 554300； 4.铜仁市农业农村局， 贵州 铜仁 554300； 5.贵州东亿农业发展有限公司， 贵州 江口 554300)

粗须白甲鱼(Onychostomabarbata)是贵州省梵净山周边山溪河流重要的野生小型淡水名贵经济鱼类，又名麻鱼、赤尾鱼、标杆鱼、石鱼、土狗鱼、叉包等，属鲤形目鲤科鲃亚科白甲鱼属，主要分布于乌江、清水江、都柳江、锦江等水系，主要栖息于湍急、底质多砾石的江段。粗须白甲鱼肉因质细嫩、味美不腥、营养丰富而闻名。梵净山地处贵州省东北部江口、印江和松桃三县交界地带，是武陵山脉的主峰，同时也是乌江水系和沅江水系的分水岭，雨量充沛，地下水资源丰富，河流落差较大，上游水流湍急，水面狭窄，多险滩瀑布，水温较低；下游水流相对较为平缓，水面宽阔，水温较高，水域生境较为复杂，为粗须白甲鱼提供了良好的生活场所。但近年来，由于过度捕捞和人为干预导致环境改变，使粗须白甲鱼资源受到严重影响，分布范围逐年缩小，其种群数量日趋减少，在主要分布区水域难觅踪迹。因此，开展粗须白甲鱼人工繁殖试验，研究其规模化人工繁殖技术，为保护好这一野生资源及其产业化开发奠定基础。

1 材料与方法

1.1 亲鱼来源与暂养

粗须白甲鱼亲鱼2～3冬龄、体重120 g左右，于2019年从梵净山周边山溪中获得，在贵州东亿农业发展有限公司流水养殖池暂养1冬龄，暂养池水流3 m3/h。4月中旬进入繁殖准备期。饲喂人工配合饲料，每天早中晚各1次，每天饲喂量占鱼体重的3%。5月初水温稳定在18℃左右，挑选亲鱼暂养在不同池中，暂养2 d左右进行催产。

1.2 亲鱼催产

把亲鱼分为3组进行催产，每组雌鱼30尾、雄鱼20尾，雌鱼每尾催产程序及激素剂量见表1。胸鳍基部注射，剂量为每100 g体重每次0.2 mL，第1次注射后12 h注射第2针。雄鱼只注射第2针，剂量为雌鱼第2针的一半。

表1 粗须白甲鱼雌鱼催产程序及激素剂量

1.3 人工授精

1.3.1 精卵获取 亲鱼注射第2针后24～72 h，每12 h检查1次，及时把有发情现象的亲鱼捞出，放入装有曝气水的暂养盆中，用湿润毛巾包住头部和背面，裸出后腹部和泄殖孔，擦干泄殖孔周围和臀鳍的水分，由前向后轻轻挤压腹部获得精卵。

1.3.2 授精 采用干法授精，即将雄鱼精液直接挤入盛有鱼卵的盆中，用羽毛轻轻搅动混匀，再迅速加入水，每2 000枚卵加水2～3 mL，并不断摇动盆，然后在室温下静置至少1 min。最后将受精卵倒入孵化网箱或塑料盆中。

1.4 受精卵孵化

采用桶式孵化法，孵化36 h左右正常受精卵发育至原肠胚期，及时检出未受精卵或死胚(呈现不同透明的乳白色)，计算受精率。水温18℃下孵化96 h左右，胚胎破膜产出，计算孵化率。孵化36 h、48 h、72 h、84 h和96 h随机取胚胎至少300枚进行观察，计算孵化率。

受精率=[(总卵数-白卵数)/总卵数]×100%

总孵化率=[正常出膜仔鱼数/(出膜卵数+总白卵数)]×100%

2 结果与分析

2.1 催产效果

2.1.1 雌鱼 从表2看出，3组雌鱼的催产率差异较大，以第1组即二次同时注射绒毛膜促性腺激素(HCG)、促黄体素释放激素A2(LHRH-A2)和地欧酮(DOM)的催产效果较好，总催产率达60.0%；以第2组即二次同时注射HCG和LHRH-A2的催产效果次之，为43.3%；第3组即单独注射LHRH-A2的催产效果最差，为36.7%。3组中的最佳效应时间皆为48 h，催产率分别达42.3%、25.0%和21.5%。

表2 不同组粗须白甲鱼不同催产时间雌鱼的催产效果

2.1.2 雄鱼 3组催产雄鱼均能获得较好的精液。未催产的雄鱼也能获得大量精液，但未催产处理的雄鱼精液粘滞性高，部分个体的精液不易液化。

2.2 授精与孵化效果

经统计，粗须白甲鱼人工授精的平均受精率为62.7%。发育至原肠胚的受精卵在孵化桶中的孵化率较高，36～48 h的受精卵孵化率为93.0%，48～72 h为94.3%，72～84 h达95.8%，96 h的总孵化率为84.0%。

3 结论与讨论

研究结果表明，粗须白甲鱼可进行全人工繁殖，经人工催产、干法授精、孵化等，其催产率达60.0%，受精率达62.7%，孵化率达84.0%。

野生粗须白甲鱼未达到性成熟的雌雄鱼较难区分，经1个冬季人工驯养，进入繁殖前期(一般4月初)雄鱼表现出典型的第二性征，上下颌吻端各有一横列齿状追星；繁殖季节轻轻挤压腹部，泄殖孔会有乳白色精液流出。性腺发育良好的雌鱼腹部明显突出于体侧，表明可用于人工繁殖。但是栖息地差异或不同年龄个体的性腺发育程度可能有差别。本研究粗须白甲鱼的催产率仅42.3%，相对较低。因此，人工繁殖前有必要强化培育亲鱼，促使其性腺发育。粗须白甲鱼卵受精率平均为62.7%，相对较低。原因可能是粗须白甲鱼卵发育具有不同步性，催产后排出的卵成熟度不一致，部分卵不具备受精能力；亲鱼繁殖前雌雄混合培育模式影响卵巢的发育差异；也有可能是精液质量的问题，今后有待深入研究。