Bartha株疫苗在猪伪狂犬病阳性场的应用

张 军，许光勇

（北京养猪育种中心，北京 100194；北京中育种猪有限责任公司，北京 100194）

猪伪狂犬病是一种由伪狂犬 病 病 毒（pseudorabies virus，PRV）感染猪群，临床可见母猪流产，生长猪发热、腹泻、伴有神经症状和呼吸道症状等特征的传染性疾病。一旦猪群感染伪狂犬病病毒，可能导致其终身带毒，严重影响养殖场的生产性能，造成直接或间接的经济损失。gB抗体是PRV野毒和疫苗毒株均能产生的，鉴于当前市场上大部分PRV疫苗都是gE基因缺失，因此有无gE抗体可用于鉴别野毒和疫苗毒感染。此次试验首先根据仔猪的PRV gE和gB母源抗体消长来优化免疫方式，然后比较不同免疫方式的Bartha株疫苗对猪群的保护效果，以便为养殖场制定科学免疫程序提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 试验动物

两批未接种猪伪狂犬病疫苗的断奶仔猪共计100头，用于追踪仔猪母源抗体。

两批未接种猪伪狂犬病疫苗的断奶仔猪共计300头，用于比较不同免疫方式的免疫效果。

1.2 方法

选择两批共100头断奶仔猪，不免疫猪伪狂犬病疫苗的仔猪分别于 6、8、10、11、12、13、14 周龄采集血液。

选择两批共300头断奶仔猪，随机分为3组，其中A组不免疫猪伪狂犬病疫苗；B组6周龄首次免疫猪伪狂犬病Bartha K61株疫苗1头份，10周龄加免（原有的免疫方式）；C组9周龄首次免疫猪伪狂犬病疫苗Bartha K61株1头份，13周龄加免（优化后免疫方式）；各组分别于 6、10、13、16、19、22周龄采集血液。

采用ELISA法检测血清PRV gE和gB抗体。

1.3 结果判定

PRV gE抗体检测试剂盒，美国IDEXX公司；若S/N值大于0.70，gE抗体判定为阴性。

PRV gB抗体检测试剂盒，荷兰Biochek公司；若抗体滴度大于1 071，gB抗体判定为阳性。

2 结果与分析

2.1 母源抗体变化

100头用于追踪母源抗体变化的试验猪来自于两批断奶仔猪，分别于 6、8、10、11、12、13、14 周龄收集血液，最后筛选出60头试验猪的合格血清420份，其PRV gE和gB抗体结果见图1和2。

由图1和图2结果可知，生长猪PRV母源抗体在11周龄出现拐点，说明猪群在11周龄前后出现了PRV野毒感染。因此，最佳的首免日龄确定为9周龄。

2.2 Bartha株疫苗应用效果

300头用于评估免疫效果的试验猪来自于两批断奶仔猪，每批分为A、B和C组，每组中60头分别于 6、10、13、16、19、22周龄收集血液，最后筛选出180头试验猪的合格血清1 080份，其PRV gE和gB抗体结果见图3和图4。

由图3和图4结果可知，中大猪后期猪伪狂犬病gE抗体阳性率C组B组>A组，gB抗体阳性率处于98%以上水平，表明疫苗免疫能够迅速使猪群产生高水平的gB抗体。

3 讨论

2010—2011年国内部分猪场伪狂犬病开始转阳，母猪流产、死木弱数量增加、生长猪死淘率升高，短期内导致了一定的经济损失。相关研究报道也显示，PRV毒株确实发生了多个点位的突变，猪场间出现多个变异的新毒株[1-3]。为验证Bartha K61株疫苗对当前猪场流行的PRV新毒株是否具有保护作用，笔者对PR免疫方式进行了优化，结果表明，该试验猪场PRV感染时间点在11周龄前后，正是保育下床转至育成区这个阶段，由此说明该场感染点处于育成段。吴文福等研究表明，Bartha株疫苗免疫后4~5 d即可产生良好的免疫保护力[4]，参考仔猪PRV gE和gB母源抗体消长规律，重新优化了PR的免疫方式，将首免日龄调整为9周龄，4周后加免。比较了优化后的免疫方式（C组）与原先的免疫方式（B组）的效果，结果发现16周龄开始，gE抗体阳性率C组均低于B组，22周龄时相差6.66%，gE抗体S/N均值差异显著（P<0.05），由此可见优化后的免疫方式对控制PRV野毒感染转阳率更加有效。与对照组（A组）相比，C与B组gE抗体阳性率都较低，22周龄时gE抗体阳性率A组达93.33%，而C与B组仅为71.67%与78.33%；gB抗体滴度和阳性率C与B组都要高于A组，16周龄C与B组阳性率都达到100%，而A组仅为81.67%，由此可见，Bartha株疫苗对控制PRV感染仍具有良好效果，该结果与吴文福等报道的猪伪狂犬病活疫苗（Bartha株）对PRV流行毒株能够提供良好的免疫保护是相一致的[5]。

综上结果表明，Bartha株疫苗有助于控制PRV野毒感染猪群，参考母源抗体消长规律及PRV野毒感染时间点制定的免疫方式更加科学、有效。

4 结论

通过制定科学有效的免疫程序，Bartha株疫苗对现阶段流行的PRV毒株感染仍具有保护效果。