大组织切片技术在前列腺癌诊断中的应用

宋彦锟 罗 胜

福建医科大学附属第一医院病理科，福建省福州市 350005

前列腺癌是男性常见泌尿生殖系恶性肿瘤，术后病理检查是疾病诊断重要方法。但是，前列腺癌肿块常为多灶性，离体后外观形状与增生前列腺相似，加之术前内分泌治疗组织退变，辨认困难，因此，如何处理根治标本成为病理医师一项巨大挑战[1]。为判断手术切除癌灶干净与否，前列腺癌术后病理通常取材整个前列腺，但由于包埋盒规格等设备限制，常规标本处理需将前列腺分割成数十小组织块，会破坏标本完整性，不仅后期制片烦琐，也易造成拼接误差，影响阅片质量[2]。大组织切片技术是近年应用于临床的标本处理新技术，为大标本处理、病灶全面观察及综合评价提供了极大便利[3]。本文选取2018年1月—2020年1月我院126例前列腺癌根治患者，探讨大组织切片技术诊断前列腺癌的临床价值，报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 择取2018年1月—2020年1月我院收治126例前列腺癌患者，随机分为两组。两组基线资料比较，差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。见表1。

1.2 纳入与排除 纳入标准：术前穿刺活检、术后病理检查证实前列腺腺癌；初治病例，接受前列腺癌根治手术；患者签署知情同意书；临床及病理资料齐全；伦理委员会批准同意。排除标准：前列腺癌远端转移；既往前列腺手术史；根治术前行新辅助内分泌治疗；合并其他前列腺器质性病变。

表1 两组基线资料比较

1.3 方法

1.3.1 实验组(大组织切片病理检查)：手术获取新鲜、完整的前列腺标本，即刻送检病理科。标本置于取材台(精囊腺朝上，尖部尿道口面向医师)，以红黑颜色的特殊染料进行色标染色，标记前列腺左右两侧(左红右黑)。待自然吹干后，4%中性甲醛溶液固定12h以上。次日取出标本，以取材刀离断精囊腺，由前列腺尖部至基底部沿垂直尿道方向做冠状切面，切成厚度3～4mm的组织片，数量6～8块，依次标号，平铺于5cm×7cm大组织网状包埋盒内，以镂空板条固定，再次置于甲醛溶液中固定12h以上，使标本中央组织充分固定。次日取出标本，乙醇梯度脱水，二甲苯透明，高密度石蜡浸渍，操作于全封闭组织脱水机中自动进行，试剂温度45℃，石蜡温度65℃。采用二次包埋法将组织片制成大蜡块，一般切片与精囊腺最大切面包埋，前列腺尖部和底部切缘垂直包埋。常规整修蜡块并镶装，石蜡大组织切片机连续匀速平推切片，切片厚度5μm。切片置于定制的大规格载玻片上，常规漂洗、HE染色、封片后，行数字病理扫描。

1.3.2 对照组(常规组织切片病理检查)：手术获取新鲜、完整的前列腺标本，即刻送检病理科。标本切片前常规处理同实验组，甲醛溶液充分固定后，离断精囊腺，切取前列腺尖部和底部，切取厚度2～3mm，余体部左右侧分开，依次切成体积不超过15mm×10mm×5mm的组织块，数量40～60块。取前列腺尖部和底部切缘、精囊腺、输尿管以及穿刺定位的病灶组织块，依次标号，置于普通包埋盒内，同实验组方法对包埋组织块进行连续切片，切片置于一般规格载玻片上，同法处理后行数字病理扫描。

1.4 观察指标与评价标准 比较观察两组病理诊断结果，统计切缘阳性率、微小病灶检出率、原发肿瘤病理分期、精囊侵犯率、局域淋巴结转移率、术后GS评分升高者占比。肿瘤分期参照AJCC 2002版标准[4]。前列腺癌GS评分标准[5]：依据肿瘤分化程度将前列腺癌分为1(分化好，恶性程度低)～5(分化差，恶性程度高)级，分别记1～5分，将所占比例最高的癌灶分化分数作为主要结构评分，与次要结构评分相加作为总分，单一分化时分数重叠相加，三种及以上分化时，将占比小但评分为最高级别的肿瘤分化分数作为次要结构评分，评分范围2～10分，8分级以上为高危。

2 结果

实验组标本切缘阳性率高于对照组，微小病灶检出率高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)，组间精囊侵犯率、淋巴结转移率、术后GS升高占比无统计学差异(P>0.05)，见表2。两组TNM病理分期无统计学差异(P>0.05)，见表3。

表2 两组病理诊断结果比较[n(%)]

表3 两组TNM病理分期比较[n(%)]

3 讨论

传统前列腺癌根治标本病理检查，需将前列腺切成细碎小块，依据前列腺大小一般为40～60块，甚至更多[6]。此法临床处理十分烦琐，技术员制片与病理医师阅片工作量大，而且前列腺完整性遭破坏严重，小切片拼接易产生误差，增加了观察难度，不利于病理医师全面细致评价，影响诊断质量[7]。

大组织切片技术可以获得与常规组织切片技术相当的制片质量，研究证实厚度与染色均理想[8]。但与常规组织切片相比，大组织切片，制片数量减少，可以减少制片与阅片的工作量，从而提高病理诊断工作效率，更具实用价值[9]，而且单个切片切面积增大，相对保证了标本完整性，病理医师可于镜下直观观察标本横断全貌，便于准确定位空间分布，明确前列腺组织结构与细胞学特征，发现微小病灶，精确病理诊断，以及与术前诊断进行对照等，从而提高诊断效果[9]。对于前列腺癌患者而言，即使是行根治手术，患者术后仍有复发的风险和可能，其主要原因在于，术前检测前列腺癌浸润程度及有无转移，主要依靠影像学技术与穿刺活检，灵敏度均有限，据此术前判断没有转移的前列腺癌，可能已经出现了微转移。以大组织切片技术观察前列腺标本尖部与底部切缘等处，明确有无包膜外侵犯、精囊外侵犯等，镜下影像更完整、更全面，可以有效避免稀碎组织切片拼接影响微小病灶观察与检出，从而更准确地判断手术切除后有无癌灶残留，为指导后续治疗提供更有价值的依据。

本文结果显示，实验组标本切缘阳性率、微小病灶检出率均高于对照组，与文献报道大组织切片技术处理后前列腺标本的切缘阳性率46.7%、微小病灶率36.7%相符[10-11]，肯定了大组织切片技术用于前列腺癌临床诊断的价值与优势。另有学者比较观察病理大切片与常规切片诊断前列腺癌，结果显示前者精囊侵犯阳性检出率(26.2%)高于后者(17.6%)[12]，与本文实验组精囊侵犯阳性率(22.22%)与对照组(20.63%)相当的研究结论不一致，考虑可能为术前穿刺活检无法明确精囊累及情况，两个实验纳入病例个体存在差异。

综上所述，采用大组织切片技术进行前列腺癌病理诊断，便于全面细致病理观察，可以提高切缘阳性与微小病灶检出率，精确病理诊断，为临床诊治提供更有价值的依据，值得推广使用。