宋忠旭 ,李良华,赵海忠,彭先文,孙 华,胡 华,梅书棋*
(湖北省农业科学院畜牧兽医研究所,湖北 武汉 430064)
非洲猪瘟是养猪业的头号杀手,被世界动物卫生组织列为法定报告疫病,在我国列为需要采取严格控制和扑灭措施的一类传染病[1]。发生非洲猪瘟的猪场,经过严格、彻底清洗消毒和必要准备后再次养猪的行为,即再次恢复养猪生产,就是非洲猪瘟背景下复养。湖北省农业科学院畜牧兽医研究所养猪团队对某猪场在非洲猪瘟背景下复养消毒环节进行技术服务,现将消毒、检测、哨兵猪设立等相关情况介绍如下,供养猪场(户)参考。
某猪场,19栋全封闭式猪舍,另有1栋为半开放式隔离舍,年出栏“长•大”种猪和商品猪合计8 000头左右,2019年5月初发病,“拔牙”行动到6月底,笔者团队7月开始指导消毒。
一旦非洲猪瘟病毒感染猪存活下来,带毒猪就会变成该病重要的传染源,所以复养的首要步骤是清群。非洲猪瘟病毒在死猪尸体、冻鲜肉中存活时间较长[2],清理死猪冷库、存肉冰柜应先期进行,以缩短消毒后的空置时间。
水源检测、消毒药(烧碱、戊二醛、生石灰、过硫酸氢钾)、冲洗设备、浸泡设备、人员防护装备。
全覆盖喷雾消毒多次,每次消毒时每平方米使用消毒液300 ml以上,消毒液和消毒对象的作用时间要达到0.5 h以上,全覆盖喷雾消毒完成后进行驱鸟、驱猫、灭鼠、灭虫、灭蚊蝇,再按照猪舍、生产区、生活区、粪污处理区、场区外围的顺序,由内及外,分区进行消毒。
设立垃圾无害化处理区域,对清理出的垃圾严格消毒,按照可燃烧和不可燃烧进行分类处置。
关闭猪舍门窗,封闭湿帘、换气设备和排污通道,按每立方米用32 ml福尔马林、16 g高锰酸钾密闭熏蒸,2 d后打开风机换气。去除粪便等有机物质,清理杂物到垃圾无害化处理区,木质物品、一次性用品等低值易耗材料焚烧处理;松动漏粪板等物件间隙,关闭电源,穿戴安全防护装备,按照从上到下的顺序,吊顶、墙壁上部、门窗用清水充分浸泡,用泡沫剂分解,用水枪冲洗干净;墙壁下部、漏粪板、床架、地面、可拆卸物品、可移动用具等用1%~2%烧碱喷雾、浸泡45 min左右,用中压水枪冲洗[3];干燥后从上到下用戊二醛液对舍内进行喷雾消毒(含湿帘等),对防水性能差的设备等用戊二醛液进行擦拭,再次干燥、通风后进行维修和设备保养,再用戊二醛液全面消毒,干燥后20%生石灰乳对墙壁、地面等进行涂刷,再次密闭熏蒸,封栋。
水泥硬化地面打扫后用2%烧碱喷雾消毒,泥土地面喷洒除草剂、清理粪便等污物、除渣后,再铲除上面约5 cm的一层泥土,用2%~3%烧碱喷雾消毒,渗透入地约20 cm;排污沟用3%烧碱液(pH 12以上)浸泡12 h后排空,清理粪污,2%~3%烧碱冲洗沟壁和沟底;兽药、器械等用戊二醛溶液浸泡消毒、冲洗干净后集中到辅助生产的房间(兽医室、物品库等)晾干,按每立方米空间用福尔马林32 ml、高锰酸钾16 g进行熏蒸消毒。
过硫酸氢钾复合物具有很强的氧化性,溶解后产生各种高能量、高活性的小分子自由基、活性氧等衍生物,破坏微生物细胞膜的通透性,干扰病原微生物DNA和 RNA 合成,从而将其杀灭[4];其pH 2.2~2.6,具有强酸性,可以杀灭各种病原微生物,并不受有机物影响,其代谢产物不会对人、动物和环境带来影响[5];兼顾了氯制剂、酸制剂、氧化剂三重功效,而且具有持续的循环链式反应,有效消毒作用时间长。生活区杂物清理后,门窗把手、电源开关、水龙头等物品用过硫酸氢钾溶液擦拭,地面等部位用过硫酸氢钾溶液喷雾消毒,宿舍内个人物品采用过硫酸氢钾浸泡30 min、清洗、烘干方式消毒,房间密闭后用紫外线和臭氧器消毒,办公物品、纸质类文件在烘箱内65 ℃烘干1 h。
按污水总量的10%~20%加入生石灰对污水进行消毒,粪污无害化发酵消毒后资源化利用,粪污池用2%烧碱与20%石灰乳制成的碱石灰混悬液消毒。掩埋死猪的地方及周边5 m范围喷洒碱石灰混悬液,渗透入地10 cm左右,并在边缘设置警示牌;死猪冷库、饲料仓库等用戊二醛液消毒后再用臭氧消毒,晴天时场区外围用2%烧碱喷雾消毒。
以区块为单位,进行全覆盖采样,相同部位的4~5个样签混合为1个样品;每栋猪舍内采集墙面或窗台、地面、粪沟、其他部位(如死角、设备、料线等),生产区每栋猪舍外采集排污沟出口、舍间地面、土壤;其他区域随机采样。
全覆盖喷雾消毒后进行第一次采样检测,各栋舍与各区域整理、清洗、消毒完成后进行第二次采样检测;检测出现阳性样品的栋舍、区域重新消毒后再次采样检测;检测全阴性的栋舍、区域换人采样复检,以增加准确性,两次检测均阴性的栋舍、区域逐一封栋(封闭),阳性栋舍和区域消毒再检、复检,直至全部为阴性。
11月中旬,引入猪瘟、猪伪狂犬病和猪蓝耳病阴性,唾液和血浆荧光定量PCR检测结果为非洲猪瘟病原阴性,血清检测结果为非洲猪瘟抗体阴性的保育仔猪180头作为哨兵猪,分散于不同猪舍,进行饲养管理,密切观察猪群状况,按20%采样比例每10 d进行1次非洲猪瘟病原抽样检测,结果为阴性,期间死亡的4头猪采集腹股沟淋巴结检测结果非洲猪瘟病原也为阴性,2020年1月中旬全群进行病原学和血清学检测,结果为阴性,复养初步成功。该批哨兵猪继续饲养,受新冠病毒肺炎疫情影响,检测受限,但猪只状况良好,其他猪只的再次引入暂缓。
1)康复猪能保持高抗体水平和长时间的病毒血症,而且病毒能在组织中存活数周甚至数月,所以复养的首要步骤是清群;为了避免交叉污染,消毒前应灭害和检测水源,消毒过程中和效果评价采样时应按照防污染程序进行。
2)非洲猪瘟病毒为双层囊膜的DNA病毒,对去污剂、氧化剂敏感,强酸强碱可将其灭活[6]。生活区主要运用过硫酸氢钾、紫外线和臭氧消毒;猪舍内消毒时,先密闭熏蒸,降低二次污染的几率,随后程序为清理、浸泡、去污、干燥、戊二醛消毒、干燥、维修维护、戊二醛消毒、干燥、石灰乳、干燥、密闭熏蒸,逐栋进行;生产区、粪污处理区和场区外围主要运用烧碱消毒,烧碱等碱类的特点是廉价、渗透能力强,具有膨胀、去污作用,可以快速渗入有机物,并且稳定,从而杀灭细菌、病毒、虫卵,所以本次在舍外和舍内耐腐蚀部位使用较多,待其发挥消毒、膨胀作用后及时对舍内使用部位进行清洗。消毒是否成功取决于是否彻底的清洁以及干燥程序、足够的干燥时间[3],还需要配合密闭熏蒸。了解非洲猪瘟病原特性,掌握对非洲猪瘟病毒有效的消毒剂优缺点,正确、合理运用各种消毒方式,杜绝费时费力的无效功[6]。
3)消毒效果需运用检测结果进行评价。以区块为单位,进行全覆盖采样,检测结果为阴性处所,复检仍然为阴性则封栋(封闭),检测有阳性样品的处所重新消毒后再次检测、复检,直至全部阴性。设备、死角是检测结果为阳性的主要处所,熏蒸时准确计算空间大小、完善密闭性,可以减少重新消毒的次数,提高消毒的效率。
4)采集唾液和血浆进行病原检测,采集血清进行抗体检测,即非洲猪瘟病原学和血清学检测结果是阴性的保育仔猪方可作为哨兵猪,每10 d进行1次抽样检测病原,以减少采样时应激,对病、死猪必检测。哨兵猪饲养2个多月,病原学和血清学检测结果均为阴性,复养初步成功。