气相色谱法检测红枣内联苯菊酯农药残留

牛立航 杨欢欢 王瑾峰

红枣作为一类药食同源的物质，果实中富含多种营养物质，深受广大消费者的喜欢。但是随着红枣栽培面积的不断扩大，为了提高红枣的产量与质量，常常需要使用化学药剂，这些化学药剂在杀死病虫害的同时，也引发了农药残留的问题，消费者若食用农药残留超标的红枣，将会威胁身体健康。

在红枣的残留农药中，联苯菊酯是一种较常见的农药。联苯菊酯又被叫作氟氯菊酯，俗称天王星，属于新型拟除虫菊类农用杀虫剂，具有高效、广谱的特征，但是具备一定的毒性。根据我国最新的标准GB2763-2014，食品中联苯菊酯的农药残留量应低于5mg/kg。当前实验室检测联苯菊酯农药的方法有高效液相色谱法、气相色谱法、高效薄层色谱法等等，其中以气相色谱法最为常见。接下来本文就气相色谱法检测红枣中联苯菊酯农药残留的结果总结如下。

一、仪器和材料选择

1.仪器。美国瓦里安公司提供的VARIAN450气相色谱仪、检测器、电子秤、氮吹仪、旋转蒸发仪、烧杯、速组织匀浆机、固相萃取装置、捣碎器、Florisil固相萃取小柱、CARB/NH2柱（生产商：杭州福裕科技服务有限公司）。

2.试剂与材料。试剂：无水硫酸钠（将其置于温度高达400℃的环境下持续烧灼4h后再储存在干燥器内）、蒸馏水、二氯甲烷、乙酸乙酯、正己烷、甲醇（分别用作分析纯与色谱纯）、农夫山泉瓶装矿泉水。材料：采自本地的红枣，在常温下阴干制成干果，然后置于零下18℃的环境下冷冻24h，取出粉碎后置入具塞聚乙烯瓶内，放在零下18℃的环境下冷冻保存。

3.色谱条件。色谱条件选用DB-1701的色谱柱（其规格如下：30m×0.32mm×0.25um），设置好相关的温度，其中进样口与检测器温度分别为260℃、300℃，在程序升温下，将初始温度设置为180℃，保持10min后按照每分钟5℃的速度升温至270℃，保持10min;選择纯度超过99.99%的氮气作为载气，恒流速度控制在每分钟1.3mL，分流比为10∶1，进样量控制在1μL。

4.实验方法。（1）样品制备。称取上述经过处理后的红枣样品30g加入至容量为100mL的烧杯内，再加入20mL蒸馏水，振荡使其均匀，再加入乙腈60mL，借助高速组织匀浆机实施匀浆操作，时间控制在1min，超声提取3min。操作完毕后进行过滤，收集过滤液，用滴管吸取30mL的乙腈滤液，在无水硫酸钠的作用下将其干燥，使其浓缩至近干。

（2）样品净化处理。①CARB/NH2柱第一次净化。分别将丙酮与二氯甲烷两种试剂按照1∶1的比例均匀混合后对CARB/NH2柱予以活化操作，完成活化后再用3mL丙酮与二氯甲烷的混合液前后分三次洗涤浓缩处理后的红枣样品，将获得的洗涤液分别吸入CARB/NH2柱，直到洗涤液的液面达到柱表面为止。接下来再加入12mL的淋洗液，用50mL的平底烧瓶收集淋洗液，浓缩近干，用2mL的正己烷进行溶解。②弗罗里硅土柱第二次净化。先取弗罗里硅土柱，在其上层加入无水硫酸钠1.0g，然后先使用正己烷5mL淋洗，再加入上述用2mL正己烷溶解的浓缩液过柱，先使用浓度为5%的二氯甲烷5mL实施除杂操作，然后用浓度为10%的乙酸乙酯的正己烷10mL洗脱，将洗脱液置于40℃氮气中吹干，然后再加入2mL正己烷进行溶解，最后将其移入2mL自动进样器样品瓶内，实施气相色谱检测。

（3）测定。在特定的条件下，当仪器处于稳定状态时，用微量进样器抽取1μL标准溶液进行进样。

二、实验结果

1.绘制标准曲线。分别选取体积不同的上述10μg/mL的联苯菊酯标准储备液，加入正己烷稀释配置成一系列溶液，设置五个不同的浓度，分别是0.05μg/mL、0.1μg/mL、0.3μg/mL、0.5μg/ml、1.0μg/mL，分别将其移入2mL自动进样器品瓶内，按照1.3的色谱条件，用横坐标表示联苯菊酯的含量，用纵坐标表示峰面积，最终将其标准曲线绘制出来（如图1所示）。根据该曲线得出联苯菊酯浓度（x）与峰面积（y）二者线性回归方程：y=2.24×106x+2.79×104，相关系数为R2=0.9950。

图1：联苯菊酯的标准曲线

2.加标回收试验。应用标样添加的手段，将一定量的标准品加入至已知含量的样品中，按照上述1.4的实验方法分别制备出3份浓度不同的样品溶液，再按照1.3的色谱条件，对加标回收率进行计算，结果得出：1号样品中的联苯菊酯含量为0.0345μg，加标量为0.300μg，样本中联苯菊酯的总量为0.3135μg，加标回收率为93.72%;2号样品中的联苯菊酯含量为0.0332μg，加标量为0.300μg，样本中联苯菊酯的总量为0.3098μg，加标回收率为92.98%;3号样品中的联苯菊酯含量为0.0321μg，加标量为0.300μg，样本中联苯菊酯的总量为0.3012μg，加标回收率为90.70%，经计算3份样品的平均加标回收率为92.47%，RSD为1.70%。

3.样品测定。根据上述1.4的实验方法分别配置3份样品溶液，配置好后再以1.3的色谱方法开展测定，最终根据公式计算出红枣样品内的联苯菊酯，获得结果见图2所示，联苯菊酯标准品与红枣样品色谱图如图2与图3所示。

三、讨论

有机磷与拟除虫菊酯农药属于有机污染物，具有持久性特征，能够经食物链逐步传递至人体体内，危害人类的身体健康。特别是近年来，随着人们食品安全意识的不断提高，以及国家越来越重视农药中的化学残留，对食品中农药残留量的限制要求越来越严。按照国家农业标准NY761，uECD检测作为有机氯拟除虫菊酯农药残留检测的重要仪器，在确保农产品质量方面发挥着重要作用。在本文中，采用气相色谱法对红枣中的联苯菊酯开展检查，结果显示本次实验样品中的联苯菊酯含量为0.0022μg/g，RSD为3.55%，按照国际现有的农药残留检测行业执行的相关标准，结果显示残留的联苯菊酯含量未超标，符合要求。在本文中，分别实施CARB/NH2柱第一次净化与弗罗里硅土柱第二次净化对红枣粗提取液实施固相萃取，在经过分离、纯化、富集以后，结果得出样品的加标回收率为92.47%，RSD为1.70%，可见将气相色谱法应用在红枣联苯菊酯检测中具有较高的准确度，检测结果可靠。

通过本文的实验得出，将气相色谱法应用在红枣联苯菊酯农药残留的检测中，利用气相色谱法较高的灵敏度、检测限以及回收率，能够准确地检测出红枣内的联苯菊酯是否超标，同时该检测方法还可以运用在其他农作物的联苯菊酯残留量的检测，可以有效避免农药残留超标食品的存在，在保障消费者食品安全方面发挥着重要作用。