秋末蜜蜂病毒病混合感染诊断实例

王海洲 郭兴启 赵光栋 王丽君 候俊斌 郭得政 郭慧娟 单文璐 │文

1 山东日照市畜牧兽医管理服务中心，276800；2 山东农业大学，泰安271000

2020年10 月初，山东省日照市莒县寨里河镇、龙山镇、店子集街道、峤山镇等乡镇蜂农报告蜂群死亡严重，请求山东省蜂产业创新团队进行病因鉴定，经团队成员出诊获得的临床症状和剖检特征并结合实验室检测结果，诊断为蜜蜂病毒性疾病混合感染，现报告如下：

一、发病情况

发病蜂场多为经营多年的意大利蜜蜂蜂场，于9月10日左右开始出现蜜蜂大量死亡现象，10月1日大面积爆发，多者20多箱，少者10多箱出现整群死亡（图1），该地蜂农虽有多年饲养经验，但缺乏良好的蜂病防疫体系，受传统饲养习惯的影响，普遍治螨不彻底，往年是偶尔出现蜜蜂死亡现象，未见2020年如此严重情况。

图1 发病蜂群

二、临床观察

死亡病蜂一般在上午9～12时爬出蜂箱1.5m左右，不久死亡，尸体干瘪、蜷缩。蜂脾幼虫不封盖，死亡幼虫出现白头现象，皮状无味，有的呈白浆状。死亡蜜蜂肠道内有积粪，直肠内有气泡，蜜囊内有积水，无甜味，味涩。饲喂苏打片、食母生、抗生素等药物无效。

三、初步诊断

2020年10月10 日，山东省蜂产业创新团队环境与病虫害岗位专家郭兴启教授一行在调查莒县店子集街道大塘坊村蜂农张师傅和西屋楼村徐师傅蜂场发病蜂群，详细了解蜂场发病情况，采集发病蜂群蜜蜂样品（图2），初步判定蜜蜂大量死亡原因为蜂群秋季治螨不彻底，饲养管理不善（秋季气温突降），引发蜜蜂病毒性疾病所致。

图2 采集发病蜂群样品

四、诊断及结果

分别采集日照市莒县店子集镇大塘坊村张师傅蜂场的蜜蜂和西屋楼村徐师傅蜂场的蜜蜂。2020年10月12～13日，分别检测克什米尔病毒、慢性麻痹病毒、以色列急性麻痹病毒、欧洲幼虫腐臭病病原、残翅病毒和囊状幼虫病病毒。检测结果见表1和图3所示。分析发现，在死蜂中可检测到以色列急性麻痹病毒、克什米尔病毒、残翅病毒以及欧洲幼虫腐臭病病原4种常见侵染蜜蜂的病原物，这4种蜜蜂病原物在蜜蜂体内的含量有差别。

表1 日照市莒县蜂场蜜蜂病原物检测结果

图3 病原物检测电泳结果

五、防治建议

2004年，以色列希伯来大学的病毒学家赛拉发现以色列急性麻痹病毒，感染此病毒的蜂群出现蜂群衰竭失调现象[1]。克什米尔病毒经口传播给幼虫[2]，感染个体产生潜伏性感染成虫，病毒通常与疾病症状不相关，但与其他寄生物病原可能诱导的疾病状态相关。蜜蜂残翅病是近年来新发现的一种蜜蜂病毒病，在山东省各地蜂场均有分布，表现为病蜂出房时翅残缺，失去飞翔能力。欧洲幼虫腐臭病的致病菌是蜂房蜜蜂球菌，其余为次生菌，如蜂房芽孢杆菌、变异型蜜蜂链球菌等，欧洲幼虫腐臭病发生的先决条件是群势弱，蜂巢过于松散，保温不好，饲料不足，致病菌快速繁殖，促成疾病的爆发，而强群幼虫营养状况较好，发病较轻。建议防治方法如下：

1.及时清理病死蜂

收集病蜂及死蜂进行焚烧或深埋，防止病害进一步扩散。

2.隔离与消毒

将发病蜂群选择远离健康蜂群（2km以外）、不容易散播病原体、消毒处理方便的地方进行隔离治疗。被病蜂群污染的蜂箱、蜂具、工作人员的衣物和蜂场的环境选用合适的消毒药进行彻底消毒。蜂箱可用1%～2%氢氧化钠水溶液消毒，空脾用4%的甲醛溶液进行密闭消毒。

3.加强保温，及时补充优质饲料

加强蜂群的保暖及补充饲喂工作，当蜂群饲料不足时，要及时补充营养物质（花粉、维生素等）以保证蜂群正常生活需要，提高蜜蜂的抗病能力。

4.药物防治

（1）用10g蜂胶浸泡于40ml 95%酒精中，6天后过滤去渣，再加入100ml 50℃热水中，过滤。将巢脾脱蜂后喷脾，每脾50ml，每天1次，7次为一个疗程。

（2）使用升华硫。升华硫对病蜂有驱杀作用，患病蜂群每群每次用10g升华硫，撒在蜂路、框梁或箱底，能够有效控制麻痹病的发展。

（3）针对大肚型为主的病群，用药的同时结合饲喂大黄苏打片，促进蜜蜂的排泄。用法是每群蜂2～3片，喷喂结合，3天1次，4次为一个疗程。

（4）中草药。一些中草药对病毒病有一定的疗效，如半枝莲（30g）、甘草（8g）、金银花（30g）等，加适量水煎煮后过滤，滤液添加到蜜蜂饲料中喂蜂。

六、讨论

通过对典型发病蜂场的出诊，结合向蜂农详细了解蜂场发病情况，当地蜂农秋季扣王断子治螨不彻底，普遍采用扣王15～16天就放王产子，没有等蜂房中的幼虫化蛹成蜂出尽后，彻底杀死巢内螨虫，再放王产子，造成蜂群螨害严重，秋季蜜源匮乏，蜂群饲喂不足，饲养管理不善，盗蜂严重，蜂群中存在的蜜蜂残翅病毒可在狄斯瓦螨体内大量复制，继而进一步传播，狄斯瓦螨的刺吸行为使病毒粒子跨越寄主的生理屏障而直接进入蜜蜂血淋巴，狄斯瓦螨的寄生促使蜜蜂残翅病毒的高毒力毒株在蜂群中优势扩增和盛行，狄斯瓦螨影响蜜蜂个体发育与免疫系统等生理机能，以致降低了蜂群对病毒的抵抗力，从而造成以色列急性麻痹病毒、克什米尔病毒、残翅病毒等多种病毒同时感染蜜蜂，集中爆发，造成较大损失[3]。蜂农养蜂要更新养殖理念，治螨要彻底，要饲养强群，搞好蜂场环境卫生，在蜜源匮乏的季节，要及时进行饲喂，避免盗蜂的发生，从而提高蜂群的抗病能力。