血清miR-210和miR-375在子宫颈癌早期诊断与术后监测的应用研究

周清 张瑜 　庄执文 王清

【摘要】 目的：分析血清微小RNA-210（miR-210）和miR-375在子宮颈癌早期诊断与术后监测的应用效果。方法：选择2019年1月-2020年7月本院收治的30例子宫颈癌患者为子宫颈癌组;20例宫颈上皮内瘤变患者为宫颈上皮瘤变组;20例健康者为健康对照组。所有入选者均检测肿瘤标志物水平，记录三组血清miR-210、miR-375、SCC水平以及在子宫颈癌患者手术前后中的表达变化情况，分析其在子宫颈癌早期诊断和术后监测的临床意义。结果：子宫颈癌组的miR-210、SCC均高于宫颈上皮内瘤变组和健康对照组，miR-375低于宫颈上皮内瘤变组和健康对照组，且宫颈上皮内瘤变组的miR-210、SCC均高于健康对照组，miR-375低于健康对照组，差异均有统计学意义（P<0.05）。术后3个月，子宫颈癌患者miR-210、SCC均低于术前，miR-375高于术前，差异均有统计学意义（P<0.05）。ROC曲线结果显示，血清miR-210、miR-375、SCC单独与联合用于诊断子宫颈癌的曲线下面积分别为：0.710、0.816、0.811、0.843，具有一定的诊断性能。结论：子宫颈癌早期诊断与术后监测中miR-210、miR-375、SCC具有重要意义，联合诊断应用价值较高，能够反映患者病情。

【关键词】 子宫颈癌 miR-210 miR-375 肿瘤标志物

Application of Serum miR-210 and miR-375 in Early Diagnosis and Postoperative Monitoring of Cervical Cancer/ZHOU Qing， ZHANG Yu， ZHUANG Zhiwen， WANG Qing. //Medical Innovation of China， 2021， 18（34）： -145

[Abstract] Objective： To analyze the effect of serum microRNA-210 （miR-210） and miR-375 in the early diagnosis and postoperative monitoring of cervical cancer. Method： A total of 30 patients with cervical cancer admitted to our hospital from January 2019 to July 2020 were selected as cervical cancer group; 20 patients with cervical intraepithelial neoplasia were included in the cervical intraepithelial neoplasia group; 20 healthy subjects were selected as the healthy control group. The levels of tumor markers were detected in all the selected patients， and the levels of miR-210， miR-375 and SCC in serum of the three groups were recorded， as well as the expression changes in cervical cancer patients before and after surgery， and their clinical significance in the early diagnosis and postoperative monitoring of cervical cancer was analyzed. Result： The miR-210 and SCC of the cervical cancer group were higher than those of the cervical intraepithelial neoplasia group and healthy control group， and the miR-375 was lower than that of the cervical intraepithelial neoplasia group and healthy control group， and the miR-210 and SCC of the cervical intraepithelial neoplasia group were higher than those of the healthy control group， miR-375 was lower than the healthy control group， the differences were statistically significant （P<0.05）. 3 months after surgery， miR-210 and SCC of cervical cancer patients were lower than those before surgery， and miR-375 was higher than that before surgery， the differences were statistically significant （P<0.05）. The ROC curve results showed that the areas under the curve of serum miR-210， miR-375 and SCC for the diagnosis of cervical cancer alone and in combination were 0.710， 0.816， 0.811 and 0.843， respectively， showing certain diagnostic performance. Conclusion： miR-210，

miR-375， and SCC are of great significance in the early diagnosis and postoperative monitoring of cervical cancer， the sensitivity， specificity， and specificity of combined diagnosis are all high， which can reflect the patient’s condition.

[Key words] Cervical cancer miR-210 miR-375 Tumor markers

First-author’s address： Central Laboratory of Jiujiang Maternal and Child Health Hospital， Jiujiang 332000， China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2021.34.034

子宫颈癌为临床常见恶性肿瘤，发病率较高，随着女性生活工作压力增加，该疾病逐渐呈现年轻化，对女性健康造成较大威胁，尽早确诊、及时治疗是改善子宫颈癌患者预后的关键[1]。临床通过检测肿瘤标志物以预测癌症，正常人体中，肿瘤标志物含量极低，且水平相对稳定，当患者出现肿瘤病变后，肿瘤标志物水平也会出现异常改变，寻找用于子宫颈癌早期诊断、术后监测的标志物尤为重要[2]。微小RNA（miRNA）是一类长度约为22 nt的非编码小分子单链RNA，在机体多种生理、病理中均有参与，能够调控靶基因与信号通路，在肿瘤发生、发展中起到重要作用[3]。miRNA在各种体液中均有存在，尤其在血清中广泛存在且较为稳定，为肿瘤早期诊断与监测提供新的方向。miR-210、miR-375在子宫颈癌患者血清中均出现异常表达，可作为新型肿瘤标志物，但在子宫颈癌早期诊断、术后监测中的应用价值尚存在一定争议[4-5]。鉴于此，本研究进一步分析血清miR-210和miR-375在子宫颈癌早期诊断与术后监测的应用效果，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2019年1月-2020年7月本院收治的30例子宫颈癌患者为子宫颈癌组，选择同期来本院治疗的20例宫颈上皮内瘤变患者为宫颈上皮内瘤变组，另外选择同期来本院进行体检的20例健康者作为健康对照组。（1）纳入标准：①除健康对照组外，均经组织病理学或细胞学确诊;②预计生存期≥3个月;③健康者与宫颈上皮内瘤变患者年龄25～60岁。（2）排除标准：①合并重要脏器功能衰竭;②处于妊娠期、哺乳期;③合并其他恶性肿瘤;④合并其他可能影响血清肿瘤标志物的疾病;⑤合并认知障碍或精神疾病。（3）剔除或脱落标准：①自身原因无法进行研究;②参加其他研究，影响本研究结果;③死亡、无法随访。本研究经医学伦理委员会同意，入组人员均签署知情同意书。

1.2 方法 所有入选者均检测肿瘤标志物水平，子宫頸癌患者进行子宫颈癌根治术，且分别于术前、术后3个月检测，取入选者5 mL静脉血，3 000 r/min离心，时间以5 min为宜，取上清液，-80 ℃保存待测。血清miR-210、miR-375检测：使用实时荧光定量PCR检测，总miRNA提取使用miRNA提取试剂盒，翻录合成cDNA，计算目的基因的相对表达量采用2-ΔΔCt法。引物设计，miR-210逆转录引物：GTCGTATCCAGTGCAGGGTCCGAGGTATTCGCACTGGATACGACGACGAAACCCA，上游引物：ATGGTTCGTGGGAGCTACATTGTCTGCT;miR-375逆转录引物：GTCGTATCCAGTGCAGGGTCCGAGGTATTCGCACTGGATCCTGGAACGGCGATGA，上游引物：ATGGTTCGTGGGTTTGTTCGTTCGGCTCG。鳞状细胞癌抗原（SCC）检测：取血清使用BIOBASE 2000全自动酶联免疫分析仪测定，检测方法为酶联免疫吸附法。

1.3 观察指标 记录血清miR-210、miR-375、SCC在子宫颈癌患者手术前后中的表达变化情况。分析其在子宫颈癌早期诊断和术后监测的临床意义，并计算敏感度、特异度。

1.4 统计学处理 采用SPSS 20.0统计分析软件，计量资料用（x±s）表示，比较采用t检验;计数资料以率（%）表示，比较采用字2检验;绘制ROC曲线并计算曲线下面积（AUC）值，AUC值>0.9表示诊断性能较高，0.71～0.90表示有一定的诊断性，0.5～0.7表示诊断性能较差。以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 三组一般资料比较

子宫颈癌组年龄34～72岁，平均（45.37±6.45）岁;体重42～76 kg，平均（59.38±3.61）kg;国际妇产科协会（FIGO）分期：Ⅰ期8例，Ⅱ期9例，Ⅲ期8例，Ⅳ期5例;组织分化程度：低分化13例，高分化17例;类型：腺癌14例，鳞癌16例。宫颈上皮内瘤变组年龄25～60岁，平均（42.96±5.76）岁;体重42～74 kg，平均（60.04±3.14）kg。健康对照组年龄25～60岁，平均（43.58±5.64）岁;体重42～73 kg，平均（59.64±3.37）kg。三组一般资料比较，差异均无统计学意义（P>0.05），具有可比性。

2.2 三组肿瘤标志物水平比较 子宫颈癌组的miR-210、SCC均高于宫颈上皮内瘤变组和健康对照组，miR-375低于宫颈上皮内瘤变组和健康对照组，且宫颈上皮内瘤变组的miR-210、SCC均高于健康对照组，miR-375低于健康对照组，差异均有统计学意义（P<0.05）。见表1。

2.3 子宫颈癌患者术前、术后肿瘤标志物变化比较

术后3个月，子宫颈癌患者miR-210、SCC均低于术前，miR-375高于术前，差异均有统计学意义（P<0.05）。见表2。

2.4 肿瘤标志物对子宫颈癌早期诊断价值分析

绘制ROC曲线结果显示，血清miR-210、miR-375、SCC单独与联合用于诊断子宫颈癌的曲线下面积分别为：0.710、0.816、0.811、0.843，具有一定的诊断性能。见图1、表3。

3 讨论

子宫颈癌发病早期缺乏特异性表现，随着病情发展，患者会出现阴道异常流血，对患者健康造成较大威胁。子宫颈癌是一个不断进展过程，从癌前病变逐渐发展至子宫颈癌，若能在早期确诊并进行正规治疗，部分患者能够获得良好预后[6-7]。临床诊断子宫颈癌多以阴道镜、宫颈刮片、活检为主，阴道镜、宫颈刮片漏诊、误诊率高，使得患者无法及时检出;活检存在取样难、操作复杂等弊端，影响患者依从性，故临床急需新型、准确的诊断方法[8-9]。

近些年，子宫颈癌诊断中临床多采用血清学检测，通过检测肿瘤标志物水平进行筛查，既往以SCC为主，该指标属于抗原物质，在正常與恶变的蛋白分解调控中有参与，是重要的子宫颈癌筛查指标[10-12]。宫颈、头颈等鳞状上皮细胞中均存在SCC，具有一定的灵敏性与准确性，但单独使用时仍存在较高的漏诊情况，寻找新型用于子宫颈癌筛查、术后监测的生物标志物尤为重要[13-14]。本研究结果显示，子宫颈癌组的miR-210、SCC均高于宫颈上皮内瘤变组和健康对照组，miR-375低于宫颈上皮内瘤变组和健康对照组，且宫颈上皮内瘤变组的miR-210、SCC均高于健康对照组，miR-375低于健康对照组，差异均有统计学意义（P<0.05）。术后3个月miR-210、SCC均低于术前，miR-375高于术前，差异均有统计学意义（P<0.05）。绘制ROC曲线结果显示，血清miR-210、miR-375、SCC单独与联合用于诊断子宫颈癌的曲线下面积分别为：0.710、0.816、0.811、0.843，具有一定的诊断性能。表明miR-210、miR-375、SCC在子宫颈癌早期诊断与术后监测中均有较高的应用价值，能够准确反映病情变化，为临床诊断、评估预后提供参考信息。分析其原因为，miRNA在肿瘤的发生发展中均有参与，起到基因调控作用，能够促进肿瘤进展与转移，监测其水平变化对临床诊断、监测病情均有重要意义[15-16]。miRNA在子宫颈癌中有独特的表达谱，miR-210作为常见的miRNA分子，是一种促癌基因，在子宫颈癌中呈高表达，其表达与肿瘤分期、转移均关系密切，可作为重要的新型肿瘤标志物[17]。miR-375在多种肿瘤中均表达异常，对肿瘤进展有促进作用，其水平能够反映病情程度，在子宫颈癌早期筛查、术后监测中均有较高加之。单独检测时miR-210、miR-375诊断价值高于SCC，但三者联合诊断价值更高，为确保诊断准确性，临床可进行综合诊断[18-20]。

综上所述，miR-210、miR-375作为新型血清标志物，在子宫颈癌早期诊断、术后监测中均有一定价值，应用价值高于SCC，但联合诊断准确性更高，值得应用。

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（收稿日期：2021-02-05）

基金项目：江西省卫生健康委科技计划（20204246）

①江西省九江市妇幼保健院 江西 九江 332000

通信作者：周清