胶体金免疫层析技术在食品检测中的应用研究

摘 要：免疫胶体金技术多种方法结合固相标记免疫检测技术，GICA原理是以条状纤维层材料为固相，使样品与层析材料待测物受体发生免疫反应。分析技术可用于家庭成员诊断保健等方面，目前广泛应用于食品检测、生物制剂定性等领域。今后提高灵敏度同时，胶体金免疫层析技术将向定量及多元检测方向发展。研究介绍胶体免疫层析技术，论述食品检测中胶体金免疫层析技术的应用。

关键词：胶体金免疫层析技术;食品检测;应用

食品安全问题是全球话题，目前食品安全出现生物毒素等问题，开发满足要求的快速方便食品安全分析检测技术非常迫切。近年来食品安全快速检测技术包括ELISA等，ELISA法检测时间较长，免疫层析技术是免疫与色谱层析技术结合的免疫分析法，原理是借助毛细作用使样品溶液在层析条泳动，通过酶促显色反应快速得到直观实验结果。省去繁琐的加样等步骤，技术适用于食品现场快速检测。免疫金交通层析法具有灵敏度高，无需仪器等特点广泛应用于食品安全检测领域。

1.胶体金免疫层析技术研究

當前食品安全问题成为全球的公共卫生问题，欧盟国家发现含有杀虫剂氟虫腈成分污染鸡蛋，产毒菌在易感农作物中频繁出现，研究食品安全快速检测方法尤为重要，CGIS胶体金标记免疫层析技术是90年代兴起的快速诊断技术，为食源性致病菌快速检测提供解决途径，成为食品安全快速定量检测研究的热点。随着胶体金免疫层析技术的发展，将在食品安全检测中得到广泛应用。

1.1 胶体金免疫层析技术检测原理

免疫层析按抗原与抗体结合方式分为竞争性与非竞争性，胶体金是继放射性核素标记发展的固相标记物，胶体金颗粒在显微镜下大多为较小球形，胶体金为疏水性金溶胶，检测中可用肉眼快速检测样品【1】。胶体金标记是在弱碱环境下胶体金带负电荷，技术可形成稳定胶体，胶体金可与其他生物大分子非共价结合，近年来胶体金标记成为重要的免疫标记技术。胶体金是在还原剂作用下聚合呈特定金颗粒，胶体金颗粒具有高电子密度特性，聚集出现肉眼课件粉色斑点。

1.2 免疫胶体金制备

生物纳米颗粒在免疫测定中性能取决于蛋白质生物活性，制备胶体金质量关乎试条特性。胶体金制备法分为理化法，物理法包括热分解法等，常用的为化学还原法，还原剂原理为使金粒子还原变位金原子，可制备不同大小胶体金颗粒【2】。胶体金粒径与制备加入柠檬酸钠量相关，可通过测定吸光度确定胶体金颗粒大小。免疫胶体金制备是胶体吸附到胶体金表面，受到电解质等多方面的影响。免疫胶体金标记步骤为将蛋白质用双蒸水透析除去电解质，用0.1mol/L的K2CO3调节胶体金pH，标记蛋白适当稀释后滴加入胶体金中，滴加10%的BSA至浓度0.5%搅拌1h终止反应。加入等体积1%BSA溶液，获得胶体金探针保存备用。

2.胶体金免疫层析技术在食品安全检测中的应用

近年来全球发生食源性病原微生物引起食品安全事故频发，大肠杆菌等致癌病菌引起感染常见。目前广泛使用的病原微生物检测法存在过程繁琐，不利于现场快速检测等问题。研究食品安全快速检测方法非常重要。胶体金免疫层洗发是将胶体金标记等多种方法结合的固相免疫检测技术，具有适用于现场检测等特点。食品安全检测中胶体金免疫层析技术应用包括食品污染，食品添加剂，农药残留检测等。

2.1 食品农兽药残留检测

食品中农兽药速度残留严重威胁消费者的健康，由于胶体金免疫层析法简单方便等优点广泛应用。研究利用胶体金标记抗幅喹诺酮类单克隆抗体制备胶体金免疫检测失调，经LC-MS/MS法验证检测结果可靠【3】。研究以胶体金标记抗磺胺二甲嘧啶多克隆抗体，与高效液相色谱法对比检测猪肉样品检测结果一致。阿特拉津是持久性广谱除草剂，使用量达残留期长，目前被列为可疑致癌物质。研究采用胶体金免疫层洗发进行检测玉米中阿特拉津残留实验，通过样品实际检出值对比得出满足对最高残留限量要求。

2.2 非食品添加剂成分检测

近年来一些食品经营者非法添加食品添加剂，研究非食用食品添加成分罗丹明B检测技术非常迫切。大量文献采用HPLC等方法精度满足要求，但存在适用范围小，操作复杂等问题。国内外相关文献有关食品有害物检测研究多数药物残留为有限量标注。罗丹明类非食品色素不允许检出，将免疫胶体金技术用于罗丹明检测可行。三聚氰胺是对身体有害的化工原料，研究乳制品三聚氰胺检测方法，实验采用胶体金免疫层析法快速检测，对三聚氰胺定性检测，可适用于三聚氰胺快速筛查检测。实现乳制品三聚氰胺定性定量检测。

结语

免疫胶体金技术是第四大标记技术，由于具有简单快速等优点，适用于批量检测等。目前国内对胶体金免疫层析产品研究尚无成型产品，由于食品快速检测产品市场巨大，尽快研制高质量免疫层析产品，对改善食品质量安全起到重要作用。实现多元检测是未来免疫层析分析发展方向。多元检测可在精确控制样品加入量下对待测物定量。可通过复合多条件层析条方式，确定待测物含量浓度区间。提高检测特异性对免疫层析产品非常重要。

参考文献：

[1]罗锋，陈景纯. 食品检测中胶体金免疫层析技术的应用分析[J]. 中国食品，2021，（17）：140-141.

[2]农彩美. 胶体金免疫层析技术在食品安全检测中的应用[J]. 现代食品，2021，（09）：108-110.

[3]翟培，韩晋辉.胶体金免疫层析技术在食品安全现场快速检测中的应用[J].现代农业科技，2020（04）：225-227+229.

作者简介：

邵丽雁，1982年7月25日，女，汉，辽宁省普兰店市人，本科，毕业院校：东北农业大学，任职单位：黑龙江省荣贝测试科技有限责任公司，职称：初级，研究方向：食品检验。