大蒜多糖对肉鸡生长性能和免疫功能的影响

王誉瑾，张 萌，杨 松

（锦州医科大学，辽宁锦州121001）

近年来，禽产品药物残留问题越来越受到消费者的重视。抗生素的大量使用造成肉、蛋、奶中抗生素残留超标和细菌耐药性增强，成为危害消费者健康的重要隐患。中草药具有来源广、药食同源、多靶向和多功能的特点，在疾病的预防和治疗方面具有给药方便、利用率高、安全、绿色等优点，成为替代抗生素的有效产品之一。

大蒜（Allium sativumL．）又称葫或麝香草，百合科葱属，是一种古老的药食两用植物[1]。我国大蒜的种植面积占世界种植面积的2/3以上，是大蒜的主产国[2]。大蒜以鳞茎入药，性温味辛。大蒜中含有蒜氨酸、蒜氨酸酶、多糖、蛋白质、维生素、微量元素、皂苷、挥发油等活性物质，其中大蒜多糖含量占70%以上[3-4]。研究表明，大蒜多糖能增强人体免疫力，具有抗氧化和保护肝脏的作用[5]。大蒜在食品行业应用较多，但在畜禽生产中的应用报道较少。本研究旨在探讨大蒜多糖对肉鸡生长性能和免疫功能的影响，为其在肉鸡养殖生产中的应用提供参考。

1 材料与方法

1.1 试验材料

选取优质大蒜，蒜皮白亮、无霉变。按水提法提取大蒜多糖，提取温度为80 ℃、提取时间为150 min、料液比（体积比）为1∶30[3]。提取的大蒜多糖经测定纯度为97%。

1.2 试验动物

1日龄清洁级健康爱拔益加（AA）肉鸡雏160只，由锦州医科大学畜牧兽医学院实验动物中心提供。

1.3 仪器与试剂

ELISA试剂盒、Griess试剂、MTT试剂盒、PHA购自上海酶联生物公司.

酶标仪购自上海精密仪器仪表公司；恒温培养箱购自上海精密仪器仪表公司。

1.4 试验设计及饲养管理

1 日龄肉鸡随机分成4 组，每组4 个重复，每个重复10只。基础日粮中分别添加0、1000（低剂量）、2000（中剂量）、3000 mg/kg（高剂量）大蒜多糖。试验期为42 d。采取3层笼养，1日龄肉鸡每10只置于1笼，22日龄后每5只置于1 笼。肉鸡自由采食和饮水，鸡舍内光照、温湿度适宜，按常规免疫程序进行免疫。于42日龄以组为单位，每组取3只鸡进行取样。基础日粮组成及营养水平见表1。

表1 基础日粮组成及营养水平Tab.1 Basic diet composition and nutritional level

1.5 测定指标及方法

1.5.1 生长性能

饲养期间每天记录投料量，取样前禁食12 h，空腹称量肉鸡体重，计算日均采食量、平均日增重、耗料增重比，计算公式如下：

1.5.2 免疫性能

1.5.2.1 免疫器官指数

取胸腺、脾脏和法氏囊，去除多余脂肪，称量免疫器官湿重。免疫器官指数按如下公式计算：

1.5.2.2 免疫球蛋白

肉鸡翅下静脉采血10 mL，3000 r/min离心10 min，取上清，-20 ℃保存备用。血清免疫球蛋白G（IgG）、免疫球蛋白A（IgA）按照ELISA 试剂盒说明书要求操作测定，每样做3个重复。

1.5.2.3 淋巴细胞增殖活性

取肉鸡胸腺、脾脏，除包膜，剪碎并胰酶消化，裂解红细胞，调节细胞浓度为5×106/mL。取96 孔板，每孔加入100 μL，每测试设3 个重复，同时设空白对照。加入含PHA 的RPMl-l640，每孔100 μL。细胞培养箱37 ℃孵育68 h。每孔弃去100 μL 上清，按MTT 试剂盒说明书操作。酶标仪570 nm处读取各孔A值。

1.5.2.4 巨噬细胞释放NO能力

调整脾细胞浓度至1×107个/mL，24 孔板中加入1 mL；再加入1 mL 含10%FBS 的RPMI-1640 培 养 液，37 ℃培养箱中孵育2 h。细胞洗涤2次后加入0.5 mL细胞培养液，孵育24 h。将上清液和不同浓度的NaNO2标准品加于96 孔板中，100µL/孔，每样设3 个重复。加入Griess试剂100µL/孔，静置10 min，酶标仪550 nm处读取A值。

1.6 数据统计与分析

试验数据采用SPSS 18.0 进行单因素方差分析，组间采用SNK 法进行两两比较，结果以“平均值±标准差”表示，P<0.05表示差异显著。

2 结果与分析

2.1 大蒜多糖对肉鸡生长性能的影响（见表2）

表2 大蒜多糖对肉鸡生长性能的影响Tab.2 Effect of garlic polysaccharide on growth performance of broilers

由表2 可知，中剂量组和高剂量组肉鸡的平均日采食量、平均日增重显著高于对照组（P<0.05），料重比显著低于对照组（P<0.05）；但中、高剂量组之间差异不显著（P>0.05）。

2.2 大蒜多糖对免疫器官指数的影响（见表3）

表3 大蒜多糖对肉鸡免疫器官指数的影响Tab.3 Effect of garlic polysaccharide on immune organ index of broilers 单位：mg/g

由表3 可知，中剂量组和高剂量组肉鸡胸腺指数显著高于低剂量组和对照组（P<0.05），中剂量组和高剂量组之间差异不显著（P>0.05）。中剂量组的法氏囊指数显著高于低剂量组和对照组（P<0.05）；高剂量组显著高于对照组（P<0.05），但与低剂量组和中剂量组差异不显著（P>0.05）。各组的脾脏指数无显著差异（P>0.05）。

2.3 大蒜多糖对肉鸡血清IgG、IgA含量的影响（见表4）

表4 大蒜多糖对肉鸡血清IgG、IgA含量的影响Tab.4 Effect of garlic polysaccharide on serum IgG,IgA of broilers 单位：g/L

由表4 可知，中剂量组和高剂量组肉鸡血清中IgG 含量显著高于低剂量组和对照组（P<0.05）。高剂量组血清IgA水平略有提高，但差异不显著（P>0.05）。

2.4 大蒜多糖对肉鸡T细胞A值的影响（见表5）

表5 大蒜多糖对肉鸡T细胞A值的影响Tab.5 Effect of garlic polysaccharide on A value of T lymphocyte of broilers

由表5 可知，中剂量组和高剂量组肉鸡的T 细胞A 值显著高于低剂量组和对照组（P<0.05），中、高剂量组之间差异不显著（P>0.05）。

2.5 大蒜多糖对肉鸡巨噬细胞释放NO 能力的影响（见表6）

表6 大蒜多糖对肉鸡巨噬细胞释放NO能力的影响Tab.6 Effect of garlic polysaccharide on NO release level of broilers 单位：μmol/L

由表6 可知，中剂量组和高剂量组巨噬细胞释放NO的能力显著高于低剂量组和对照组（P<0.05），但中剂量组和高剂量组之间差异不显著（P>0.05）。

3 讨论

枸杞多糖、党参多糖、黄芪多糖、牛膝多糖等多种植物多糖能提高畜禽的生长性能和免疫功能[6-8]。枸杞多糖能够提高肉鸡日均采食量和平均日增重[9]。大蒜多糖作为益生元对小鼠肠道微生态具有促进作用[10]。本研究发现，饲料中添加中剂量（2000 mg/kg）和高剂量（3000 mg/kg）的大蒜多糖能显著提高肉鸡的日均采食量、平均日增重和耗料增重，进而提高肉鸡的生长性能。中剂量和高剂量大蒜多糖之间的效果差异不显著。

机体的免疫系统由免疫器官、免疫细胞和免疫效应分子组成。禽类的免疫器官主要是胸腺、脾脏和法氏囊等。免疫器官的发育和机能直接影响禽类免疫功能的强弱[6,11]。免疫器官指数是反应免疫器官发育情况的一项重要指标。T淋巴细胞是执行细胞免疫的主要效应细胞。T淋巴细胞的增殖、分化能力越强，细胞免疫功能越强；淋巴细胞A570nm值与淋巴细胞增殖呈正相关，A570nm值越大，则增殖越显著[11-14]。B 淋巴细胞是执行体液免疫的主要效应细胞，B 细胞受抗原刺激后转化为浆细胞产生抗体，是参与体液免疫的主要效应分子。抗体水平的高低，决定机体体液免疫能力的强弱。巨噬细胞是非特异性免疫中执行吞噬功能的主要细胞，可通过其产生的NO 发挥杀伤病原体的作用[15-18]。本研究发现，饲料中添加中剂量和高剂量的大蒜多糖可显著提高胸腺指数和法氏囊指数、T 淋巴细胞增值率、血清中总IgG 水平及巨噬细胞释放NO 能力。说明大蒜多糖能有效刺激免疫器官发育，提高机体的免疫功能，但中剂量和高剂量大蒜多糖组间的效果差异不明显。

4 结论

饲粮中添加大蒜多糖能在一定程度上提高肉鸡的生长性能和免疫功能，且大蒜多糖的添加量以2000 mg/kg较佳。