血清MBL、CCL11、Beclin1对溃疡性结肠炎患者肠道菌群分布的影响

胡雪庐，汤强

溃疡性结肠炎（UC）是临床上十分常见的慢性肠道疾病，近年来发病率有逐渐上升的趋势。甘聚糖结合凝集素（MBL）参与炎症介质产生和结肠损伤过程[1]，CC修饰趋化因子11（CCL11）参与了血管生长和促炎性因子释放过程，在多种肿瘤形成和发展中具有重要作用[2]，Beclin1蛋白可调节机体自噬活性，并可发挥抑制过度炎症反应和介导免疫反应的作用[3]。研究认为，UC的发病与肠道菌群存在密切联系，肠道寄生的大量细菌，影响了肠道消化能力、自体免疫力及机体抗感染等过程，在炎症性肠道疾病中发挥重要作用[4]。因此，本研究探究UC患者血清MBL、CCL11及Beclin1蛋白水平及与肠道菌群分布和病情的关系，以期为临床提供相关参考。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取宁波市北仑区人民医院和浙江省云和县人民医院2015年12月至2019年12月收治的UC患者66例。纳入标准：（1）存在腹泻、粪便含有黏液、脓、血等，排便后缓解，结肠镜检查黏膜水肿、充血，部分可见息肉样溃疡；（2）符合《中国炎症性肠病诊断治疗规范的共识意见》[5]中UC的诊断标准；（3）自愿参与本研究并签署知情同意书。排除标准：（1）肝、肾、心、肺等器官功能不全；（2）合并免疫系统疾病、凝血障碍、神经疾病者及其他感染性疾病；（3）合并恶性肿瘤。根据Raclmilewitz UC临床活动指数评估系统（CAI评分）[6]分为活动期组（≥4分，n=28）和缓解期组（＜4分，n=38）。其中活动期组男16例，女12例；年龄35～58岁，平均（46.7±4.1）岁；缓解期组男23例，女15例；年龄32～60岁，平均（47.2±3.9）岁。另选择同期健康志愿者60例作为对照组，其中男39例，女21例；年龄31～60岁，平均（47.3±4.2）岁。3组一般资料差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。

1.2 方法 所有研究对象均抽取空腹静脉血5 ml，采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血清MBL、CCL11及Beclin1水平，试剂盒购自加拿大ELIXIR医药公司。采用美国Thermo Fisher Scientific公司生产的酶标仪于450 nm波长下测定吸光度，并由标准浓度曲线计算OD值。所有受试者取1～2 g新鲜粪便样本，检测大肠杆菌、消化球菌、乳酸杆菌、双歧杆菌及肠球菌水平。采用CAI评分、Mayo活动评分[7]及Baron分级评分[8]评估病情活动程度。

1.3 统计方法 采用SPSS 20.0统计学软件进行数据分析，计量资料以均值±标准差表示，采用t检验，组间比较采用单因素方差分析；相关性分析采用Spearman检验。P＜0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 各组血清MBL、CCL11及Beclin1水平比较 对照组、缓解期组、活动期组MBL水平依次降低，CCL11、Beclin1水平依次升高，差异均有统计学意义（均P＜0.05）。见表1。

表1 各组血清MBL、CCL11及Beclin1水平比较

2.2 各组肠道菌群分布比较 活动期组大肠杆菌、肠球菌数量高于缓解期组和对照组，乳酸杆菌、双歧杆菌和消化球菌数量低于缓解期组和对照组（均P＜0.05）；缓解期组乳酸杆菌、双歧杆菌和消化球菌数量低于对照组（均P＜0.05），缓解期组与对照组大肠杆菌、肠球菌数量差异均无统计学意义（均P＞0.05）。见表2。

表2 各组肠道菌群分布比较 （×109个）

2.3 不同病情UC患者CAI、Mayo及Baron评分比较 活动期组CAI、Mayo及Baron评分均高于缓解期组（均P＜0.05），见表3。

表3 各组CAI、Mayo及Baron评分比较 分

2.4 MBL、CCL11及Beclin1与肠道菌群数量的相关性 Spearman相关性分析结果显示，血清MBL与大肠杆菌、肠球菌数量存在负相关，与乳酸杆菌、双歧杆菌和消化球菌数量存在正相关（均P＜0.05）；CCL11、Beclin1与大肠杆菌、肠球菌数量存在正相关性，与乳酸杆菌、双歧杆菌和消化球菌数量存在负相关（均P＜0.05）。见表4。

表4 血清MBL、CCL11及Beclin1与肠道菌群数量的相关性分析

2.5 血清MBL、CCL11、Beclin1与病情的相关性分析 Spearman相关性分析结果显示，血清MBL与CAI、Mayo及Baron评分存在负相关（均P＜0.05）；CCL11、Beclin1与CAI、Mayo及Baron评分存在正相关（均P＜0.05）。见表5。

表5 血清MBL、CCL11及Beclin1与病情活动的相关性分析

3 讨论

目前，内镜及结肠镜检查是评估UC病情的主要方式，但均具有入侵性，不适合耐受性较差的患者。因此，通过准确、快捷且无创的检测标志物评估UC病情为临床研究的重要内容。

本研究探讨MBL、CCL11及Beclin1在UC患者中的表达，并探讨与UC患者肠道菌群的相关性，结果显示活动期UC患者中，CCL11、Beclin1水平升高明显，MBL水平则显著降低，且与缓解期UC患者及健康对照人群存在明显差异。这提示检测血清MBL、CCL11及Beclin1水平有助于UC患者的疾病诊断和病情评估。相关性分析结果显示，血清MBL、CCL11及Beclin1水平与UC患者CAI、Mayo及Baron评分均存在显著相关性（均P＜0.05）。因此，MBL、CCL11及Beclin1可作为UC诊断和病情评估的潜在生物学指标。

肠道菌群可反应肠道细菌状态，分为有益菌、有害菌和中性菌，不同菌群数量存在动态平衡。菌群数量失衡将影响机体功能，并引发多种疾病。研究指出[9]，肠道炎症疾病状态下，肠道菌群会对肠黏膜的功能造成影响，并诱发机体免疫炎症反应，导致UC发生。另有研究指出[10]，不同时期UC患者肠道菌群会发生改变。本研究活动期组大肠杆菌、肠球菌数量明显高于缓解期组和对照组，乳酸杆菌、双歧杆菌和消化球菌数量明显低于缓解期组和对照组，这与上述研究结果相类似。双歧杆菌、乳酸杆菌和和消化球菌为肠道有益菌，可与肠黏膜细胞密切结合，形成肠黏膜表面的生物学屏障，发挥阻止病原菌定植和入侵等作用，三者数量降低肠黏膜的防御作用随之降低；肠球菌可释放外毒素，加重UC患者免疫紊乱和肠道局部炎症反应。本研究对于血清MBL、CCL11及Beclin1水平与肠道菌群数量的相关性分析结果显示，MBL、CCL11及Beclin1分别与大肠杆菌、肠球菌、乳酸杆菌、双歧杆菌和消化球菌存在密切相关性。这提示检测血清MBL、CCL11及Beclin1水平还有助于揭示UC患者肠道菌群紊乱情况，有助于UC患者的病情评估和病因分析。