玉树地区寄宿生结核分支杆菌的培养分离及耐药性分析

苏红梅

(玉树州疾病预防控制中心，青海 玉树 815099)

0 引言

肺结核作为呼吸内科临床常见病和多发病，属于传染性疾病范畴，近年来的发病率较高，病人主要是因为感染了结核分枝杆菌，进而侵害其肺部[1]。随着肺结核的发病率逐年增加，各类药物广泛运用后导致耐药性问题也日渐凸显，鉴于此，培养及分离结核分枝杆菌并对其耐药情况进行分析，对于提高临床药物治疗效果而言有重要意义[2]。本次研究纳入了我科2020年4月1日至2021年6月1日的160例肺结核病人为对象，采集其痰液标本并展开结核分枝杆菌培养，并将其耐药情况进行总结，并报告如下：

1 资料和方法

1.1 基础资料

回顾性分析2020年4月1日至2021年6月1日的160例肺结核病人资料，均为寄宿生，性别：男性72例、女性88例；年龄：14岁-20岁，平均(18.00±0.50)岁。纳入标准：均属于痰液标本；病人资料获得我伦理委员会审核与批准；病人(或)及家属对于此研究一律知情统一。排除标准：将尿液标准、脑脊液标准及胸腹水标本排除；将中途撤离本次研究的病人排除；将临床资料不完整的病人排除。

1.2 方法

1.2.1 标本采集

本次研究采集痰液标本主要借助通用的螺旋盖痰瓶，及直径为4cm干2cm的蜡纸盒，按照采集的时间不同将标本分为了晨痰、即时痰与夜间痰这三种，在采集痰液标本的时候先由深吸气子肺深处咳出的血痰、分干酪痰以及黏液痰才符合痰液标本的标准。

1.2.2 涂片镜检方法

分别取病人患者按医嘱分别取深部痰液或肺部咳出痰液三份，即晨痰、即时痰与夜间痰标本各一份，经涂片行萋尼氏抗酸染色，借助显微镜下镜检，严格按照《痰涂片镜检标准化操作及质量保证手册》[3]中相关操作方法及流程对所有病人的痰液标本进行处理。

1.2.3 培养方法

检验人员参照我国防痨协会颁布的《结核病诊断细菌学检验规程》当中的相关要求与标注，现将浓度为4%的氢氧化钠对采集到的痰液标本进行处理，然后移植到酸性的罗氏培养基当进行培养。其中，针对阳性的痰液标本则可以选择比例法来测定其药物的敏感性。本院使用的结核分枝杆菌药敏试剂包括了链霉素、利福平、异烟肼、利福喷丁、乙胺丁醇、卷曲霉素、左氧氟沙星、对氨基水杨酸钠、阿米卡星这九种，而其中由于利福喷丁与利福平存在相同的药理作用，所以在统计耐药性的时候全部按照利福平处理，本次培养与分离处理中涉及的试剂、培养基等一律购于珠海贝索生物技术有限公司。

1.3 耐药性判断标准

本次研究中对于结核分枝杆菌的耐药情况，主要参照《耐药结核病化学治疗指南》中的相关标在进行判断，一共分做了五种等级，分别是利福平耐药、单耐药、多耐药以及耐多药、广泛耐药，其中，结核分枝杆菌仅仅对一种一线的抗结核药物产生耐药，视为单耐药情况；若结核分枝杆菌仅对利福平产生耐药，则视为利福平耐药；若结核分枝杆菌对大于一种的一线抗结核药物产生耐药，且不同时间段对利福平、异烟肼产生耐药，则可以视为多耐药；若结核分枝杆菌同一时间段对利福平与异烟肼产生耐药，则视为耐多药；最后，若结核分枝杆菌在耐多药的同时至少同时对1种二类抗结核药物与1种氟喹诺酮类药物产生耐药，则视为广泛耐药[4]。

1.4 数据统计处理

数据用软件SPSS 23.0处理，计数资料以%表示，χ2检验、计量资料以(±s)表示，t检验，P<0.05时差异有统计学意义。

2 结果

2.1 分析160例病人涂片检查结果

本次研究的160例结核分枝杆菌阳性病人，有146例属于结核杆菌复合群阳性病例，所占比例是91.25%；其余14例属于非结核杆菌复合群，所占比例是8.75%，两者对比差异有统计学意义，χ2=217.8000，P<0.05。

在146例结核杆菌复合群阳性病例痰涂片阳性检出率78.77%(115/146)，高于非结核杆菌复合群痰涂片检查的阳性检出率50.00%(7/14)，对比差异有统计学意义，χ2=5.8378，P<0.05。

2.2 耐药情况分析

14例非结核杆菌复合群病人对本次研究的所有抗结核药物均存在耐药情况。而146例结核杆菌复合群阳性病人对本次研究涉及的九种抗结核药物存在95例不耐药，所占比例是65.07%，耐药51例，所占比例是34.93%，差异有统计学意义，χ2=26.5205，P<0.05，其中，以异烟肼的耐药率最高，其次是链霉素，最后是利福平、左氧氟沙星，耐药的详细情况如表2所示。

2.3 初治与复治的耐药及类型分析

146结核杆菌复合群阳性病人中，初治病人共116例，所占比例是79.45%；复治病人是30例，所占比例20.55%，差异有统计学意义，χ2=101.3151，P<0.05。其中，116例初治病人对的耐药率是22.41%(26/116),30例复治病人中耐药率是83.33% (25/30)，差异有统计学意义，χ2=38.9181，P<0.05。

表1 51例结核杆菌复合群阳性病人的耐药情况(n/%)

从耐药类型来看：复治病人在广泛耐药方面所占比例较初治病人高，χ2=4,5140，P<0.05，详细情况如表2所示。

表2 复治病人与初治病人的耐药类型分布情况(%,n)

3 讨论

肺结核是一种常见的传染性疾病，随着该病的临床患病率逐年增加，各类抗结核药物在临床上的广泛使用，是的耐药问题越来越明显，已经收到临床医务人员的广泛关注。对病人展开痰液标本采集，并进行结核分枝杆菌进行培养研究，对于明确病人的药敏情况，便于及时调整治疗方案，提高效果[5]。

本次研究中，通过采集的160例肺结核病人的痰液标本，160例病人结核分枝杆菌复合群阳性占91.25%，高于非结核分枝杆菌复合群的8.75%，P<0.05。结核杆菌复合群阳性病例痰涂片阳性检出率是78.77%，高于非结核杆菌复合群的50.00%，P<0.05。由此说明通过痰液标本检验结核分枝杆菌的阳性情况，有较高的价值。从病人的耐药情况来看，非结核分枝杆菌复合群病人对本次研究的所有抗结核药物均存在耐药情况，提示这类肺结核病人的临床治疗难度更大。而在结核杆菌复合群阳性病人中不耐药(65.07%)与耐药(34.93%)差异有统计学意义，P<0.05，耐药率较高的四种药物依次是异烟肼、链霉素、利福平、左氧氟沙星，说明在治疗结核杆菌复合群阳性病人过程中，主要对上述几种药物产生耐药作用，建议在临床治疗中酌情使用，尽可能选择其他抗结核药物来治疗，减少病人耐药的风险。

一般情况下，肺结核很难彻底根治，病情容易反复发作，临床上将首次接受治疗的人成为初治病人，而非首次治疗的病人则为复治病人。初治病人的病情较轻，治疗难度低于复治病人，所以在耐药方面复治病人更容易对药物产生耐药作用[6]。本次研究组，初治病人的耐药率(22.55%)低于复治病人(83.33%)，P<0.05，且在广泛耐药方面的差异最为显著，P<0.05，且复治病人存在广泛耐药情况，临床用药难度更大。

综上，经过展开一系列的药敏实验分析，能够明确各类型肺结核病人的耐药情况，为临床治疗提供客观参考。