缺血性脑卒中后抑郁患者血清Pannexin-1表达水平及临床意义研究

倪珂 回佳印 闫富全

摘要：目的：分析缺血性脑卒中后抑郁患者血清Pannexin-1水平变化及特点，明确血清Pannexin-1在缺血性脑卒中后抑郁临床诊疗中的价值，为缺血性脑卒中后抑郁临床诊疗提供新的思路和新的方向。方法：选取2019年1月-2021年10月我院收治的200例缺血性脑卒中后抑郁患者和50名健康体检者为研究对象，根据HAMD评分将PSD患者分为轻度抑郁组、中度抑郁组、重度抑郁组，比较各组病人血清Pannexin-1含量，绘制ROC曲线评估Pannexin-1对PSD的诊断价值。结果：两组研究对象的基线资料无差异;病例组血清Pannexin-1水平5.17±1.52 mg/ml，显著高于对照组（P<0.05）;不同PSD患者血清Pannexin-1水平差异有统计学意义（P<0.05），Pannexin-1水平与抑郁严重性有正相关关系;血清Pannexin-1对PSD患者有诊断价值，AUC为0.979，灵敏度、特异性分别为91.50%、96.00%。结论：血清Pannexin-1表达上调参与了PSD发病，与患者病情严重性密切相关，且该指标检测具有无创、简便快捷等特点，早期检测有望成为辅助判断PSD病情的重要生化指标。

关键词：缺血性脑卒中;卒中后抑郁;Pannexin-1;中枢神经系统

Abstract Objective： To analyze the changes and characteristics of serum Pannexin-1 levels in patients with post-ischemic stroke depression，and to clarify the value of serum Pannexin-1 in the clinical diagnosis and treatment of post-ischemic stroke depression，for the clinical diagnosis and treatment of post-ischemic stroke depression Provide new ideas and new directions. Methods： 200 cases of post-ischemic stroke depression patients and 50 healthy subjects who were admitted to our hospital from January 2019 to October 2021 were selected as the research objects. According to the HAMD score，the PSD patients were divided into mild depression group and moderate depression group. In the severely depressed group and the severely depressed group，the serum levels of Pannexin-1 in each group were compared，and the ROC curve was drawn to evaluate the diagnostic value of Pannexin-1 for PSD. Results： There was no difference in the baseline data of the two groups of subjects; the serum Pannexin-1 level of the case group was 5.17±1.52 mg/ml，which was significantly higher than that of the control group （P<0.05）; the difference of the serum Pannexin-1 level of patients with different PSD was statistically significant （P<0.05），Pannexin-1 level is positively correlated with depression severity; serum Pannexin-1 has diagnostic value for patients with PSD，AUC is 0.979，sensitivity and specificity are 91.50% and 96.00%，respectively. Conclusion： The up-regulation of serum Pannexin-1 expression is involved in the pathogenesis of PSD and is closely related to the severity of the patient's condition. The detection of this indicator is noninvasive，simple and fast. Early detection is expected to be an important biochemical indicator to assist in the diagnosis of PSD.

Key words：Ischemic stroke; post-stroke depression; Pannesin-1; central nervous system

【中圖分类号】R255.2 【文献标识码】A 【文章编号】1673-9026（2021）13-02

急性缺血性脑卒中（acute ischemic stroke，AIS） 是各种原因导致脑动脉供血严重障碍甚至中断，继而引起脑组织缺血、缺氧性坏死，从而出现相应神经功能缺失的一组急性脑血管病，在全部脑卒中约占70%，是临床常见的神经系统多发病和常见病[1]。脑卒中后抑郁（post-stroke depression，PSD）是导致不良预后的主要因素[2-4]。临床病人因病致残或致死风险极高，及早预判病情或预后可为临床医师尽早开展[5]。Pannexin-1（Panx-1）属于脊椎动物跨膜通道蛋白家族，其与无脊椎动物缝隙连接蛋白（innexins）具有同源性，在中枢神经系统中大量表达，参与了细胞对多种病理损伤的反应[6-8]。本研究旨在分析缺血性脑卒中后抑郁患者血清Pannexin-1水平变化及特点，明确血清Pannexin-1在缺血性脑卒中后抑郁临床诊疗中的价值，为缺血性脑卒中后抑郁临床诊疗提供新的思路和新的方向。

1资料与方法

1.1病例选取及分组

选取2019年1月-2021年10月我院收治的200例缺血性脑卒中后抑郁（PSD）患者。纳入标准符合中华医学会神经病学分会脑血管病学组制定的《 中国急性缺血性脑卒中诊治指南（2014 版） 》、《中国精神疾病分类方案与诊断标准》第3版（CCMD-3）：①入院时典型临床症状，如眩晕、头痛、头昏、恶心呕吐等主观症状，肢体不同程度偏瘫、步态不稳等躯体症状，吞咽困难、中枢性面瘫和舌瘫等神经症状，并经脑部CT或MRI、动脉血管造影等检查确诊为AIS;②首次发病且发病至入院时间<24h;③患者年龄>18岁;④患者存活时间>3m者;⑤患者无重要临床信息遗漏;⑥HAMD评分≥8分。排除标准： ①存在感觉、认知功能障碍者;②既往有脑卒中史者;③合并恶性肿瘤者;④心脏功能不全的患者，肝、肾功能障碍的患者;⑤妊娠期、哺乳期的患者;⑥伴有血液、免疫等系统疾病者;⑦其他神经系统疾病患者。依据入院后HAMD评分分为轻度抑郁（HAMD评分8-16分）、中度抑郁（HAMD评分17-23分）、重度抑郁（HAMD评分≥24分）;选取行健康体检的50例人群为对照组。

1.2资料收集

收集患者年龄、性别、血压、BMI、吸烟史、饮酒史等基线资料。吸烟史定义目前吸烟或既往有吸烟史;饮酒史定义为每日饮酒精量>20g。

1.3实验室指标

所有患者于入院24h内，清晨空腹抽取静脉血5ml，完成相关实验室检查，详细记录空腹血糖（FBG）、糖化血红蛋白（HbA1c）、总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白（HDL）、低密度脂蛋白（LDL）等指标数据。

1.4血清Pannexin-1检测

于入院24h内抽取患者静脉血，常规分离血清，以ELISA法测定血清Pannexin-1水平。实验操作严格按ELISA试剂盒说明书进行（试剂盒购自美国Sigma 公司）。

1.5统计学分析

采用SPSS20.0软件分析数据，计数资料用百分数表示，组间比较用X2检验;计量资料用均值±标准差表示，两组独立样本组间比较用t检验，多组独立样本组间比较采用单因素方差分析，两两比较采用LSD-t检验。绘制受试工作特征曲线（ROC曲线）评估Pannexin-1对PSD的诊断价值，计算曲线下面积（AUC）、敏感性、特异性及最佳截断值。P<0.05代表差异有统计学意义。

2结果

2.1 两组研究对象的一般情况

表1为两组研究对象的基线资料，两组研究对象在年龄、性别、BMI、吸烟史、饮酒史、空腹血糖、糖化血红蛋白、总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白等指标数据均无差异（p>0.05），具有可比性。

2.2病例组与对照组血清Pannexin-1水平比较

表2为病例组与对照组血清Pannexin-1水平比较，经统计发现，病例组血清Pannexin-1水平显著高于对照组（t=14.076，P<0.05）。

2.3不同PSD患者血清Pannexin-1水平比较

不同脑卒中后抑郁患者血清Pannexin-1水平经单因素方差分析，差异有统计学意义（F=84.056，P<0.05），中度抑郁组、重度抑郁组血清Pannexin-1水平高于轻度抑郁组，且重度抑郁组高于中度抑郁组（数据见表3）。

2.4血清Pannexin-1对PSD患者的诊断价值

绘制ROC曲线，结果显示血清Pannexin-1对PSD患者有诊断价值，AUC为0.979（95%CI0.964～0.994，P=0.000），截断值为3.255mg/ml，灵敏度、特异性分别为91.50%、96.00%。

3讨论

脑卒中是严重影响人们健康的全球重大公共卫生问题，报道显示，全球脑卒中每年增加约1500万例，我国占其中1/6，将近250万例[9]。流行病学研究显示，脑卒中在我国发病率约为110～180/10万，年死亡率约80～120/10万，并呈北高南低趋势。黑龙江省是我国人口大省，但卒中防治水平与经济发展水平并不匹配，防控形势异常严峻。脑卒中后抑郁（post-stroke depression，PSD）是指缺血性卒中发生后两年内出现的一种情感障碍性疾病，主要表现为情绪低落、兴趣减退、思维功能迟缓，甚至有自杀倾向，其发病机制与炎症级联反应、缺氧、缺血导致的脑组织损伤有关[9]。脑卒中后抑郁是导致不良预后的主要因素。

PSD与卒中损伤中枢神经系统情感部位相关[12-13]。Pannexins属于脊椎动物跨膜通道蛋白家族 ，其与无脊椎动物缝隙连接蛋白（innexins）具有同源性。Pannexin-1在脊椎动物中枢神经系统中大量表达，离子及大分子物质可通过Pannexin-1通道跨膜流动，导致细胞功能变化[14-15]。研究显示，细胞膜机械拉伸刺激、细胞外K+高浓度、膜电位改变、细胞外pH值改变等内环境紊乱或细胞状态改变激活Pannexin-1通道并致其打开，进而参与多种疾病的发生发展[16]。刘美霞[17]等对比缺血性脑卒中与健康体检者血清Pannexin-1水平，发现缺血性脑卒中组不同时间点血清Pannexin-1均高于对照组，不同脑梗死体积患者血清Pannexin-1水平比较，差异有统计学意义，认为缺血性脑卒中患者血清Pannexin-1水平与病情严重程度，神经损伤程度及预后关系密切。同樣辛家厚[18]等研究也发现血清Pannexin1在AIS患者中呈高表达水平，并与病情严重性及预后密切相关，早期检测可作为临床辅助判断病情严重性、预测预后不良的生化指标。

本研究结果显示，PSD患者血清Pannexin-1水平较健康体检者明显升高，推测Pannexin-1可能参与了PSD的发病过程，其机制可能为：①脑组织细胞因缺血受损时，在海马锥体神经元中，NMDA受体可以通过Src家族激酶介导的方式激活Pannexin-1，Src家族激酶在PANX1磷酸化激活中发挥作用，导致细胞外Ca+内流和细胞内ATP释放，引起细胞毒性并致神经细胞死亡;②缺血性脑梗死神经元细胞释放大量炎性因子活化星形胶质细胞，引起细胞外K+浓度升高，导致Pannexin-1通道由关闭状态打开，使半胱氨酸蛋白酶-1活化而加重炎症反应，反过来又加重PSD病情;③Pannexin-1通道打开，caspase3或者caspase7两种酶作用于Pannexin-1的C端酶切位点，离子通道开放后释放核苷酸，从而吸引巨噬细胞来吞噬凋亡的细胞[19]。

研究还发现，随着神经功能缺损程度加重，血清Pannexin-1水平呈逐渐升高趋势，提示血清Pannexin-1水平与HAMD评分相关性也进一步证实。可能的原因PSD患者病情越严重，细胞内Ca+超载以及ATP释放越显著，同时炎症反应也越严重，脑缺血组织中大量Pannexin-1蛋白表达并释放入血。该结果提示早期检测血清Pannexin-1，可辅助临床早期评估PSD患者病情严重性，为临床制定针对性治疗方案提供帮助。

绘制ROC曲线，结果显示，血清Pannexin-1含量其对PSD患者的诊断有预测价值，AUC为0.979，灵敏度、特异性分别为91.50%、96.00%。表明临床早期检测血清Pannexin-1可诊断PSD患者。

综上所述，血清Pannexin-1表达上调参与了PSD发病，与患者病情严重性密切相关，且该指标检测具有无创、简便快捷等特点，早期检测有望成为辅助判断PSD病情的重要生化指标。

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