原子吸收分光光度法测定多糖铁复合物胶囊中铁含量

郭翠翠，孔凡强，范前业，程宏霞，朱 斌

（1.中国人民解放军联勤保障部队第960医院，山东 济南 250000；2.上海医药集团青岛国风药业股份有限公司，山东 青岛 266510）

0 引言

铁元素是人体内必需的微量元素之一，人体内铁含量约为4~5 g，不仅是血红蛋白的重要组成成分，还存在于红细胞中参与氧气运输. 同时铁元素还具有促进发育，提高机体免疫力等诸多功能. 铁元素的缺乏会引起血红蛋白合成降低，从而导致缺铁性贫血（iron-deficiency anemia，IDA）［1-2］. 世界卫生组织（World Health Organization，WHO）统计资料表明，IDA作为四大营养缺乏症之一，同时也是临床常见营养性贫血中的一种，约有全球总人口的30%患IDA，其中患者总数的90%为婴幼儿和妊娠期妇女［3］. 文献报道，胎儿对铁元素的获取途径只有通过胎盘从母体中输送，所以妊娠期妇女对铁的需求量剧增. 导致妊娠期贫血的因素主要有饮食不合理与营养吸收不良［4］，妊娠期IDA容易造成新生儿缺氧，引起新生儿窒息等情况，严重贫血能造成新生儿神经及智力发育等不可逆的损伤，严重影响妇、儿及家庭生活质量［5］. 婴幼儿IDA的主要原因是妊娠期母体贫血导致的婴幼儿铁储存不足［6］，由于婴幼儿生长速度快，所需营养多，不及时补充铁元素等营养极易出现贫血症状. 患有IDA的婴幼儿在智力、运动及神经系统发育低于正常婴幼儿，严重IDA会导致患儿嗜睡、发育迟缓等症状［7］.

当前临床常用的铁补充方法主要有三种：静脉补铁剂、口服补铁剂和营养干预. 随着技术的发展，静脉和口服补铁剂分别又衍生出传统和新型铁剂. 传统静脉铁剂主要有右旋糖酐铁和蔗糖铁. 低分子右旋糖苷铁作为静脉注射用铁剂在我国临床应用时间较长，输注前需要进行小剂量试验［8］，蔗糖铁则不需要进行输注前试验［9］. 新型静脉铁剂以羟基麦芽糖铁为代表，具有良好的临床有效性和稳定性［10］. 传统口服铁剂主要为二价铁离子的方式进行补充，之后转换成三价铁离子. 主要的传统口服铁剂为硫酸亚铁、枸橼酸铁等［11］. 新型口服铁剂代表有氨基酸螯合铁、血红素铁及多糖铁复合物. 近年来，以多糖铁复合物（Polysaccharide-iron complex，PIC）为代表的第三代口服补铁剂，由于在人体生理范围内良好的溶解性以及较高的生物利用度得到越来越多的关注［12］. PIC是由铁和多糖合成的大分子络合物，铁核成β-FeOOH结构，属于非离子型口服补铁剂，铁元素含量高达46%，能以分子形式在消化道吸收，因此胃肠道不良反应发生率较低［13-14］.在临床上应用广泛，可用于治疗妊娠期女性、非妊娠期女性铁缺乏和缺铁性贫血；儿童铁缺乏和缺铁性贫血；消化系统疾病合并铁缺乏和缺铁性贫血；慢性肾病合并铁缺乏和缺铁性贫血以及外科疾病合并铁缺乏和缺铁性贫血等［15-19］.

原子吸收分光光度法，简称原子吸收法，目前已成为普及程度很高的分析方法之一，并广泛应用于食品、药品、化工等领域相关元素的定量分析. 郭娇艳建立了原子吸收法测定葡萄糖中铅含量的方法，且该方法的各项指标均符合中国药典要求［20］. 卢小兰等通过该方法对癫痫片中钙含量进行了测定，测定结果准确灵敏，表明该方法可应用于药效学研究［21］. 马玉婷等采用微波消解—火焰原子吸收法对保健品中的钙含量进行了快速测定，结果表明该方法准确简便［22］. 综上，原子吸收分光光度法具有灵敏度高、谱线简单、操作简便快捷、精密度高、测定元素种类多的特点［23-24］. 多糖铁复合物胶囊法定质量标准中铁含量的测定方法为碘量法，操作较为繁琐且易引入人为误差. 随着国家对药品质量监管的日趋严格，企业采用新技术、新方法开展质量标准提升工作势在必行.

本文采用了原子吸收分光光度法测定多糖铁复合物胶囊中铁含量，并开展了方法学研究，本法操作简便，结果准确度高，检测效率高，弥补了碘量法的不足.

1 仪器与试药

1.1 仪器

原子吸收光谱仪（PE）；XS205型电子天平（梅特勒）；DRHH-S8型水浴锅（上海双捷实验设备有限公司）.

1.2 试药

多糖铁复合物胶囊（商品名：红源达，上海医药集团青岛国风药业股份有限公司生产，批号：190504、190505、190506）；标准铁溶液（规格：1000 μg·mL-1，贮存于1.0 mol·L-1硝酸介质中，中国家有色金属及电子材料分析测试中心，定值日期：2018年11月05日）；硝酸（优级纯，国药集团化学试剂有限公司）；水为纯净水.

2 方法与结果

2.1 仪器工作条件

检测波长：248.3 nm；灯电流：15 mA；燃气流量：2.0 L·min-1；狭缝宽度：0.2 nm；燃烧器高度：7.5 mm；助燃气流量：15.0 L·min-1.

2.2 溶液的配置

5%硝酸溶液：取5 ml硝酸置100 mL量瓶中，加水至刻度，摇匀，即得.

标准铁储备液：精密量取标准铁溶液5.0 mL置50 mL量瓶中，用5%硝酸溶液稀释至刻度，摇匀，即得.

供试品溶液：称取多糖铁复合物胶囊10粒，研磨混匀，精密称取细粉约40 mg，置200 mL量瓶中，分别加入5 mL硝酸和5 mL水，密封，置沸水浴上中加热10 min，取出放凉，加水至刻度，摇匀. 精密量取该溶液2 mL置50 mL量瓶中，加入5%硝酸溶液稀释至刻度，摇匀，即可.

空白溶液：取5 ml硝酸和5 mL水置200 mL量瓶中，密封，置沸水浴上中加热10 min，取出放凉，加水至刻度，摇匀. 精密量取该溶液2 mL置50 mL量瓶中，加入5%硝酸溶液稀释至刻度，摇匀，即得.

2.3 线性试验

精密量取“2.2”项下标准铁储备液0、0.5、1、2、4、6 mL，置100 mL量瓶中用5%硝酸溶液稀释至刻度，摇匀，即得0，0.5，1.0，2.0，4.0，6.0 μg·mL-1的系列对照品溶液. 以铁元素浓度（C）为横坐标，以吸光度（A）为纵坐标，绘制标准曲线，结果见图1. 结果表明：铁元素浓度在0~6 μg·mL-1范围内，吸光度与浓度呈良好的线性关系，线性回归方程为：A = 0.047 1×C+0.003 2，r2= 0.999 2.

图1 对照品溶液标准曲线图

2.4 精密度试验

精密量取铁标准储备液3 mL，置100 mL 量瓶中，用5%硝酸溶液稀释至刻度，摇匀，按“2.1”项下仪器工作条件连续测定6 次，检测结果的RSD为0.42%，表明仪器精密度良好.

2.5 重复性试验

按“2.2”项下方法制备供试品溶液6份，按“2.1”项下仪器工作条件测定，RSD为0. 97%，结果表明重复性良好.

2.6 溶液稳定性试验

取“2.2”项下供试品溶液，室温下放置，分别于0.5、1、2、4、6、8 h依法检测，结果显示供试品溶液的RSD为0.39%（n = 6）. 表明在室温条件下，供试品溶液在8 h内稳定.

2.7 回收率试验

精密称取已知含量的多糖铁复合物胶囊粉末约20 mg，共9份，分别置200 mL量瓶中，加入标准铁1000 μg·mL-1溶液6 mL、7.5 mL、9 mL各3 份，按“2.2”项下供试品溶液制备，精密量取该溶液2 mL 于50 mL量瓶中，加5%硝酸溶液至刻度，摇匀，按“2.1”仪器工作条件测定，计算回收率，回收率为100.3%，RSD =1.12%.

2.8 样品检测

取多糖铁复合物胶囊，按“2.2”项下方法制备供试品溶液，按“2.1” 仪器工作条件测定，计算含量. 同时按法定质量标准中铁含量的测定方法，依法检测.结果表明，两种方法测得结果基本一致，结果见表1.

表1 多糖铁复合物胶囊样品含量测定结果对比

3 讨论

采用传统碘量法测定多糖铁复合物胶囊中铁含量的原理是：首先，通过消解出多糖铁复合物中的三价铁离子；然后，消解出的三价铁离子将碘化钾氧化成碘单质；最后，使用硫代硫酸钠滴定碘单质，间接测定铁含量. 该方法的不足之处有两点，首先所用试剂繁多，配制过程繁琐，操作要求高；其次，多糖铁复合物胶囊内容物溶于水后呈红棕色，由于溶液本身颜色，以及操作人员对颜色变化的敏感性不同，易造成滴定突跃终点观察不便，引起人为误差，最终导致测定结果的不准确，影响检测效率.

鉴于传统碘量法的不足之处，探究了基于原子吸收分光光度法对多糖铁复合物胶囊中铁含量的检测方法，同时进行了方法学考察，在线性、精密度、重复性、稳定性、回收率等试验结果均表现良好. 通过两种方法对多批次多糖铁复合物胶囊样品中铁含量进行测定，结果基本一致，表明该方法适用于对多糖铁复合物胶囊中铁含量的测定. 对比传统碘量法，笔者总结了原子吸收分光光度法的优点. 首先，试验所需试剂种类少，操作步骤简便；其次，由于仪器测定得出结果，不依赖于实验人员观察，使得人为操作产生的误差减少，结果准确性提高；再次，随着科技的发展，原子吸收光谱仪已成为企业和科研机构常用的分析仪器，相较于碘量法，缩短了检测时间，提高了检测效率；最后，该方法通过多糖铁复合物胶囊中铁含量的精确测定，进而更加准确的控制药品质量，为患者提供安全、优质产品，因此能产生较大的社会效益.

综上所述，原子吸收分光光度法不仅适合多糖铁复合物胶囊中铁含量的测定，同时鉴于该方法对于实验结果的准确性、检测效率的提高、药品质量的提升以及患者用药的安全性等方面的意义，建议进一步深入研究并为接下来开展的药品质量标准提升工作奠定基础.

4 结论

通过对三批多糖铁复合物胶囊中铁含量测定，本方法与法定质量标准方法的测定结果基本一致，表明本方法适合多糖铁复合物胶囊中铁含量的测定.