紫七软肝方对肝硬化患者氧化应激水平及NLR、TGF-β1、IL-6水平的影响

洪 玫，杨 敏

［焦作煤业（集团）有限责任公司中央医院，河南 焦作 454000］

肝硬化（liver cirrhosis，LC）是由一种或多种病因反复或长期作用导致的慢性进行性肝病，酒精、代谢、血吸虫病、肝炎病毒等均可引发该病［1］。由于肝脏具有较强的代偿功能，LC 患者在早期多无显著临床症状，随着疾病的发展，可出现门脉高压、肝功能损害，并伴随多系统受累，甚至还会引发癌变、腹水、脾功能亢进、肝性脑病、上消化道出血等严重并发症，严重威胁患者的身体健康及生命安全［2-3］。目前临床主要采用保肝药物对患者进行治疗，虽取得了一定的临床疗效，但其效果并不显著［4］，因此还需寻找其他更为高效的治疗方法。中医认为湿热毒邪、脾运不健、肝络瘀阻是慢性乙型肝炎肝硬化的主要病因［5］。软肝方具有散结利水、活血化瘀、健脾益气等功效，目前已有研究证实其对肝脏疾病具有较好的治疗效果［6］。另外有研究表明，机体发生LC 后，其氧化应激反应明显，并伴有明显的炎症反应［7-8］。紫七软肝方乃依据中医理论和临床经验研制而成，临床对肝硬化的治疗具有较好效果，本研究探究紫七软肝方对LC患者氧化应激水平及中性粒细胞与淋巴细胞的比值（neutrophil to lymphocyte ratio，NLR）、转化生长因子β1（transforming growth factor-β1，TGFβ1）、白介素-6（interleukin-6，IL-6）水平的影响，旨在为临床应用紫七软肝方治疗LC 提供更多的参考依据。

1 临床资料

1.1 一般资料选取2018年2月至2020年9月就诊于我院的98例LC 患者作为研究对象，根据随机数字表法将其分为对照组49例和观察组49例。对照组男35例，女14例；年龄36～68（56.15±3.27）岁；病程7 个月～7（3.67±0.60）年；肝功能Child-Pugh 分级：A 级18例，B 级20例，C 级11例；LC 类型：肝炎肝硬化41例，胆汁性肝硬化1例，酒精性肝硬化5例，其他2例。观察组男33例，女16例；年龄35～70（55.67±3.35）岁；病程9 个月～7（3.81±0.52）年；肝功能Child-Pugh 分级：A级17例，B级21例，C级11例；LC 类型：肝炎肝硬化40例，胆汁性肝硬化2例，酒精性肝硬化6例，其他1例。两组在性别、年龄、病程、肝功能Child-Pugh 分级、LC 类型等方面比较差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。

1.2 纳入标准①参照《肝硬化诊治指南》［9］中LC诊断标准，所有患者均确诊为LC；②入院前未接受过相关治疗的患者；③未合并心、肾、肺、脑等重大疾病的患者；④患者或其家属签署知情同意书。

1.3 排除标准①合并其他感染性疾病的患者；②过敏体质或对本研究药物过敏的患者；③合并其他肝脏疾病的患者；④合并肿瘤疾病的患者；⑤妊娠期或哺乳期妇女。

2 治疗方法

2.1 对照组采用常规药物治疗。叮嘱患者注意休息，维持其电解质和酸碱平衡，补充营养，同时根据患者具体情况给予还原性谷胱甘肽、甘草酸二铵氯化钠等保肝药物，必要时还可给予恩替卡韦或拉米夫定等抗病毒药物。

2.2 观察组在对照组基础上给予紫七软肝方，药用：紫草10 g，三七30 g，马鞭草20 g，炙鳖甲15 g，茵陈12 g，赤芍12 g，虎杖15 g，生白术15 g，泽泻9 g，佛手15 g。用水煎服，每天1剂，分早晚两次服用，每次100 ml。连续服用3 个月后，停药1 个月，继续服药3个月，服药6个月为1个疗程。

两组均治疗1个疗程后统计疗效。

3 疗效观察

3.1 观察指标分别于治疗前1 天和治疗后的第2天清晨抽取患者空腹肘静脉血9 ml，置于EP 管内，在常温下静置1 h后采用离心法分离出血清，将其均分为3份，置于干燥试管内于-80 ℃保存待测。比较两组治疗前后氧化应激水平，NLR、TGF-β1、IL-6 水平及肝功能。

3.1.1 氧化应激水平检测取一份待测样品，采用酶联免疫吸附实验（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）法对一氧化氮（nitric oxide，NO）、丙二醛（malondialdehyde，MDA）水平进行检测，所用试剂盒均由上海信帆生物科技有限公司提供；采用放射免疫分析法对血清超氧化物歧化酶（superoxide dis⁃mutase，SOD）进行检测，所用试剂盒由北京北免东雅生物技术研究所提供。

3.1.2 NLR、TGF-β1、IL-6 水平检测取一份待测样品，采用全自动血细胞分析仪（迈瑞提供，型号：BC-3000Plus）对其中性粒细胞（neutrophil，N）以及淋巴细胞（lymphocyte，L）进行检测，并计算NLR（NLR=N/L）的值；采用ELISA 法对血清TGF-β1、IL-6水平进行检测，所用试剂盒由浙江杭州辉图生物科技有限公司提供。

3.1.3 肝功能检测取最后一份待测样品，采用全自动生化分析仪（雅培提供，型号：AEROSET）对血清谷丙转氨酶（alanine aminotransferase，ALT）、谷草转氨酶（aspartate aminotransferase，AST）水平进行检测，采用重氮盐法对总胆红素（total bilirubin，TBIL）和直接胆红素（direct bilirubin，DBIL）水平进行检测。

3.2 统计学方法采用SPSS 18.0进行统计学分析，计量资料采用均数±标准差（±s）表示，采用t进行检验；计数资料采用例（n）或百分比（%）表示，采用χ2进行检验；P＜0.05表示差异有统计学意义。

3.3 结果

3.3.1 两组治疗前后氧化应激水平比较治疗前两组NO、MDA、SOD 水平比较差异无统计学意义（P＞0.05）；治疗后两组NO、MDA 水平显著降低，SOD 水平显著升高，且观察组改善显著优于对照组，差异均具有统计学意义（P＜0.05），见表1。

表1 两组治疗前后氧化应激水平的比较 （±s）

表1 两组治疗前后氧化应激水平的比较 （±s）

注：与同组治疗前比较，①P＜0.05；与对照组治疗后比较，②P＜0.05

组 别观察组对照组n 49 49 NO（µmol/L）治疗前55.29±7.41 55.57±7.53治疗后24.18±5.37①②40.05±7.44①MDA（µmol/L）治疗前14.30±4.53 15.05±5.31治疗后7.73±3.09①②9.27±3.53①SOD（U/ml）治疗前85.41±15.43 85.45±19.19治疗后120.28±27.34①②98.40±17.90①

3.3.2 两组治疗前后NLR、TGF-β1、IL-6 水平比较治疗前两组NLR、TGF-β1、IL-6 水平比较差异无统计学意义（P＞0.05）；治疗后两组NLR、TGF-β1、IL-6水平均显著降低，且观察组降低幅度显著大于对照组，差异均具有统计学意义（P＜0.05），见表2。

表2 两组治疗前后NLR、TGF-β1、IL-6水平的比较 （±s）

表2 两组治疗前后NLR、TGF-β1、IL-6水平的比较 （±s）

注：与同组治疗前比较，①P＜0.05；与对照组治疗后比较，②P＜0.05

组 别观察组对照组n 49 49 NLR治疗前5.36±1.12 5.43±1.09治疗后2.35±0.54①②4.61±0.73①TGF-β1（mg/L）治疗前56.47±6.63 55.82±6.29治疗后36.01±3.72①②51.38±4.53①IL-6（ng/L）治疗前63.13±10.72 63.57±10.28治疗后35.38±9.30①②59.29±9.37①

3.3.3 两组治疗前后肝功能比较治疗前两组ALT、AST、TBIL、DBIL 水平比较差异无统计学意义（P＞0.05）；治疗后两组ALT、AST、TBIL、DBIL 水平均显著降低，且观察组降低幅度显著大于对照组，差异均具有统计学意义（P＜0.05），见表3。

表3 两组治疗前后肝功能的比较 （±s）

表3 两组治疗前后肝功能的比较 （±s）

注：与同组治疗前比较，①P＜0.05；与对照组治疗后比较，②P＜0.05

组 别观察组对照组n 49 49 ALT（U/L）治疗前410.69±16.97 410.45±17.34治疗后41.30±4.32①②70.37±12.66①AST（U/L）治疗前410.43±17.07 409.72±8.15治疗后50.11±4.22①②70.60±11.18①TBIL（µmol/L）治疗前102.63±4.27 102.05±4.01治疗后30.19±5.33①②60.37±5.14①DBIL（µmol/L）治疗前61.21±6.78 61.67±6.77治疗后18.31±1.90①②25.86±2.38①

4 讨 论

LC 多由乙肝病毒感染引起，是慢性肝病的终末阶段，机体一旦发生LC 后，正常的肝脏生理结构被破坏，会造成一系列的生理病理性变化，对患者的生存质量产生严重的影响［10］。目前临床主要对LC 患者行保肝治疗，虽能在一定程度上改善患者临床症状，但并未达到临床预期效果［11］。LC在中医可归属为“积聚”“鼓胀”等范畴，多属气虚血瘀、本虚标实之证，因此临床应以理气活血、散结利水、清热利湿为治疗原则［12］。近年来有学者指出，软肝方具有较好的保肝效果［13］，但目前关于紫七软肝方对LC 患者氧化应激及NLR、TGF-β1、IL-6 水平影响的研究较少。

LC的发病机制较为复杂，而氧化应激反应是LC发病的重要原因之一［14］，因此减轻机体氧化应激反应对LC 的临床治疗有着重要的意义。NO、MDA、SOD 作为临床常见的氧化应激指标，一旦机体出现氧化应激反应，即可引起NO、MDA 水平的异常升高和SOD 水平的异常降低［15-16］。殷爱华等［17］研究结果表明，软肝利水汤能够有效降低NO 水平；李珂等［18］研究结果显示，LC患者经恩替卡韦和水飞蓟素联合治疗后，其NO、MDA 水平明显降低，SOD 水平则明显升高；在本研究中，治疗后两组NO、MDA 水平均降低，SOD 水平均升高，且观察组变化幅度明显较对照组显著，此与上述研究结果基本一致，表明紫七软肝方可有效减轻LC 患者氧化应激反应。紫七软肝方中的紫草具有活血解毒、凉血等功效，对血热毒盛、病毒感染等均且有较好的治疗效果；三七能调节免疫、活血定痛、化瘀止血；马鞭草能活血散瘀、利水消肿、清热解毒；炙鳖甲能软坚散结、潜阳熄火、滋阴清热；茵陈能疏利肝胆、避秽退黄、清利湿热；赤芍能活血祛瘀、清热凉血；虎杖能解毒、清热利湿、活血定痛；生白术能燥湿利水、补气健脾；泽泻能渗湿、利尿、清热；佛手疏肝理气。诸药合用共奏疏肝理气、清热利湿、散结利水等功效，对清除机体中的自由基、脂质过氧化有着重要的作用，进而减轻机体氧化应激反应。

炎症反应是引起LC 的另一重要病因，NLR、TGF-β1、IL-6 为临床常见炎症因子，NLR 能够将系统性的炎症优势信息进行融合，进而将机体整体炎症反应进程反映出来，其比值越高则表明机体炎症反应越严重［19］；TGF-β1是一种多功能的生长因子，由多种细胞分泌产生，能够通过旁分泌和自分泌诱导成纤维细胞分泌细胞基质蛋白，进而参与胶原转录与翻译过程，促进纤维化［20］；IL-6 一般由成纤维细胞以及T 细胞分泌产生，是一种多功能的炎性因子，在活性状态下能够产生大量炎性细胞，加快炎症反应的进程［21］。陈文慧等［22］研究结果显示，肝纤维化大鼠服用健脾软肝方后，其TGF-β1表达明显降低；在本研究中，治疗后两组NLR、TGF-β1、IL-6 水平均降低，且与对照组比较，观察组降低更明显，与陈文慧研究结果基本相符，表明紫七软肝方可有效降低NLR、TGF-β1、IL-6水平。

机体发生LC 后，其肝细胞受到严重损伤，肝功能也随之降低，因此临床可通过提高患者的肝功能来提高治疗效果。ALT、AST、TBIL、DBIL 是常见的肝功能指标，当其水平显著升高时，则表示患者的肝功能受到了一定的损伤［23-24］。王晓芳等［25］研究显示，LC 患者经加味益气解毒软肝汤和鳖甲软肝丸联合治疗后，其ALT、AST、TBIL 水平显著降低。在本研究中，治疗后两组ALT、AST、TBIL、DBIL 水平均降低，且观察组降低幅度更为显著，表明紫七软肝方可有效改善LC 患者肝功能。分析其可能原因：紫七软肝方中的多种中药均具有提高机体肝功能的作用，如佛手有疏肝理气之功效，茵陈可疏利肝胆，三七有养肝护肝以及促进肝脏蛋白质合成的作用等，因此紫七软肝方对恢复LC 患者肝功能也起到了重要的作用。

综上所述，紫七软肝方能够有效减轻LC 患者氧化应激反应并降低NLR、TGF-β1、IL-6 水平，同时还能有效改善患者的肝功能，值得临床推广应用。