CD138的表达对慢性子宫内膜炎合并不孕症的诊断价值

胡蕾蕾，吴东恩，张梅芳，黄惠兰，陈芷菲，朱珊珊

河源市妇幼保健院病理科，广东 河源 517000

子宫内膜炎为妇科常见疾病，其中急性子宫内膜炎所致的盆腔区域疼痛、月经过多、白带增多、痛经等表现较明显，诊治较容易。慢性子宫内膜炎的病程较长，治疗不彻底易复发，从而影响患者生活质量[1]，且慢性子宫内膜炎缺乏典型症状，临床易被忽视。近年来研究发现子宫内膜炎症能够导致宫腔微环境改变，影响胚胎着床，导致不孕、种植失败、流产等不良妊娠结局[2]。田海英等[3]研究也发现，不明原因的不孕不育和反复流产与慢性子宫内膜炎有直接关系。免疫组织化学染色检查是诊断此类疾病的重要手段，子宫内膜中有组织细胞、淋巴细胞及浆细胞浸润，其中以浆细胞的诊断价值最高[4]。CD138为浆细胞的特异性表层抗原，其免疫组织化学染色检查能够有效显示浆细胞，提高慢性子宫内膜炎的诊断效能[5]。本研究通过分析CD138在慢性子宫内膜炎合并不孕患者中的表达，推测其表达和不孕症患者的关系。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择2019年7月至2020年6月在河源市妇幼保健院接受子宫内膜活检的85例不孕症患者为研究对象，所有患者均接受苏木精伊红染色，依据苏木精伊红染色形态学诊断结果将所有患者分为慢性子宫内膜炎阴性组(简称阴性组，n=38)，慢性子宫内膜炎疑似组(简称疑似组，n=31)和慢性子宫内膜炎阳性组(简称阳性组，n=16)。纳入标准：①患者均已婚，未避孕情况下规律性生活超过1年以上，且未怀孕；②月经周期及性激素正常；③无输卵管积液、卵巢肿瘤及子宫肌瘤等；④就诊前2 d内无阴道用药史；⑤均接受苏木精伊红染色和免疫组化染色检查。排除标准：①男方因素不孕或输卵管因素不孕或不明原因不孕，合并盆腔器质性病变；②其他生殖道感染。慢性子宫内膜炎阴性组患者年龄24~39岁，平均(30.19±2.77)岁；月经周期21~35 d，平均(28.75±2.11)d；不孕时间2~9年，平均(5.67±1.22)年。慢性子宫内膜炎疑似组患者年龄23~39岁，平均(30.34±2.84)岁；月经周期20~36 d，平均(28.52±2.18)d；不孕时间2~10年，平均(5.52±1.03)年。慢性子宫内膜炎阳性组患者年龄23~40岁，平均(30.91±2.65)岁；月经周期21~35 d，平均(29.03±1.96)d；不孕时间2~9年，平均(5.74±1.03)年。三组患者的基线资料比较差异均无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。本研究经医院医学伦理委员会审核批准，所有患者知情并签署知情同意书。

1.2 检查方法 采集所有患者子宫内膜活检组织，予以10%中性福尔马林液固定，脱水，常规石蜡包埋和切片。(1)苏木精伊红染色检查：将切片脱蜡，并浸入苏木苏染色，脱水后用中性树胶封片，于显微镜下观察。(2)免疫组织化学染色检查：采用罗氏BenchMark GX全自动免疫组化染色仪，严格按照说明书设置染色程序，进行自动免疫组织化学检测。染色按照要求在每张玻片上设阳性对照。所用抗体CD138购自福州迈新生物技术开发公司。二氨基联苯胺(DAB)显色，苏木精对比染色。

1.3 结果判定 (1)苏木精伊红染色判定：子宫内膜间质可见浆细胞为慢性子宫内膜炎阳性；子宫内膜间质中可见纤维化伴淋巴细胞浸润，但无浆细胞为慢性子宫内膜炎疑似；无以上表现为慢性子宫内膜炎阴性。(2)免疫组化染色判定：CD138定位于细胞质和细胞膜，浆细胞细胞质弱阳性，细胞膜强阳性。每个400倍高倍镜视野下子宫内膜间质中可见≥5个典型浆细胞诊断为慢性子宫内膜炎。CD138免疫组化染色中无浆细胞或400倍高倍镜下浆细胞<5个为非慢性子宫内膜炎[6]。

1.4 随访观察 所有慢性子宫内膜炎疑似者和阳性者均予以常规抗炎治疗，通过门诊及电话访问等方式随访至少6个月，记录患者妊娠情况。

1.5 统计学方法 应用SPSS18.0软件进行数据分析。计量资料符合正态分布，以均数±标准差(x-±s)表示，组间比较采用t检验，计数资料比较采用χ2检验。均以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 阴性组、疑似组和阳性组患者的CD138表达水平比较 阳性组患者的CD138阳性率明显高于疑似组和阴性组，且疑似组患者的CD138阳性率明显高于阴性组，差异均有统计学意义(P<0.05)，见表1和图1。

表1 阴性组、疑似组和阳性组患者的CD138表达水平比较[例(%)]

图1 CD138免疫组织化学染色检查(均为40×10)

2.2 CD138阴性组与阳性组患者的妊娠情况比较 经6个月随访，CD138阳性组患者的妊娠率为36.00%(9/25)，明显高于CD138阴性组的11.67%(7/60)，差异有统计学意义(χ2=5.388，P<0.05)。

3 讨论

慢性子宫内膜炎为妇科常见疾病之一，大部分患者缺乏特异性症状，也无典型的宫腔镜下表现，临床诊断率较低。有研究报道[7]，近年来子宫内膜炎的发生率呈上升趋势。最近有研究表明[8]，炎症细胞存在细胞毒作用，能够降低精子活动力或引起精子死亡，减少输卵管中精子数量，影响生育，导致不孕。另外，引起炎症的病原体又可激发机体免疫反应，并生成抗体，刺激大量炎性细胞及细胞因子的释放，不利于孕卵着床和胎盘植入及胚胎发育[9]。又有文献报道，慢性子宫内膜炎可影响子宫内膜容受性，为不孕症的危险因素之一，其胚胎转移着床率显著低于未合并慢性子宫内膜炎不孕者[10]。但目前临床有关慢性子宫内膜炎合并不孕症缺乏统一认识及有效处理。

子宫内膜间质细胞中的浆细胞在慢性子宫内膜炎的组织学诊断中有重要作用。但传统苏木精伊红染色时浆细胞的可见度较低，加上浆细胞易与子宫内膜间质的单核细胞及纤维细胞混淆，另外分泌期提取的内膜组织存在间质细胞密度增加及腺上皮水肿样变化，不利于浆细胞鉴别[11]。以上结果表明苏木精伊红染色在浆细胞识别上可能存在一定程度的主观判断偏差，影响临床诊断准确性。

近年来有研究提出CD138作为配体聚糖，是浆细胞的良好标记物，能够直接检测浆细胞，并可排除形态类似细胞的影响，为慢性子宫内膜炎的诊断提供参考依据[12]。生理状态下成人子宫内膜组织中的CD138仅在上皮细胞表达，间质细胞不表达CD138，从而维持子宫内膜上皮细胞。有国外文献表明[13]，CD138免疫组织化学染色检查对内膜间质中浆细胞的识别价值较高。CD138能够结合趋化因子，诱导中性粒细胞在炎症部位聚集，并抑制T细胞迁移，又可调节机体白细胞-内皮细胞反应，从而参与炎症反应，导致滋养层的迁移及侵袭[14]。多种病原菌能够导致宿主细胞表层CD138分子从外功能区脱落，从而增强自身毒性作用。子宫内膜受损时上皮细胞膜外的CD138分子发生脱落，并与细菌或成纤维细胞结合，参与机体内膜组织修复和炎症反应。

本研究中85例不孕症患者均进行了免疫组织化学染色检查，其中慢性子宫内膜炎阳性患者CD138阳性率显著高于可疑组及阴性组，间接提示疑似慢性子宫内膜炎标本经苏木精伊红染色无法识别浆细胞时，CD138免疫组织化学染色检查能够有效显示浆细胞，从而易于分辨浆细胞，利于慢性子宫内膜炎的诊断。建议在常规苏木精伊红染色基础上联合CD138免疫组织化学染色检查，以弥补形态学检查的不足，减少苏木精伊红染色的误诊和漏诊。对于怀疑慢性子宫内膜炎患者建议其进行CD138免疫组织化学染色检查，进一步明确诊断。另外本研究观察发现，CD138阳性者妊娠率显著高于CD138阴性者，考虑通过分析CD138免疫组织化学染色检查能够指导慢性子宫内膜炎不孕症患者的临床治疗，从而改善患者生殖预后。

综上所述，临床通过免疫组织化学染色检查CD138的表达情况可有效识别子宫内膜中浆细胞，为慢性子宫内膜炎合并不孕症的诊断提供参考依据，从而对不孕症的治疗可能有一定指导价值。但本研究的样本量有限，且观察指标不够全面，CD138表达在慢性子宫内膜炎合并不孕症中的价值仍有待更多大规模、多中心的研究进一步论证及分析。