儿童肺炎支原体肺炎外周血T淋巴细胞亚群与细胞因子以及免疫球蛋白的动态探析

沈阳，边兴艳，李季，张鹤

（大连市儿童医院检验科，辽宁 大连 116000）

儿童肺炎支原体肺炎主要由支原体发生感染所导致的肺部疾病，该病发病速度缓慢，临床症状主要表现为发热，目前临床上常使用免疫检测对病情进行检查[1]。但目前关于儿童肺炎支原体肺炎外周血T 淋巴细胞亚群、细胞因子以及免疫球蛋白的动态分析的研究较少。基于此，本研究旨在探讨儿童肺炎支原体肺炎外周血T 淋巴细胞亚群、细胞因子以及免疫球蛋白的动态效果，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选取2018年12月至2020年5月本院收治的儿童支原体肺炎的患儿50例作为观察组，按病情的发展进程分为急性期组和恢复期组，各25例；另选取同期健康儿童50名作为对照组。对照组男23名，女27名；年龄1～12岁，平均（6.04±2.47）岁。观察组男24 例，女26 例，年龄2～11 岁，平均（5.81±3.10）岁；住院时间2～21 d，平均（11.20±2.13）d。两组临床资料比较差异无统计学意义，具有可比性。所有研究对象家属均签署知情同意书，本研究获得医院伦理委员会审核批准。

1.2 纳入及排除标准 纳入标准：具有发热，咳嗽，呼吸困难等临床症状[2]；符合支原体肺炎的临床诊断标准；具有呼吸道感染症状；无用药过敏史[3]。排除标准：具有先天性免疫障碍；治疗时意识不清晰，具有精神性疾病；心、肺、肾等重大器质性疾病[4]。

1.3 方法 3 组均进行样本采集，入院时抽取静脉血5 ml，分为2 个试管分装。1 支试管进行抗凝，用于T 淋巴细胞亚群的检测[5]。另一试管不进行抗凝，离心处理后收集血清，-20 ℃冷冻保存。使用流式细胞仪检测T淋巴细胞亚群，取2支试管加入3组的抗凝血[6]。分别加入抗体进行充分搅拌均匀，放置阴暗处0.5 h，2 支试管各加入溶血剂2 ml 充分搅拌，再放入暗处10 min。通过机器离心5 min，去除上清液，洗涤3次，之后使用临床分析软件进行数据分析。抽空腹静脉血2 ml测定细胞因子，放置在抗凝血管内，离心10 min，吸取上清液，之后检测细胞因子浓度[7]。抽取所有研究对象空腹静脉血2 ml 检测免疫球蛋白，进行抗凝处理，离心10 min 后，吸取上清液，采用免疫比浊的方法测定血清免疫球蛋白的浓度。

1.4 观察指标 ①比较3 组T 淋巴细胞亚群占比，包括 CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+、NK 细胞以及 B细胞。②比较3 组血清细胞因子水平变化，包括γ-干扰素（IFN-γ）、白细胞介素-4（IL-4）、辅助性T细胞1/辅助性T细胞2（Th1/Th2）。③比较3组血清免疫球蛋白的动态变化，包括免疫球蛋白G（IgG），免疫球蛋白A（IgA），免疫球蛋白M（IgM）。

1.5 统计学方法 采用SPSS 20.0统计学软件进行数据处理，计量资料以“”表示，行F检验，计数资料以[n（%）]表示，行χ2检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 3 组T 淋巴细胞亚群占比比较 检测后，急性期组CD3+、CD4+、CD4+/CD8+均低于恢复期组和对照组（P＜0.05），NK 细胞比例高于恢复期组和对照组（P＜0.05），恢复期组CD8+与B 细胞的占比与对照组比较差异无统计学意义，见表1。

表1 3组T淋巴细胞亚群占比比较（，%）Table 1 Comparison of T lymphocyte subsets in three groups(,%)

表1 3组T淋巴细胞亚群占比比较（，%）Table 1 Comparison of T lymphocyte subsets in three groups(,%)

注：CD3+，成熟T淋巴细胞；CD4+，诱导性T细胞/辅助性T细胞；CD8+，抑制性T细胞/细胞毒性T细胞；NK细胞，自然杀伤细胞；B细胞，B淋巴细胞

组别急性期组恢复期组对照组F值P值B细胞11.24±2.11 12.01±2.00 11.29±2.35 0.613 0.235例数25 25 50 CD3+62.14±2.11 69.14±3.21 73.25±2.05 4.258 0.021 CD4+31.45±2.55 36.14±2.00 43.25±2.01 6.568 0.000 CD4+/CD8+1.12±0.25 1.36±1.00 1.96±1.47 5.264 0.018 NK细胞28.23±2.44 16.24±2.14 18.22±1.24 5.895 0.016 CD8+28.25±2.11 28.36±2.33 27.92±2.04 0.547 0.336

2.2 3 组血清细胞因子水平比较 检测后，急性期组IFN-γ、IL-4、Th1/Th2 均高于恢复期组和对照组（P＜0.05），恢复期组IFN-γ、IL-4、Th1/Th2与对照组比较差异无统计学意义，见表2。

表2 3组血清细胞因子水平比较（）Table 2 Comparison of serum cytokine levels among the three groups()

表2 3组血清细胞因子水平比较（）Table 2 Comparison of serum cytokine levels among the three groups()

注：IL-4，白细胞介素-4；Th1/Th2，辅助性T细胞1/辅助性T细胞2；IFN-γ，γ-干扰素

组别急性期组恢复期组对照组F值P值IFN-γ（ng/L）39.12±3.24 20.35±2.14 21.44±2.15 6.145 0.000例数25 25 50 IL-4（ng/L）28.12±2.33 11.24±1.59 12.55±2.41 6.350 0.000 Th1/Th2（%）3.25±2.48 1.25±1.44 1.56±1.55 5.754 0.000

2.3 3 组血清免疫球蛋白的动态变化比较 检测后，恢复期组血清IgG 水平高于急性期组和对照组（P＜0.05），急性期组血清IgG水平与对照组比较差异无统计学意义；对照组血清IgA 水平高于急性期组和恢复期组（P＜0.05），急性期组血清IgA水平与恢复期组比较差异无统计学意义；急性期组血清IgM水平高于对照组和恢复期组（P＜0.05），对照组血清IgM水平与恢复期组比较差异无统计学意义，见表3。

表3 3组血清免疫球蛋白的动态变化比较（，g/L）Table 3 Dynamic changes of serum immunoglobulin among three groups(,g/L)

表3 3组血清免疫球蛋白的动态变化比较（，g/L）Table 3 Dynamic changes of serum immunoglobulin among three groups(,g/L)

注：IgG，免疫球蛋白G；IgA，免疫球蛋白A；IgM，免疫球蛋白M

组别急性期组恢复期组对照组F值P值IgM 3.24±2.11 1.26±0.69 1.29±0.24 4.354 0.000例数25 25 50 IgG 9.24±2.15 12.36±2.11 9.25±2.01 5.234 0.000 IgA 1.25±0.24 1.31±0.26 3.21±1.25 4.668 0.000

3 讨论

支原体肺炎的感染病毒支原体小于细菌，能进行自我繁殖[8]。目前，婴幼儿发病率较高，除肺炎外，还会引起多种并发症，对体内器官造成损害，危及患者的生命安全，当支原体入侵机体，会通过释放毒素损害细胞，刺激B细胞产生自身抗体[9]，进一步导致患者的免疫功能发生紊乱。目前临床多使用免疫功能动态变化进行检测，有助于后期治疗[10]。本研究结果表明，检测后，急性期组CD3+、CD4+、CD4+/CD8+均低于恢复期组和对照组（P＜0.05），NK 细胞比例高于恢复期组和对照组（P＜0.05），与恢复期组CD8+与B 细胞占比与对照组比较差异无统计学意义，说明当患儿感染支原体肺炎时，体内细胞亚群的含量发生紊乱[11]。本研究结果表明，检测后，急性期组IFN-γ、IL-4、Th1/Th2 含量均高于恢复期组和对照组（P＜0.05），恢复期组IFN-γ、IL-4、Th1/Th2含量与对照组比较差异无统计学意义。说明患儿感染支原体肺炎时，机体内的细胞因子含量发生改变，对患儿机体造成一定影响。T 淋巴细胞在胸腺中发育成熟，参与机体免疫反应，在免疫功能中起调节作用。机体在感染病原体后体内的细胞因子会被激活，同时，清除病原体。免疫球蛋白主要由B细胞产生，具有特异性，能调节体内的免疫紊乱现象，对临床治疗起促进作用[12]。本研究结果表明，检测后，恢复期组血清IgG水平高于急性期组和对照组（P＜0.05)，急性期组血清IgG水平与对照组比较差异无统计学意义；对照组血清IgA水平高于急性期组和恢复期组（P＜0.05），急性期组血清IgA水平与恢复期组比较差异无统计学意义；急性期组血清IgM水平高于对照组和恢复期组（P＜0.05），对照组血清IgM水平与恢复期组比较差异无统计学意义。说明当患儿感染支原体肺炎时，机体内免疫功能发生紊乱，随病情的发展，免疫状态发生变化。

综上所述，患儿感染支原体肺炎时，机体内免疫功能发生紊乱，随病情的发展，免疫状态发生变化，临床上对幼儿采取免疫监测，可为疾病的诊断以及后期治疗提供依据。