HPV E6/E7mRNA检测在宫颈病变中的诊断价值

冯琳，高慧芬，潘红，施艳梅，林琳，张慧

（曲靖市妇幼保健院妇产科，云南 曲靖 655000）

目前，女性健康备受关注，而宫颈病变属女性较为典型的综合型疾病，包括宫颈损伤、炎症、畸形及内膜异位症等，其中危害最大的为宫颈癌。宫颈癌是临床常见妇科恶性肿瘤，该病发病率较高且病情恶劣，严重影响患者身体健康[1]。近年来，我国宫颈疾病的发病率逐渐呈年轻化趋势发展，发病率逐年升高，实施有效防控宫颈疾病的措施具有重要意义。高危型人乳头瘤病毒（HPV）是引发宫颈疾病的主要因素，与患者长期、持续感染该病毒密切相关[2]。研究显示，大部分患者感染高危型HPV 病毒后0.5～1年内可自行恢复至阴性，存在一次性感染情况，但可自行恢复健康[3-4]。但部分患者因感染持续时间过长等其他因素影响，极易引发各类宫颈病变甚至宫颈癌，且致死率较高。故实施积极、早期的检测措施可有效反映病毒的存在，对于预防宫颈病变类疾病及宫颈癌具有重要的临床意义[5]。本研究旨在探究HPV E6/E7mRNA 检测在宫颈病变中的诊断价值，分析HPV E6/E7mRNA 检测与宫颈病变的关系，提升宫颈癌筛查临床价值，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选取2019 年3 月至2020 年12 月于本院行宫颈病变诊断及治疗的200 例患者的临床资料，基于诊断方法分为对照组和观察组，每组100 例。对照组年龄 25～46 岁，平均年龄（35.6±1.4）岁。观察组年龄26～48 岁，平均年龄（36.5±1.2）岁。两组临床资料比较差异无统计学意义，具有可比性。本研究获得医院伦理委员会审核批准纳入标准：活检同期行HPV E6/E7mRNA 检测；患者及家属均签署知情同意书。排除标准：哺乳期或近期使用激素；既往宫颈癌前病变史；因两性疾病切除子宫。

1.2 方法 避开患者月经期，3 d 内无性生活及阴道冲洗、上药操作，选取宫颈鳞柱上皮交界处作为采样点，使用专业采样器以顺时针方向旋转3～5圈，并将所采样本放入标本保存液中，等待专业人员检测处理。对照组采用液基细胞学检查方法，将脱落细胞系统处理后制片、固定和染色后进行镜检，并根据伯塞斯达诊断系统（2001年修订）进行标本判读，其结果分为非典型鳞状细胞、上皮内病变细胞、高度鳞状上皮内病变和低度鳞状上皮内病变。细胞学结果≥ASCUS 阳性（+），＜ASCUS 为阴性。观察组使用HPV E6/E7mRNA 检测方法，应用杂交信号方法核酸检测技术，定量检测mRNA 数量，并交由电脑进行数据分析处理。试验所选宫颈细胞标本经历过严格的漂洗、缓冲、信号方法、冷光仪检测等操作步骤，其结果用RLUs为单位显示，阳性数据为超过发光阀值（CO）。试验共可检测14种高危型HPV病毒，此处不做具体分型。

1.3 观察指标 依据《医学统计学》第四版，计算两组阳性检出率及不同宫颈病变级别中HPV E6/E7mRNA表达水平。

1.4 统计学方法 采用SPSS 21.0统计学软件进行数据分析，计量资料以“”表示，行t检验，计数资料以[n（%）]表示，行χ2检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组阳性检出率比较 观察组阳性检出率显著低于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05），见表1。

表1 两组阳性检出率比较[n（%）]

2.2 不同病变级别中HPV E6/E7mRNA 表达水平比较 随着病理级别的不断加重，HPV E6/E7mRNA 的拷贝值与宫颈病变程度呈正相关（r=0.498），差异有统计学意义（P＜0.05），见表2。

表2 两组不同病变级别中HPV E6/E7mRNA表达水平比较

3 讨论

宫颈癌是危害女性健康的常见恶性肿瘤之一，严重威胁女性群体的生命健康。近年来，随着我国经济的快速发展，受性观念逐渐开放和男女权利平等因素的影响，女性宫颈疾病的发病率呈逐年升高趋势[6]。目前，我国女性每年新发宫颈癌疾病病例约占世界发病率的33%。故及时予以相关检测，防控宫颈疾病的发生，是提高女性健康，促进社会经济平稳发展的有效措施。尽管现如今医学界在不断规范HPV阳性处理措施，但假阳性高仍制约着宫颈癌疾病诊断准确性的发展，给宫颈癌筛查带来困惑[7]。目前，临床多采用细胞学检测宫颈癌病毒的方法，通过观察患者机体宿主细胞的形态状况，查看是否有异常问题为诊断标准。细胞学检查已有60多年的临床应用经验，长期以来为女性患者的宫颈癌疾病筛查工作做出了突出贡献。但随着细胞学检查的开展，逐渐发现细胞学检查因阅片医生的不同，存在较严重的主观倾向，且由于宫颈病变类疾病较多，其诊断准确率存在差异[8]。为进一步提高宫颈癌检测准确率，有关HPV检测的新型方法逐渐兴起，细胞学筛查已不能作为唯一评判标准。HPV E6/E7mRNA 属于肿瘤标志物，是宫颈癌疾病发生、发展的必要条件。因此，HPV E6/E7mRNA检测可作为诊断宫颈病变的重要参考指标。据研究证实，患者受HPV 病毒持续感染时，宿主染色体会与病毒相结合，E6/E7的癌基因被刺激激活，转而生成E6/E7癌细胞。患者机体内抑癌蛋白和癌蛋白相结合，引发细胞调节失控，进而发展为癌变[9]。而当患者被一次性感染HPV 病毒时，其体内HPV E6/E7mRNA 被抑制，呈低表达或不表达状态，病毒DNA 持续游离，进而无法产生癌蛋白。由此可见，不论是持续性感染还是一次性感染，HPV E6/E7mRNA 均可作为宫颈病变诊断的重要肿瘤标志物，具有较高的临床诊断价值[10]。本研究结果显示，两组阳性检出率方面比较差异有统计学意义（P＜0.05），HPV E6/E7mRNA的CINⅠ阳性检出率较低，分析原因主要与大多数CINⅠ可自行消退，其基因整合度相对较低，导致机体mRNA的表达未达到足够的检测数值。不同宫颈癌病变级别中HPV E6/E7mRNA 的表达水平比较差异有统计学意义（P＜0.05）。表明，随着患者宫颈癌病变程度加剧，患者病情恶化，HPV E6/E7mRNA的拷贝数值随之增高，因此，检测HPV E6/E7mRNA 水平对宫颈癌疾病的风险评估具有一定意义。

综上所述，在宫颈病变中应用HPV E6/E7mRNA检测方式效果显著，能及时发现HPV病毒病给予阻断治疗。相较于细胞学检查，HPV E6/E7mRNA检测准确性更高，在宫颈癌筛查和诊断工作中具有较高的应用价值。