痛风性关节炎与外周血T 淋巴细胞关系的研究

张昊 刘畅 邓瀚文 戴冰冰

近年来随着人们生活水平的提高,痛风性关节炎(gouty arthritis,GA) 的发病率逐年升高,其发病机制也广泛受到关注,既往研究表明,痛风性关节炎是以嘌呤代谢异常导致的一种炎症及免疫性疾病,严重者可导致肾功能不全甚至残疾［1］。近些年对痛风性关节炎免疫机制研究发现,外周血CD4+T 淋巴细胞亚群中的辅助性T 细胞17(helper T cell 17,Th17)、调节性T 细胞(regulatory T cell,Treg)及两者之间的平衡在痛风的发生发展中发挥重要作用,并与关节症状的严重程度相关［2-5］。本研究通过检测不同时期痛风性关节炎患者血清Th17 与Treg 水平,探讨T 淋巴细胞与痛风性关节炎的关系,进而指导临床诊疗。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2018年9月～2020年11月于大连市中心医院风湿免疫科就诊的101例痛风性关节炎患者作为痛风性关节炎组,另将同时期于大连市中心医院体检的101例健康志愿者作为健康对照组。痛风性关节炎组男92例,女9例；平均年龄(55.2±10.6)岁；所有患者均符合2015年美国风湿病学会(ACR)与欧洲抗风湿病联盟(EULAR) 公布的痛风性关节炎分类诊断标准；痛风性关节炎分为急性期及缓解期,急性期为急性发作24 h 内的患者,缓解期为急性发作后疼痛及关节肿痛缓解的患者,约急性期后7～10 d。对照组男 92例,女9例；平均年龄(56.4±6.4)岁。两组性别、年龄一般资料比较差异无统计学意义(P＞0.05),具有可比性。该研究取得医院伦理委员会批准,且所有参与者均知情同意。排除标准：①均排除可影响免疫功能的疾病及药物,主要包括近1 周内使用抗生素以及近6 个月内应用免疫抑制剂患者；②患有心、肺、肾等系统严重功能不全或影响生存的重大疾病者；③其他结缔组织病、恶性肿瘤、急慢性感染性疾病、贫血者；④妊娠或哺乳期；⑤继发于其他疾病的继发性痛风性关节炎患者。

1.2 方法 采集两组空腹12 h 后肘静脉血4 ml,采用美国Beckman Coulter AU5400 全自动生化仪检测血清样本的肝功能、肾功能和免疫学指标,全血细胞计数指标采用Sysmex XE-2100 进行测定。再次采集两组清晨空腹外周静脉血2 ml 于肝素抗凝管中,并于4 h 内完成检测,FC500 流式细胞仪(美国Beckman Coulter公司)及CXP 分析软件分析结果,获得淋巴细胞亚群。

1.3 观察指标及判定标准 比较两组尿酸、肌酐、低密度脂蛋白胆固醇水平及体质量指数,外周血Th17、Treg 及Th17/Treg；比较痛风性关节炎急性期与缓解期患者外周血Th17、Treg、CRP 水平及VAS 评分。采用VAS 评价痛风性关节炎急性期与缓解期患者的疼痛程度,具体方法为：0～10 横线,其中0 表示无痛,10 表示剧痛,以患者主观自我感觉在横线上划一记号,评分越高代表疼痛越重［6］。

1.4 统计学方法 采用SPSS22.0 统计学软件进行数据统计分析。计量资料以均数±标准差 ()表示,采用t检验；计数资料以率(%)表示,采用χ2检验。P＜0.05 表示差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 两组尿酸、肌酐、低密度脂蛋白胆固醇水平及体质量指数比较 痛风性关节炎组尿酸、肌酐、低密度脂蛋白胆固醇及体质量指数均高于健康对照组,差异有统计学意义(P＜0.05)。见表1。

表1 两组尿酸、肌酐、低密度脂蛋白胆固醇水平及体质量指数比较 ()

注：与健康对照组比较,aP＜0.05

2.2 两组外周血Th17、Treg 及Th17/Treg 比较 痛风性关节炎组血清Th17、Th17/Treg 水平均高于健康对照组,差异有统计学意义(P＜0.05)；两组血清Treg 水平比较差异无统计学意义(P＞0.05)。见表2。

表2 两组外周血Th17、Treg 及Th17/Treg 比较 ()

表2 两组外周血Th17、Treg 及Th17/Treg 比较 ()

注：与健康对照组比较,aP＜0.05

2.3 痛风性关节炎急性期与缓解期患者外周血Th17、Treg、CRP 水平及VAS 评分比较 随访完成测试的48例痛风性关节炎患者急性期血清Th17、CRP 水平及VAS 评分均高于缓解期,差异有统计学意义(P＜0.05)；急性期Treg 水平与缓解期比较差异无统计学意义(P＞0.05)。见表3。

表3 痛风性关节炎急性期与缓解期患者外周血Th17、Treg、CRP 水平及VAS 评分比较(,n=48)

表3 痛风性关节炎急性期与缓解期患者外周血Th17、Treg、CRP 水平及VAS 评分比较(,n=48)

注：与缓解期比较,aP＜0.05

3 讨论

痛风(gout)是多种原因引起的代谢性免疫系统疾病,关节炎由单钠尿酸盐(monosodium urate,MSU)晶体沉积所致,以痛风性关节炎为突出临床特点的晶体相关性关节病,属于代谢性风湿病范畴。随着痛风动物模型的研究和患者临床研究的不断深入,痛风的炎症激活机制得到了进一步的揭示。研究表明,促炎因子如内皮素-1(ET-1)及血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白介素(IL-6)均参与MSU 诱导的痛风炎症过程［7］。而痛风的免疫细胞,包括中性粒细胞、单核/巨噬细胞和淋巴细胞在痛风的发病机制中都起着重要的作用。最近研究还表明,针对促炎性T 细胞亚群或其相关细胞因子的治疗策略可以改善MSU 晶体诱导的小鼠关节炎［8］。多项研究强调了T 细胞亚群在痛风发病机制中的新作用。此外,T 细胞在痛风性关节炎中的重要作用可能为严重高尿酸血症患者无急性痛风发作或MSU 晶体沉积的临床证据提供了一些解释,进而在痛风性关节炎的发病机制中具有重要意义,T 淋巴细胞亚群在多种自身免疫性疾病中均有主要致病作用,主要产生及激活细胞因子,进一步促进B 细胞分化产生多种自身抗体等,CD4+T 淋巴细胞作为T 淋巴细胞活化后的主要亚群,参与多种免疫系统疾病,包括类风湿关节炎、强直性脊柱炎等,但CD4+T 淋巴细胞及其亚型对痛风发病机制尚无大样本研究报道［9］。有研究表明,痛风患者CD4+T 细胞其中亚型的表达具有年龄特异性,年龄相关的CD4+T 细胞亚群的生长增加有助于痛风合并肾功能损害,这也是首次研究结果提示T 细胞亚群与痛风及器官恶化的关系［10］。本研究结果显示,痛风性关节炎组血清Th17、Th17/Treg 水平均高于健康对照组,差异有统计学意义(P＜0.05)；两组血清Treg 水平比较差异无统计学意义(P＞0.05)。由此提示血清Th17 参与了痛风性关节炎的发病过程,而血清Treg 对痛风的影响暂未确定。同时作者还研究了急性期和缓解期痛风性关节炎患者血清中各种标志物的变化,结果显示,痛风性关节炎患者急性期血清Th17、CRP 水平及VAS评分均高于缓解期,差异有统计学意义(P＜0.05)；急性期Treg 水平与缓解期比较差异无统计学意义(P＞0.05)。痛风性关节炎组尿酸、肌酐、低密度脂蛋白胆固醇及体质量指数均高于健康对照组,差异有统计学意义(P＜0.05)。由此提示血清Th17 与痛风性关节炎患者的疼痛程度有关系,可能成为评估疾病严重程度及治疗效果的指标。另外痛风性关节炎患者的炎症指标水平及血脂均较高,证实了痛风性关节炎患者多数存在高血脂、炎症反应和血管内皮损伤,而这些因素可能影响高尿酸血症发展［11］。

综上所述,痛风性关节炎是一类与免疫因子及炎症发生有关的疾病,其发病机制复杂,多种炎性指标及炎性因子参与发病及发展,探究外周血T 淋巴细胞在痛风性关节炎发病过程中的变化有助于阐明其发病机制,可能更好预估病情及疗效。本次研究目前处于初始阶段,下一步通过对上述患者进行继续随访,探究不同时期痛风性关节炎患者外周血CD4+T 细胞亚群的变化,明确CD4+T 细胞亚群对疾病发展的指导作用。