中草药益生菌复合物对鸡免疫能力的影响

陈潇飞，谭德俊，林先明，李 蓉，谢骏辉，艾伦强，王国贵，马 进，向极钎，朱云芬

（1.恩施土家族苗族自治州农业科学院，湖北恩施 445000；2.湖北省农业科学院中药材研究所，湖北恩施 445000）

抗生素在养殖过程中起到重要的作用，可以有效防治病菌感染，对微生物病原菌有高效的抑制作用［1］。养殖过程中抗生素被滥用的情况较为常见，较多的抗生素被用来促进饲料转化率的提升，致使畜禽产品中抗生素含量超标，危害人类健康。从2020 年1 月1 日起，国家明令禁止在饲料中添加抗生素，对于动物性食品安全的改善起到关键的推进作用。国内畜禽养殖抗生素替代品的研究处于初步阶段，寻求能控制成本、效果稳定、易于实施的替代抗生素新品，是畜牧从业者所关注的问题。中国传统的中草药在提升免疫、抗病杀菌等方面有着独到的作用。中草药具有减少病菌耐药性、改善肠道菌群的特点［2，3］。作为天然植物源药用资源，中草药有效含量较低、作用机制复杂，制约着中草药在无抗养殖中的研究应用。益生菌对于改善肠道菌群，提高微生物菌群多样性，增强畜禽抗病能力也较为显著［4］。本研究利用中草药和益生菌在提升动物机体免疫方面的独特优势，结合不同的调控机制，对景阳鸡实施无抗干涉试验，为应用中草药益生菌复合物促进动物机体免疫能力的提升提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 试验材料

枯草芽孢杆菌（1010CFU/100g）由恩施清江生物工程有限公司提供，土霉素和试验所需的中草药由湖北元昌药业有限公司提供。

景阳鸡由湖北恩施建始县景阳鸡保种场提供，鸡大小一致，30 日龄，共计180 羽。

1.2 试验方法

试验分为3 组，每组60 羽，分别为空白对照组、抗生素组和中草药益生菌复合组（中益组）。中草药、益生菌复合比例分组见表1。饲养方式为平养，饲养至180 日龄，每组随机挑取6 羽，使用肝素钠抗凝真空采血管颈静脉采血，随后进行血常规测定，同时分离出血清，进行免疫球蛋白G（IgG）、白细胞介素1（IL-1）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）等抗炎因子测定；采集胸腺、脾脏、法氏囊进行器官免疫指数测定。器官免疫指数为免疫器官的重量占体重的比例［5］。试验期间所有试验鸡苗做好程序免疫，并进行系统饲养记录。

表1 各组添加成分及比例

1.3 数据分析

采用SPSS18.0 软件进行One-way ANOVA 显著性分析，采用LSD 法进行多重比较。统计结果采用“平均值±标准差”（Mean±SD）的形式表示，以P<0.05 作为差异显著性判断标准，P<0.01 作为差异极显著性判断标准。

2 结果与分析

2.1 组间成活率的比较

根据饲养记录，饲养180 d 后成活率如图1 所示，中益组88.33%>抗生素组83.33%>空白对照组78.33%。

图1 组间成活率的比较

2.2 器官免疫指数的比较

中草药益生菌复合物对景阳鸡免疫器官的发育起一定作用（表2），主要表现在法氏囊指数上，中益组和抗生素组法氏囊指数均高于对照组，中益组与抗生素组无显著性差异（P>0.05）；在脾脏指数上，中益组与对照组存在显著性差异（P<0.05）；三者在胸腺指数上无显著性差异（P>0.05）。

表2 各组免疫器官的重量及免疫指数

2.3 血常规指标的比较

血常规指标见表3，中益组、抗生素组与对照组间白细胞数无明显差异（P>0.05）；中益组、抗生素组均与对照组红细胞数存在显著差异（P<0.05）；中益组与抗生素组、对照组血红蛋白差异显著（P<0.05）；三者间血小板数无显著性差异（P>0.05）。

表3 各组血常规指标测定结果

2.4 抗炎因子及抗氧化性能的比较

抗炎因子及抗氧化性能的比较见表4，组间差异极显著（P<0.01），抗炎因子检测结果显示，中益组含量均显著高于抗生素组（P<0.01）。图2 直观地显示出该种差异。

图2 IgG、IL-1、SOD、GSH-px 含量测定结果

表4 各组血清抗炎因子测定结果 （单位：μg/mL）

3 小结与讨论

中草药益生菌复合物作为饲料添加剂应用在景阳鸡无抗养殖中，能不同程度地提高景阳鸡成活率，促进免疫器官发育，增强其抗炎和抗氧化能力，可以全面提升景阳鸡的免疫能力。

3.1 中草药益生菌复合物对景阳鸡成活率的影响

中草药提高动物机体抗病能力的研究较多，其作用机理主要集中在抗病毒、杀菌、增强自身体液免疫和细胞免疫［6］，直接反映的结果就是动物成活率的提高。益生菌对改善动物肠道健康，提升动物免疫能力效果较为显著。本研究中，饲喂中草药益生菌复合组景阳鸡的成活率高于抗生素组和对照组，吴诗樵等［7］在对扬州鹅饲喂研究中使用中草药饲料添加剂，显著提高了扬州鹅的成活率，本研究的结果与之相符。中草药益生菌的配合组方在本试验中对提升景阳鸡的成活效果显著。

3.2 中草药益生菌复合物对景阳鸡器官免疫指数的影响

脾脏是最大的外周免疫器官，当动物机体发生免疫应答时，能够参与吞噬病原菌，同时脾脏还是体液免疫和细胞免疫的应答场所［8］。胸腺和法氏囊是重要的中枢免疫器官，而法氏囊属于禽类特有器官，能够分化产生淋巴细胞［9，10］。脾脏、胸腺和法氏囊的发育状况能够直接反映出动物机体免疫状况，免疫器官指数的高低决定了淋巴细胞的增值能力，机体免疫功能在一定范围内与器官指数呈正相关［11］。本研究中，中益组法氏囊指数高于对照组，与抗生素组相当（P<0.05），表明中草药和益生菌复合能够诱导禽类法氏囊发育，增强景阳鸡的免疫能力。

3.3 中草药益生菌复合物对景阳鸡血常规指标的影响

血常规指标反映了血液中细胞水平的变化。当抗原入侵后，抗原通过组织黏膜表面的M 细胞以胞饮方式进入细胞后对红细胞进行分解破坏，致使红细胞数量减少［12］，机体发生免疫应答，刺激白细胞数急剧增多，吞噬病原菌维护机体的免疫平衡。赵德建［13］在研究小鼠沙门氏菌攻毒试验中发现，攻毒后小鼠红细胞数减少，白细胞数增多，进行中药复方干涉后，红细胞数量逐渐恢复。这与本试验结果相似，景阳鸡疫苗免疫后发生炎症反应，白细胞数增多，通过中草药益生菌调节，细胞免疫应答，抑制抗原激增，防止红细胞数下降。

3.4 中草药益生菌复合物对景阳鸡抗炎因子及酶活性的影响

机体在代谢过程中会生成多种自由基，诱发脂质过氧化反应，致使细胞发生氧化应激损伤［14］。而动物机体内存在的超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶可以清除体内过多的自由基，维持自由基代谢平衡，修复氧化损伤。免疫球蛋白是受抗原刺激后由B 细胞分泌的能与对应抗原结合的球蛋白，是参与体液调节的重要成分［15］。白细胞介素1 参与免疫调节，刺激T 细胞活化促进B 细胞增殖并促使抗体产生，反映了机体的抗炎能力［16］。研究显示，中益组IgG、IL-1、SOD、GSH-px 含量均极显著高于对照组和抗生素组（P<0.01）。研究表明，添加中草药和益生菌的复合物后，景阳鸡的抗氧化能力显著增强，体液免疫水平显著升高，机体抗炎能力得到明显加强。