川西合耳菊质量标准研究*

达娃卓玛 达娃普尺 次旦多吉

（西藏自治区食品药品检验研究院中药（藏药）质量控制重点实验室，西藏 拉萨 850005）

藏药川西合耳菊为菊科合耳菊属植物川西合耳菊Synotis solidaginea(Hand.-Mazz.) C.Jeffrey et Y.L.Chen 的干燥地上部分，藏文名“尤库星”。参考《藏药晶镜本草》［1］，藏药材“尤库星”认定为双花千里光实属汉文和拉丁名翻译错误，该植物实际应为是川西合耳菊，《中国植物志》中已修订。《中国植物志》及《藏药志》中记载该药材具有清热、解毒、治疮、接骨等功效，其饮片在西藏地区主要用于愈合创伤、清热解毒、清肝胆诸热等症状［2-3］。据文献报道川西合耳菊主要含黄酮类、酚酸类、倍半萜类等化学成分［4-8］，具有抗炎、抗菌、抗病毒、抗肿瘤、抗衰老、抗抑郁、抗氧化等药理作用［9-11］。该植物在治疗外伤及美容方面等也有较好的开发价值。本实验首次对该药材质量标准进行研究，并本着“正本清源”的目的，对藏药川西合耳菊药材正确基原进行说明，为全面评价和控制该药材质量提供参考。

1 仪器与试药

1.1 仪器

超声波清洗仪，超级循环恒温水浴箱：山西海金沙科技有限公司，型号：PTC-6；电热鼓风干燥箱：上海一恒科学仪器，型号：DHG-9242A;马弗炉：Yamato，型号：Fo610C;十万分之一天平：瑞士梅特勒公司，型号：AB204-S；十万分之一天平：瑞士梅特勒公司，型号：XP504；万用电炉：北京中兴伟业世纪仪器有限公司，型号：DL-1；纯水/超纯水一体机：默克密理博，型号：Direct 16。

1.2 试药

本实验收集到的10批川西合耳菊药材，鉴定为菊科合耳菊属植物川西合耳菊的干燥地上部分。绿原酸购自中国食品药品检定研究院，批号：110753-202018。纯度：96.1%；自制超纯水；分析甲醇、分析丙酮、分析乙酸丁酯、分析甲酸、分析乙醇、三氯化铁、铁氰化钾、三氯化铝。

表1 川西合耳菊药材信息

2 方法与结果

2.1 显微鉴别

2.1.1 川西合耳菊生药粉末。本品粉末黄绿色，用水合氯醛透化，稀甘油装片，置显微镜下观察：叶表皮细胞表面观为呈不规则形或类长方形，细胞壁稍微弯曲，气孔为不定式。纤维成束，导管主要有螺纹导管和具缘纹孔导管，直径19.04～45.43μm。花粉粒黄色或淡黄色，类球形，直径25.57～32.70μm，具3 个萌发孔，表面具尖刺。冠毛多列性分枝状毛，各分枝单细胞先端渐尖，见图1。

图1 川西合耳菊生药粉末

2.1.2 茎横切面。类圆形，表皮细胞1列；木质部管胞多数，射线宽2～5列细胞；髓部由数十列细胞组成的环髓带包围，髓部薄壁细胞较大。中心无导管，见图2。

图2 川西合耳菊茎横切面

2.1.3 靠近根的茎横切面木栓层为2～5列细胞；韧皮部较宽，可见石细胞群；形成层明显，成环；木质部射线较窄，导管呈环状排列，见图3。

图3 川西合耳菊靠近根的茎横切面

2.1.4 叶横切面。上、下表皮细胞各1 列，长方形；叶肉组织不等面型，栅栏组织1～2列，不通过主脉；主脉维管束双韧型，木化，见图4。

图4 川西合耳菊叶横切面（上方）、叶横切面局部放大图（左方）

2.2 薄层鉴别

取本品粉末0.5g，加甲醇50ml，超声处理40min，滤过，作为供试品溶液。另取绿原酸对照品，加甲醇制成每1mL 含0.1mg 的溶液，作为对照品溶液。吸取上述供试品溶液6～10μl、对照品溶液5μl 分别点于同一硅胶G 薄层板上，以乙酸丁酯-甲酸-水（7∶2.5∶2.5）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点;在与对照品色谱相应的位置上，显相同的蓝色荧光斑点（图略）。

2.3 水分测定

共测定10 批次川西合耳菊，水分含量最低值8.9%，最高值10.9%（见表2），水分平均值为9.7%.以平均值上浮20%为上限，向上取整数，暂定本品水分不得过12.0%.10 批样品水分含量均在规定范围内，合格率为100%.因此拟定川西合耳菊水分含量不得过12.0%.

表2 川西合耳菊水分测量结果

2.4 总灰分测定

共测定10 批次川西合耳菊，总灰分最低值7.63%，最高值为9.27%（见表3），总灰分平均值为9.8%.以平均值上浮20%为上限，向上取整数，暂定本品总灰分不得过10.0%.10 批样品总灰分含量均在规定范围内，合格率为100%.因此拟定川西合耳菊总灰分含量不得过10.0%.

表3 川西合耳菊总灰分测量结果

2.5 酸不溶性灰分

共测定10批次川西合耳菊，酸不溶性灰分最低值0.51%，最高值0.88%（见表4），酸不溶性灰分平均值为0.61%.以平均值上浮20%为上限，向下取整数，暂定本品酸不溶性灰分不得过0.73%.10 批样品酸不溶性灰分含量均在规定范围内，合格率为100%.因此拟定川西合耳菊酸不溶性灰分含量不得过0.7%.

表4 川西合耳菊酸不溶性灰分测量结果

2.6 浸出物测定

热浸法测定，用水作溶剂，共测定10 批次川西合耳菊浸出物，结果见表5。可知10 批川西合耳菊的浸出物在22.85%～40.09%之间，平均值为35.01%.以平均值下浮20%为上限，向下取整数，暂定本品浸出物含量不得小于28.0%.10 批样品中酸浸出物含量有9批在规定范围内，合格率为90%.因此拟定川西合耳菊照水溶性浸出物测定法项下的热浸法测定浸出物含量不得小于28.0%.

表5 川西合耳菊浸出物含量测量结果（按干燥品计）

3 讨论和结论

3.1 讨论

3.1.1 薄层色谱鉴别。

3.1.1.1 不同展开剂考察。共考察了三种不同类型的展开系统：36%乙酸、乙酸乙酯-丙酮-甲酸-水（7∶3∶1∶1.2）、乙酸丁酯-甲酸-水（7∶2.5∶2.5），结果显示，在乙酸丁酯-甲酸-水（7∶2.5∶2.5）体系下，分离效果好，Rf值适中，展开后斑点明显，无明显拖尾。

3.1.1.2 显色剂的考察。共考察了三种显色剂显色效果：A.喷以1%三氯化铁∶1%铁氰化钾混合溶液后于可见光下检视、B.喷以5%三氯化铝乙醇溶液后在紫外（365nm）下检视、C.于紫外（365nm）下检视。结果显示，三者显色效果都较好，考虑到操作难度，拟选择显色剂C作为显色条件。

3.1.1.3 耐用性考察。分别就不同湿度、温度以及不同规格的薄层板对样品展开的影响进行了考察。结果显示，不同湿度、温度对样品展开基本没有影响。而不同的薄层板的展开效果有所不同，其中硅胶G 板的展开效果最佳。

3.1.2 浸出物含量测定。考察了不同溶剂、不同提取方法对川西合耳菊浸出物提取效率进行了考察，结果见表6。结果显示，以水作为提取溶剂，热浸法提取，浸出物含量最高。

表6 川西合耳菊样7浸出物提取方式考察结果

表6 （续）

3.2 结论

经上述实验数据分析，现拟定川西合耳菊水分含量不得过12%，总灰分不得过10%，酸不溶性灰分不得过0.73%，水溶性浸出物不得少于28.0%.