结直肠癌与WWOX基因相关性的Meta分析

王金玉 张茂 刘鹏程

[摘要]目的：系统评价结直肠癌的发生发展与包含WW的氧化还原酶结构域（WWOX）表达的关系及其对肿瘤的影响。方法：检索Embase、中国知网、PubMed、万方数据库以及维普数据库中关于结直肠癌与WWOX表达关系的对照研究的文献，采用95%置信区间（CI）和优势比（OR）为效应指标，应用RevMan.5.3软件对符合条件的结果进行Meta分析。结果：最终纳入5篇符合条件的文献，Meta分析结果示：WWOX基因在结直肠癌与癌旁组织中表达差异（OR=0.11，95%CI0.07～0.17，P<0.01），有无淋巴结转移中WWOX基因的表达差异（OR=0.19，95%CI.0.12～0.30，P<0.01），不同分化程度中WWOX基因表达差异（OR=4.63，95%CI.2.93～7.32，P<0.01）。结论：在结直肠癌的发生发展中，可认定有WWOX基因的参与，归纳分析WWOX基因与结直肠癌的相关性，有助于更好地在临床中诊治及预防结直肠癌。

[关键词]WWOX基因;结直肠癌;Meta分析：相关性

[中图分类号]R735.3+7.

[文献标识码]A.

[文章编号]2096-5249（2022）03-0007-04

在全球范围内，结直肠癌是癌症相关死亡的主要原因之一，其在男性中死亡率排名第二，女性中排名第三[1]。在我国，近几年中结直肠癌的发病率也在逐渐上升，原发性和转移性结直肠癌的新疗法已经出现，为患者提供了更多的选择;这些治疗包括腹腔镜手术治疗原发性疾病、更积极地切除转移性疾病（如肝和肺转移）、直肠癌放疗以及新辅助和姑息性化疗。然而，虽说上述治疗方案在结直肠癌的临床治疗中是较为有效的措施，可延长生存期，使患者的生存质量有一定程度改善，但仍然无法提高患者的5年生存率。

含有人类WW结构域的氧化还原酶（WWOX）基因位点位于16号染色体上的一个常见脆性位点（CFS）FRA16D（16q23.1-q23.2）。该基因跨越1.1Mbp，是人类基因组中最长的基因之一。其由两个N端WW域和一个C端短链脱氢酶/还原酶域组成。第一个WW结构域（WW1）通过与富含脯氨酸的PPXY（P是脯氨酸，X是任何氨基酸，Y是酪氨酸）基序的伙伴蛋白结合而参与蛋白质-蛋白质相互作用，并充当调节其定位、反式激活和稳定性的衔接蛋白，从而影响正常生理和发育。WWOX共包含有9个外显子，其在基因库中的编号为51741。WWOX基因的WW功能域有1～4外显子编码，外显子5～8编码的则是位于WWOX中心部位的氧化还原酶功能域。其在2000年发现后不久，WWOX就被誉为肿瘤抑制基因。在随后几年的研究中，这一功能得到了无可争议的证实。大多数肿瘤表现出高杂合性丢失率和WWOX表达降低。新近的研究发现在HCT116结肠癌细胞系的FRA16D处发现了一组复杂的缺失，负责去除WWOX基因的片段，证明WWOX也参与结直肠癌的发生发展。

因此，为进一步了解结直肠癌的发生、发展与抑癌基因WWOX表达程度的相关性，本文將对既往关于WWOX基因与结直肠癌发生发展关系相关文章的研究结果采用Meta分析进行定量分析，为诊断、治疗结直肠癌提供新的方法。

1材料与方法

1.1资料来源

检索Embase、PubMed、中国知网、万方数据库以及维普数据库中有关WWOX基因与结直肠癌关系的中外文献。中文检索词为：“WW的氧化还原酶结构域”或“WWOX”，“结直肠癌”或“结肠癌”或“直肠癌”或“直肠腺癌”或“乙状结肠癌”。英文检索词为：“OxidoreductasedomaincontainingWW”OR“WWdomain containing oxidoreductase”OR“WWOX”OR“Coloncancer”OR“colorectal cancer、rectal can-cer”OR“Adenocarcinoma of rectum”OR“Sigmoid colon cancer”OR“CRC”。由两位研究员对检索结果进行评阅，第三方仅在不确定或存在争议时进行评定。

纳入标准：（1）具有完整临床病理资料，病理回报为结直肠癌，无放化疗于术前;（2）以病例对照研究为研究方法;（3）以中、英文文献为研究对象;（4）能够提供阳性表达的例数的原始数据;（5）各篇文献均是关于结直肠癌与WWOX基因表达之间的研究。

排除标准：（1）综述、动物研究、评述类文献等;（2）文献未能获取全文;（3）无法提供完整数据以及重复发表的数据;（4）未设立对照组的研究。

1.2数据提取

基于上述标准对数据进行提取，内容包括：第一作者姓名、发表时间、国籍、研究例数、WWOX基因在结直肠癌组织及癌旁组织中阳性表达例数，有无淋巴结转移时WWOX表达例数以及不同分化程度下WWOX基因表达阳性例数。其中，两名研究员对所纳入的数据进行提取，若两名研究员对所提取的数据意见不同时，由第三名研究员共同讨论决定。

1.3数据统计

采用RevMan5.3软件，对结直肠癌及WWOX基因表达的关系进行统计分析以优势比及其95%可信区间的二分变量作为效应量。采用固定效应模型，存在同质性于各篇文献之间（P>0.05，I2<50%）。用随机效应模型：文献之间具有异质性（P<0.05，I2≥50%），即对根据临床判断有合并意义，可进行合并的数据进行合并。寻找统计学异质性来源则借用敏感性分析来评价结果的稳定性实现。如无法判断，则采用描述性分析。森林图展现Meta分析的结果，文献潜在的发表偏倚通过漏斗图进行观察（由RevMan5.3软件生成）。

2结果

检索数据库，通过阅读题目、摘要、去除重复文献等方法将检索到的70篇文献去除59篇，后排除6篇未提供详细数据的文献，最终纳入Meta分析的有5篇[2-6]，纳入文献特征见表1，所收集的文献研究均出自中国。

2.1WWOX基因与结直肠癌组织及癌旁组织相关性

分析WWOX表达在结直肠癌及癌旁组织中的差异，纳入的5篇文献中均有报告，其中结直肠癌组织的阳性表达共141例，癌旁组织中有193例阳性表达，分析结果提示无统计学异质性（P=0.66，I2=0）。Meta分析采取固定效应模型进行。结果显示，在结直肠癌组织与癌旁组织WWOX表达差异有统计学意义（OR=0.11，95%CI0.07～0.17，P<0.01），见图1。

2.2WWOX表达情况与结直肠癌分化程度关系的分析结果

纳入的5篇文献均有WWOX表达与结直肠癌分化关系，其中111例患者为高/中分化，30例患者为低分化。不存在统计学异质性（P=0.94，I2=0）。采用固定效应模型，分析结果示（OR=4.63，95%CI2.93～7.32，P<0.01），差异具有统计学意义，见图2。

2.3WWOX表达情况与淋巴结转移关系的分析结果

纳入的5篇文献均有WWOX表达与淋巴结转移的关系，其中有淋巴结转移共32例，无淋巴结转移的共109例。无统计学异质性存在（P=0.99，I2=0）。采用固定效应模型，结果显示各组件差异具有统计学意义（OR=0.19，95%CI0.12～0.30，P<0.01），见图3。

2.4发表偏倚

对纳入的所有文献中，通过绘制漏斗图进而了解本册Meta分析有无发表偏倚，由图可知，所绘制的图形基本对称（采用Revman5.3软件绘制），说明无明显发表偏倚，见图4。

3讨论

我国的消化道恶性肿瘤中，结直肠癌的发病率一直位居前列，且正呈现出一种逐年递增的趋势。结直肠癌的发病原因未能彻底明确，仅了解其发生发展与遗传、环境等方面的因素有关，并且在癌症的形成过程中还涉及到许多诸如癌基因激活，抑癌基因失活等诱发细胞生物学改变的过程，各种癌基因与抑癌基因互相协同，相互作用，共同参与肿瘤的发生与发展。现在有大量数据支持WWOX在癌症生物学中的作用，包括观察到WWOX的丢失或减弱发生在许多人类恶性肿瘤中，包括骨肿瘤、乳腺癌、肺癌、肝癌、卵巢癌、胰腺癌和许多血液疾病[7-8]。WWOX的基因组定位使得该基因座容易受到基因杂合性丢失（LOH）或纯合缺失的影响，从而导致基因表达降低。或者，其他表观遗传和遗传因素在沉默WWOX表达中起作用。在众多结直肠癌的研究当下，WWOX表达在癌组织中表达通常会减低，这可能与WWOX基因同源性缺失的机制相关[9-11]。在结直肠癌HCT1116细胞系中存在的碱基同源性改变多达25～50个，例如导致WWOX转录本表达降低是与通过使WWOX的一个等位基因外显子6～8去除的杂合子缺失有关[12-15]。

通过本次Meta分析所纳入的5篇文献研究结果表明，在结直肠癌组织中WWOX表达较癌旁组织明显降低，研究结果显示，在结直肠癌中合并（OR=0.11，P<0.01），差异具有统计学意義，提示WWOX表达降低可能与结直肠癌的发生发展有关。在与结直肠癌分化程度研究中合并（OR=4.63，P<0.01），在有无淋巴结转移关系研究中合并（OR=0.19，P<0.05），上述研究差异均有统计学意义，表明随着WWOX基因阳性表达率降低，结直肠癌分化程度越低，淋巴结转移可能增大。

然而，本研究仍有一定局限性。首先，本次Meta分析纳入文献数量较少;其次，本次研究仅以中英文为本研究语种，尾随其他语种的相关资料进行研究，使资料全面性不全。以上局限性可能会使结论的证据强度受到一定影响。

根据本次课题研究结果，证明抑癌基因WWOX对结直肠恶性肿瘤的发生发展具有一定的抑制作用，但上述结论仅仅局限于META分析，如何将抑癌基因WWOX运用于临床，从而更好的诊断与治疗结直肠癌是目前需要侧重考虑的问题。除此之外，对于WWOX在各种癌症中的表达差异是否具有特异性，以及表达过程中是否有其他因素参与以及表达受何种因素影响，目前仍然需要进一步研究。不同于P53、PTEN等研究较为深入的基因[16]，WWOX对于肿瘤方面的研究目前国内外较少，就目前所有的研究结果来看，对于WWOX在肿瘤发生发展中的详细作用以及对肿瘤患者预后的影响情况仅仅知识冰山一角，需要人们继续不断的研究。

通过本次分析研究，WWOX作为抑癌基因可以抑制结直肠癌的发生发展，当其表达降低时，可导致结直肠癌的发生，并且加速结直肠癌的浸润以及转移，这为结直肠癌的诊断与治疗提供了一定的帮助。因此，进一步检测、分析与研究WWOX基因，将对结直肠癌的发生发展机制有更进一步的了解，对于结直肠癌的预防及治疗将提供更加坚实可靠的理论基础。

参考文献

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（收稿日期：2021-10-26）