中草药添加剂对生茸期梅花鹿生长性能、血清生化、抗氧化和免疫功能的影响

魏倩倩，杨乾龙，常忠娟，吴 炎，马 琳，刘兴医，赵 蒙*

（1.中国农业科学院特产研究所，吉林长春 130112；2.中国农业科学院研究生院，北京 100081）

梅花鹿是重要的药用经济动物，具有较高的药用价值和养生保健功能。梅花鹿生性胆小，饲养过程中易受到环境的应激，严重时伴随疾病的产生。在畜禽养殖过程中，疾病的预防往往比疾病的治疗更为重要。为达到保健、促生长的效果，饲料中常会添加大量抗生素，导致抗生素的滥用，对土壤、水源以及人类健康造成威胁。随着禁抗时代的到来，天然植物中草药已成为抗生素替代品研究的热点，中草药是天然植物，富含多种有机物，可作为营养物质促进动物健康生长，起到提高免疫力的作用。目前，中草药添加剂主要应用于单胃动物家禽和猪养殖生产中，在梅花鹿中的研究较少，因此，本试验以生茸期梅花鹿为研究对象，在日粮中添加中草药添加剂，研究中草药对生茸期梅花鹿的生长性能、血清生化指标、抗氧化及免疫指标的影响，为中草药添加剂的研发及梅花鹿的健康养殖提供新方案。

1 材料与方法

1.1 试验材料 中草药购自安徽亳州中药材市场，由当归、人参、枸杞、五味子、益母草、黄芪、党参、熟地黄、丹参、淫羊藿按一定比例超微粉碎组成中草药添加剂。

1.2 试验设计与饲养管理 单因素随机区组实验设计，选取头茬茸收割时间集中在7月13日左右的3岁龄健康雄性梅花鹿[平均体重为（74.79±0.78）kg]12头，分为2组，每组6个重复，每个重复1头，组间初始体重差异不显著（P＞0.05），见表2。其中对照组（SC）饲喂基础日粮，试验组（ST）额外每日饲喂10 g/头的中草药添加剂，基础饲粮配方及营养含量见表1。头茬茸收割时开始预饲，预饲期7 d，伤口愈合时正试饲喂，正式饲喂7周至梅花鹿二杠茸收割。动物试验在农业部长白山野生生物资源重点野外科学观测试验站进行，每天4：30和15：30定量饲喂，自由饮水。

表1 基础饲粮组成及营养水平（风干基础） %

1.3 样品采集和保存 试验最后1 d晨饲前对梅花鹿麻醉并进行颈静脉采血，3500 r/min离心10 min分装入1.5 mL Eppendorf管中，-80℃低温保存，待测。

1.4 指标测定及方法

1.4.1 饲料营养物质含量的测定

饲料中的干物质含量参照GB/T6435—2014测定；粗蛋白质含量利用凯氏定氮法参照GB/T6432—2018测定；粗脂肪含量利用索氏脂肪浸提法参照GB/T6433—2006测定；中性洗涤纤维、酸性洗涤纤维含量使用范式（Van Soest）方法参照GB/T20806—2006测定。

1.4.2 生长性能的测定

试验第1 d和最后1 d晨饲前麻醉并进行空腹称重，用于计算总增重（TWG）和平均日增重（ADG）。每天记录投料量和剩料量，用于计算试验期间干物质采食量（DMI）和料重比（F/G）。

1.4.3 血清样品测定

血清葡萄糖（GLU）、总蛋白（TP）、白蛋白（Alb）、谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、碱性磷酸酶（ALP）、乳酸脱氢酶（LDH）、胆固醇（CHO）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白（LDL）、高密度脂蛋白（HDL）采用中生北控生物科技有限公司的试剂盒测定。

过氧化氢酶（CAT）、总超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、丙二醛（MAD）的测定均采用南京建成科技有限公司的试剂盒测定。鹿免疫球蛋白A（IgA）、鹿免疫球蛋白G（IgG）、鹿免疫球蛋白M（IgM）采用上海酶联生物科技有限公司的试剂盒测定。

1.5 数据处理 试验数据先由Excel 2019进行初步整理，然后采用 SPSS 26.0 进行独立样本t 检验（t test），P ＜ 0.01，表示差异极显著 ；P＜0.05，表示差异显著；P＞0.05，表示差异不显著。

2 结果

2.1 中草药添加剂对生茸期梅花鹿生长性能的影响 由表2可知，两组间终末体重、总增重、平均日增重、平均日采食量和料重比无显著性差异（P＞0.05）。

表2中草药添加剂对生茸期梅花鹿生长性能的影响

2.2 中草药添加剂对生茸期梅花鹿血清生化指标的影响 由表3可知，ST组的血清葡萄糖含量显著高于SC组（P＜0.05）；血清胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白、高密度脂蛋白含量两组之间差异不显著（P＞0.05）。两组血清白蛋白和总蛋白含量差异不显著（P＞0.05），血清谷草转氨酶、谷丙转氨酶和乳酸脱氢酶活力两组之间差异不显著（P ＞ 0.05）。

表3 中草药添加剂对生茸期梅花鹿血清生化指标的影响

2.3 中草药添加剂对生茸期梅花鹿抗氧化功能的影响 由表4可知，与SC组相比，ST组血清过氧化氢酶和总超氧化物歧化酶的活性显著升高（P＜0.05）；与SC组相比，ST组血清谷胱甘肽过氧化物酶活性升高，但差异不显著（P＞0.05），ST组与SC组血清丙二醛含量差异不显著（P＞0.05）。

表4 中草药添加剂对生茸期梅花鹿抗氧化功能的影响

2.4 中草药添加剂对生茸期梅花鹿免疫功能的影响 由表5可知，与SC组相比，ST组的免疫球蛋白G含量显著升高（P＜0.05），免疫球蛋白A和免疫球蛋白M含量两组之间无显著差异（P＞0.05）。

表5 中草药添加剂对生茸期梅花鹿免疫功能的影响

3 讨论

3.1 中草药添加剂对生茸期梅花鹿生长性能的影响 梅花鹿日粮中营养物质被高效消化吸收是实现快速增重的关键。研究表明，中草药饲料添加剂在动物饲养中，对于提高采食量、改善消化能力以及提高生产性能等方面具有巨大优势（王旭东等，2019）。在动物机体代谢过程中，能够为动物提供蛋白质、氨基酸、糖、脂肪、淀粉、维生素、矿物质和微量元素等丰富的营养物质，达到促进动物生长和提高生产性能的作用（骆雪等，2021，卢世杰等，2021）。本试验中，ST组总增重、平均日采食量均较SC组有所增加，料重比有所降低，但差异均不显著。中草药添加剂虽未显著提高生长性能，至少表明中草药对生茸期梅花鹿的生长性能无负面影响。也可能是3岁龄梅花鹿已达到体成熟，体重变化较稳定。部分中草药适口性较差，如五味子、当归等中草药含有挥发油、多糖、单糖等物质，可以改善饲料风味，加之本试验中所有梅花鹿均限饲，所以中草药添加剂并没有对生茸期梅花鹿的平均日采食产生显著性变化。具体的原因有待于进一步研究。

3.2 中草药添加剂对生茸期梅花鹿血清生化指标影响 血液的生理生化指标是反映动物机体的物质代谢和组织器官机能的重要指标。本试验中，在生茸期梅花鹿饲粮中添加中草药添加剂对血清TP、ALB、GLB、CHO、TG、LDL和 HDL的含量未产生显著影响。但SC组的GLU含量比SC组显著提高38.65%。表明中草药添加剂能够增强生茸期梅花鹿合成蛋白质的能力，鹿茸中含有丰富的蛋白质，其中干鹿茸含有50%～76%的粗蛋白质（Li等，1999），可能中草药对鹿茸的生长具有明显的促进作用，值得我们进一步研究。中草药促进血清中GLU含量的提高可能是因为改善了线粒体功能，线粒体是能量产生与代谢的重要场所，研究表明黄芪—当归药对能调节线粒体生物能，可诱导线粒体膜电位增加、上调线粒体相关基因的表达并调节线粒体自噬、改善线粒体损伤（Kwan等，2019，袁嘉婧等，2020）。高辉等（2013）研究表明，复方中草药对犊牛的血液生化指标未产生不利影响。本试验结果与之类似，ST组血清ALP、AST和LDH含量高于SC组，但未达到显著性水平，表明本试验使用的中草药添加剂对生茸期梅花鹿的蛋白代谢、肝功能和心肌无不利影响。因此，中草药添加剂在一定合理范围内对动物机体可能不会产生不利影响。

3.3 中草药添加剂对生茸期梅花鹿抗氧化功能的影响 中草药具有清除机体氧自由基和增强抗氧化的功能，可以从多个环节阻断自由基的损伤。武晋孝等（2002）报道，使用由山楂、神曲、丹参、首乌、蒲黄、玉竹、枳壳等组成的饲料添加剂，极显著提高肉鸡体内SOD和GSH-Px的活性。闫先峰等（2021）研究发现，饲喂不同水平中草药饲料添加剂对蛋鸡血清T-AOC、GSH、SOD和MDA含量影响差异显著。本试验中，ST组血清CAT和SOD酶活性显著升高，GSH-PX酶活性升高，但差异不显著，表明中草药具有提高梅花鹿机体抗氧化的能力。中草药的抗氧化作用与多糖和黄酮类有关，推测可能是当归多糖通过减轻过氧化氢引起的细胞氧化反应损伤，减弱细胞凋亡和活性氧的产生（Zhang等，2019）或淫羊藿中的黄酮类成分发挥抗氧化作用，它能够通过结构中的酚羟基阻断自由基链反应，减少自由基的产生（Chen等，2020）。也可能是丹参单体成分（如丹酚酸A、丹酚酸B、丹参素、迷迭香酸等）发挥作用，研究表明其可以通过调控核因子-κB（NF-κB）、磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）/蛋白激酶B（Akt）、丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）、Janus酪氨酸蛋白激酶（JAK）/信号转导及转录激活因子（STAT）等多种信号通路，发挥抗炎、抗氧化药理作用（陈璐等，2021）。有关中草药不同成分的抗氧化具体作用机制，还需进一步研究。

3.4 中草药添加剂对生茸期梅花鹿免疫功能的影响 免疫球蛋白是反映机体免疫功能的重要指标。因此，血清中免疫球蛋白的浓度与梅花鹿的免疫力密切相关。IgG在抗体介导的防卫机理中占主要地位，IgG比其他免疫球蛋白更易逸出血管，参加体表和组织间的防卫（邱时秀等，2020）。邓培华等（2021）报道，由黄芪、党参、山楂、熟地等组成的中草药添加剂显著提高血清IgG含量。本试验中，ST组IgG含量显著高于SC组，表明中草药添加剂提高生茸期梅花鹿的免疫功能。推测免疫功能的改善可能与中草药的多糖成分有关，枸杞多糖能使免疫系统中的NK细胞杀伤活性提高，并进一步推测枸杞多糖提高免疫作用与Band-3蛋白表达水平的恢复相关（黄振华等，2018）。另有研究表明，枸杞多糖通过调节肠道微生物菌群来增强先天免疫，肠道菌群可以通过直接或间接的方式来阻止外源病原微生物侵染机体，枸杞多糖又能对肠道菌群起到一定的保护和调节作用，进而提高有益菌水平（Zhu等，2020）。黄芪多糖可通过多种途径发挥免疫调节的作用，例 如 TLR4-NF-κB、Ca2+-cAMP通 路 等（Song等，2007，Song等，2007）。

4 结论

本试验条件下，饲粮中每日添加10g/头中草药添加剂可以显著提高生茸期梅花鹿的血清CAT、T-SOD活力和IgG含量，提高机体抗氧化和免疫功能。