黔南州新生儿筛查实验室质量及实验结果浅析

王海萍

目的：本院于2016年5月开始组建和运作黔南州新生儿筛查分中心实验室，从开始运作以来本实验室进行了18万多的新生儿筛查，在不断总结中提高阳性可疑检测率，为新生儿缺陷防治防控把好最后一道关。现把2019这一年的实验室质量管理及实验室检测结果做一个粗略分析，以点概面总结黔南州地区新生儿血片筛查阳性率、复诊率及确诊率的统计结果。

1. 对象及方法

1.1 标本来源：以黔南州12个县市2019年45559例新生儿为研究对象，所有有新生儿接生资质的医疗单位出生的新生儿都筛查，年筛查率在98%以上。其中男孩子24253例，女孩子21304例，其中两例性别未明。

1.2 血片采集：按照标准新生儿应于出生72 小时后，7 天之内，充分哺乳后（或者混合奶），在足跟部采取末梢血，采血时让血自然流出，第一滴擦掉，第二滴以后滴于贵州里定公司 YZB/黔型 800mm 专用滤纸上，渗透正反两面，制备成4 个大于8mm血斑标本，置室温3个小时自然阴干，收入塑料袋中密封保存。本院及本市区血片收到后立即放置 2-8℃冰箱。其它县市的标本经过快递方式到本院，记录登记后也立即放置2-8℃冰箱。

1.3 检验方法：设备和试剂：时间分辨荧光免疫测定仪 FLX800 型（美国Biotek instvets公司），Neo-TSH FEIA试剂盒、Neo-17-OHPFEIA试剂盒、Neo-PheFEIA试剂盒和Neo-G6PDFEIA试剂盒。每个试剂盒内有标准质控及6点标准曲线血片，相关配置的里定系统程序与辅助仪器可直接打印结果。

1.4 结果判断：新生儿筛查 TSH cut-off>8.5mIU/l 为CH可疑，17-OHP cut- off>30ng/ml 为CAH可疑，PKU cut-off>2.0mg/100ml 为HPA可疑，G6PD cut-off<3.5为G6PS阳性可疑。每次初筛可疑的血片再同片复查一次，结果仍然可疑，由新筛办公室电话召回本实验室复采检验。结果还是阳性，进一步到上级医院确诊。

2.实验结果

2019 年本实验室筛查新生儿总人数是45559人。初筛后阳性总人数是2359人，其中葡萄糖-6-磷酸脫氢酶（G6PD）1518人;新生儿促甲状腺素（TSH）755人;17a-羟孕酮（17-OHP）80人;苯丙氨酸（PKU）6人。初筛总阳性率是5.18%，四个项目阳性率占比分别是：G6PD 3.33%、TSH 1.66%、17-OHP 0.18%、PKU 0.01%（图1）。通过电话召回到本实验室复筛的初筛阳性总人数是1015人。复筛后还是阳性可疑结果的总人数是318人，占比 31.3%;复筛后阴性结果总人数是697人，占比 68.7%。复筛血片中四个项目各自占比是：解葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（G6PD）复筛 354人，阳性可疑结果人数是233人，阴性结果人数是 119人;新生儿促甲状腺素（TSH ）复筛593人，阳性可疑结果人数是74人，阴性结果人数是 519人;17a-羟孕酮（17-OHP） 复筛65人，阳性可疑结果人数是 10人，阴性结果 人数是55人;苯丙氨酸（PKU）复筛 3人，阳性可疑 结果人数是1人，阴性结果人数是 2人。总的来看解葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（G6PD ）复筛率是 34.9%，阳性率 66.4%，阴性率 33.6%;新生儿促甲状腺素（TSH ）复筛率是58.4%，阳性率12.5%，阴性率87.5%;17a-羟孕酮（17-OHP ）复筛率是6.4%，阳性率15.4%，阴性率84.6%;苯丙氨酸（PKU） 复筛率是0.3%，阳性率33.3%，阴性率66.7%（图2）。

2019年本实验室复筛阳性可疑的患者，经过进一步确诊的阳性结果人数分别是：先天性甲状腺功能减低症（TSH）35人;先天性肾上腺皮质增生症（CAH）2人;苯丙酮尿症（PKU）没有确诊病例;葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症（G6PD）365人。（本实验室把葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（G6PD）初筛阳性荧光值小于2以下的新生儿可疑患者，由新筛管理人员直接电话告知进一步到上级医院确诊，因此最后确诊总人数比本实验室复筛阳性人数多）

3.结论

从四个项目的确诊人数来看，2019年黔南州地区葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（G6PD） 筛出的新生儿患者人数最多。符合我国葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（G6PD）新生患儿分布呈现南高北低，又以广东，广西，海南，贵州等地人群患病率高的趋势（1）。先天性甲状腺功能减低症（TSH）新生儿患者其次，先天性肾上腺皮质增生症（CAH）偶有确诊病例，而苯丙酮尿症（PKU）无确诊病例。新生儿筛查实验属于国家出生缺陷三级防控中的最后一道防控线，新生儿出生后只有这最后一次筛查和诊断机会，筛查质量关系着千千万万个患儿终生的幸福，因此，加强新生儿筛查的每一个环节的质量控制非常重要。从这一年的实验数据来分析，我们发现新生儿血片从采集到寄送到检测到出结果影响因素很多。把控好每一个环节，提高质量控制，对最后的检测结果都至关重要。在实验中发现，新生儿血片采集过早（少于72小时）或喂奶次数达不到8次的标准，先天性甲状腺功能减低症（TSH）检测值偏高，假阳性增加;先天性肾上腺皮质增生症（CAH）检测值偏低，假阴性增加（1）。受季节影响，夏天温度升高，葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（G6PD）分解加快，检测值偏低，假阳性增多（2）。而先天性甲状腺功能减低症（TSH）检测值受季节温度的影响最大，夏季结果偏低，冬季结果偏高 （3）。为了解决季节因素带来的影响，在实验前的这个环节上，本实验室着重交待各个县市邮寄新生儿血片时多加个冰袋一起邮寄，缓解葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（G6PD）的降解，减少温度因素造成检测值偏低的情况;实验中的这个环节，在保证血片质量的情况下，冬季做促甲状腺素（TSH）实验前，先把洗液放水箱中加温溶解结晶，消除试剂结晶堵塞洗板机，影响洗板质量的影响。同时保证实验室内合适的温度和湿度，减少实验环境干扰，冬天保持实验室室温在24度左右。注意每个项目试剂不同批号之间的差异，关注每次中位数的变化对检测结果的影响，尽可能排除不同批号试剂对实验的干扰。不断提高质量管理和筛查水平，减低各个环节上的干扰，做好每次的室内质控，减少假阴性和假阳性率，让结果可信可靠。

本实验室属于初筛实验室，所有的新生儿血片样本都要经过下面的流程：第一次初筛检测，检测出的阳性可疑血片，再同片检测第二次，第二次检测阳性可疑的新生儿，由新筛办公室工作人员通知家属，对新生儿进行血样复采，然后送至本实验室进行最后一次复筛，结果依然阳性，再告知家属带到上一级医院进行确诊。这样最大限度的避免了假阴性和假阳性出现的概率，确保真正的阳性患儿得到及时救治。早发现，早治疗，减轻家庭和社会的经济负担。

参考文献：

[1]田国力 上海市儿童医院 新生儿葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症 新生儿筛查诊断和诊疗 专家共识

[2]章印红 朱宝生 王瑞红等 存储温度和时间对滤纸片干血斑标本葡萄糖-6-磷酸脱氢酶活性的影响（J/CD） 中华妇幼临床医学杂志电子版20084（6）563-566

[3]邓俊耀 不同季节对新生儿甲状腺功能低下症筛查影响研究现状国际检验医学杂志2017（038）002