铁岭地区牛肉源大肠埃希菌耐药性调查研究

安妮

大肠埃希菌（E.coli）俗称大肠杆菌，是人和动物肠道内的正常菌群成员之一，常随粪便排出，故被用作水、食品和饲料等卫生检测的指标。少数具有致病性，可以引起畜禽特别是幼畜禽的大肠杆菌病。本研究拟对铁岭地区牛肉源大肠埃希菌的药物敏感性进行检测，为指导临床合理使用抗菌药物提供依据，以减少耐药菌株的产生。

1.1 试验材料

菌株：从铁岭地区8家市场采集的牛肉样品中分离得到20株大肠埃希菌。

药物：氨苄西林、头孢唑啉、头孢噻肟、美罗培南、庆大霉素、阿米卡星、链霉素、四环素、氯霉素、氟苯尼考、萘啶酸、环丙沙星、黏菌素、磷霉素、复方新诺明。

1.2 试验方法

采用琼脂稀释法，对20株大肠埃希菌进行耐药性检测。

菌液制备：将已纯化并鉴定的20株大肠埃希菌在琼脂平板上划线培养后，挑取单个菌落接种于2毫升MH肉汤管中，37℃恒温振荡培养4～8小时，用MH肉汤稀释菌液，至含菌量约为1×106 CFU/毫升，备用。

抗菌药的稀释：把抗菌药物原液按试管二倍稀释法在试管中稀释到需要的各个梯度，吸入2毫升药液放进做好标记的平皿中。

药物琼脂平板的制备：用25毫升灭菌移液管吸取18毫升，冷却至50～60℃MH琼脂，加入已有2毫升抗菌药物的平皿中，混匀。同时每种药物设有两个空白琼脂平板。在超净工作台中风干冷却后，立即使用。

细菌接种：按照药物浓度从低到高的顺序，将菌液接种到琼脂平板表面。将接种好菌液的琼脂平板放置在超净台内，直到接种的菌液被琼脂完全吸干。然后将平板放入培养箱，37℃恒温培养18～24小时。

1.3 結果判定

当接种前后两块空白的MH平板上的所有接种点的菌生长良好，而无接种细菌的平皿均无菌落生长时，试验组完全不见细菌生长的最低药物浓度为该药物对细菌的最小抑菌浓度（MIC）。以 MIC值规定的敏感、耐药折点值范围判断结果。受试药物的敏感折点值判断标准见表1。

试验中20株大肠埃希菌对氨苄西林和复方新诺明的耐药率高于65%，对四环素的耐药率在45%，对其他12种药物的耐药率均低于30%（表2）。

试验结果表明，多数常用药物在鸡肉源大肠埃希菌中的耐药率较低，但仍有少数药物的耐药率较高。为了达到最佳的治疗效果，需要正确合理地使用抗生素，在药敏试验的基础上有针对性地选择用药，加强对细菌耐药性的监测以及对临床用药的指导和监管，避免耐药菌向人类的传播。