硫磺菌培养料原料筛选及配方优化试验

张园园 丁 建 张 晶 王 勇 李 悦 樊玉萍 韩宝康 周高新

（1陕西省安康市农业科学研究所，陕西安康 725021；2陕西省长青林业局，陕西汉中 723000；3 陕西省咸阳市农业科学研究院，陕西咸阳 712000）

硫磺菌Laetiporus cremieporus，又名鸡冠菌、鲑鱼菌，隶属担子菌门Basidiomycota、伞菌亚纲Agaricomycetes、多孔菌目Polyporales、拟层孔菌科Fomitopsidaceae、硫磺菌属Laetiporus，是一种食药兼用的野生珍稀真菌，具有较高的营养价值和药用价值[1-2]。硫磺菌主要生长在落叶松等针叶、栎树等阔叶树干的基部，会引起树干基部腐朽，产生块状褐色。硫磺菌菌盖肉质呈扇形至半圆形，大部分重叠生长，直径可达30~40 cm，单个菌盖直径达5~20 cm，厚度1~2 cm；菌盖颜色为鲜朱红色或带黄的朱红色[3]。硫磺菌主要分布于我国新疆、西藏、四川、陕西、河北、福建等省区，属于中、低温型菌类。大量研究表明，硫磺菌具有抗肿瘤、增强人体免疫力等功效[4-5]。基于此，硫磺菌栽培研究显得尤为重要。

关于硫磺菌生理特性、深层培养、活性成分等研究已有报道[6-10]，但有关栽培硫磺菌的培养料研究较少。因此，笔者通过引入菌丝生长指数的概念[11]和偏相关分析方法，全面考察硫磺菌菌丝生长速度、产量及生物学效率，筛选出适宜的培养料原料及优化配方，以期为硫磺菌的人工驯化栽培研究提供参考。

1 材料与方法

1.1 供试菌株

供试硫磺菌菌株LS-AK405，由安康市农科院食用菌研究所提供，现保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏编号为CGMCC No.18155。

1.2 供试培养料

供试原料：7 种主料为木屑、玉米芯、玉米秆、麦秆、谷壳、棉籽壳、葛根渣，3 种辅料为玉米粉、豆粕、麸皮。主料筛选试验时，辅料为麸皮，主辅料比例为4∶1；辅料试验时，主料为木屑，主辅料比例为4∶1。

1.3 试验方法

1.3.1 硫磺菌培养料原料筛选

分别称取供试培养料100 g，放入盒内，用清水浸泡，使其充分吸收水分后，装入直径为90 mm的培养皿中，高压灭菌1 h，冷却至室温后，接种一粒麦粒菌种于装有培养料的培养皿中央，置（18±2）℃恒温箱中暗培养。每个处理重复3 次。采用划线培养法，每隔1 d 标记一次菌落直径，培养6 d。最后，利用十字交叉法测定菌落直径，对其菌丝长势进行评分，并计算菌丝生长速度和菌丝生长指数。菌丝长势评分标准：5 分代表菌丝长势浓密，颜色为橙黄色；4分代表菌丝长势较浓密，颜色橙黄色；3分代表菌丝长势较浓密，颜色淡黄色；2 分代表菌丝长势较稀疏，颜色淡黄色；1 分代表菌丝长势稀疏，颜色淡黄色。

1.3.2 配方优化试验

根据1.3.1筛选得到的主料和辅料进行配比，配方优化设计见表1。

表1 硫磺菌培养料配方优化设计 单位：%

母种、原种和栽培种按照常规方法制备[12]。采用规格为17 cm×58 cm×0.006 cm 的耐高温聚乙烯折角塑料袋装料，每袋装料量折合干料1.2 kg。料袋高压灭菌（121 ℃，2.5 h），待料温冷却后接栽培种。每个配方100 袋。接种后料袋置16~18 ℃培养室避光培养，空气相对湿度60%~65%，每天通风换气，保证培养室内空气新鲜。菌丝满袋后移入出菇棚，采用层架式出菇方式。出菇温度18~20 ℃，空气相对湿度85%~90%。待子实体边缘变薄，菌盖边缘呈现波浪状即可采收。

1.4 数据处理

由于硫磺菌对培养料有较强的选择性，使其在不同培养料上菌丝长势及菌丝生长速度有较明显差异。为了便于比较，引入菌丝生长指数[11]概念。

菌丝生长指数=菌丝长势评分×菌丝生长速度（mm/d）。碳氮比[13]=（碳源物质中的C+氮源物质中的C）/（碳源物质中N+氮源物质中的N）。

采用Microsoft Excel 2003、SPSS 软件对试验数据进行统计分析。

2 结果与分析

2.1 硫磺菌培养料原料筛选结果

由表2 和图1 可以看出，硫磺菌在7 种主料和3种辅料培养基上均可生长。但在不同培养基上，菌丝长势评分、生长速度及生长指数差异明显。分别以谷壳、木屑为主料时，硫磺菌菌丝长势评分较高，以葛根渣为主料时，菌丝长势评分最低；以玉米粉为辅料时，菌丝长势评分较高。分别以7 种主料培养硫磺菌时，菌丝生长快慢为谷壳＞棉籽壳＞麦秆＞玉米芯＞木屑＞玉米秆＞葛根渣；以3种辅料培养硫磺菌时，菌丝生长快慢为玉米粉＞麸皮＞豆粕。从菌丝生长指数来看，硫磺菌菌丝生长较佳的主料为谷壳、木屑、棉籽壳，最佳辅料为玉米粉。

表2 供试配方硫磺菌长势、产量及生物学效率

表2 供试原料对硫磺菌菌丝生长的影响

图1 硫磺菌菌丝生长情况

由表3可知，在不进行变量控制的情况下，菌丝长势评分与菌丝生长速度呈正相关，与菌丝生长指数呈强正相关；控制变量为菌丝长势评分时，菌丝生长速度与菌丝生长指数呈强正相关；控制变量为菌丝生长速度时，菌丝长势评分与菌丝生长指数也呈强正相关。

表3 不同指标间偏相关分析研究

2.2 配方优化试验结果

由表4可知，供试配方对硫磺菌菌丝长势、产量及生物学效率影响较大。配方4 菌丝满袋时间最短，为28 d，其次是配方5，为29 d；配方5和配方6菌丝长势评分最高，其次是配方4；配方6 的袋均产量最高，为0.92 kg，但与配方5（0.89 kg）差异不显著。配方5、配方6 的生物学效率较高，且两者差异不显著。综合各项指标，选择配方5为最佳配方，培养料最佳碳氮比为（70~80）∶1。

3 小结

硫磺菌对供试10 种原料（7 种主料、3 种辅料）均能利用，但在不同主料和辅料培养基上，菌丝生长情况差异较大。从菌丝生长指数来看，谷壳培养基最佳，其次是木屑、棉籽壳，葛根渣不适合用作栽培硫磺菌原料。这是因为添加谷壳可以增加培养基松散度，料有一定的空隙增加含氧量，所以有利于菌丝的生长，但考虑原料持续性营养供给特性，选择木屑和棉籽壳为最佳栽培原料，最佳辅料为玉米粉。通过对木屑和棉籽壳的配比进行优化，结果表明硫磺菌栽培的最佳配方为木屑70%，棉籽壳20%，玉米粉8%，石灰1%，石膏1%（配方5），培养料最佳碳氮比为（70~80）∶1。碳氮比是指食用菌原料配制时碳元素和氮元素的总量之比。碳素或氮素过低，会导致营养供给不足，影响产量；碳素或氮素过多，不但造成浪费，还会因碳氮比不适宜影响出菇，也会导致病虫害发生。因此，适宜的碳氮比是提高硫磺菌产量的关键因素。