血清sFlt-1、PIGF和补体系统激活因子水平预测孕中期孕妇子痫前期发病的价值

曹云飞 马蔷 孙丹丹 黄萍华

子痫前期（preeclampsia,PE）指发生在孕期，同时伴有新发高血压以及蛋白尿为主要表现的多系统紊乱综合征[1]。PE会在一定程度上增加母体及胎儿的死亡率。目前全球PE发病率为2%～8%，部分患者病情逐渐加重，极易在3周内发生早产及严重的母体、胎儿并发症[2]。目前，关于PE的研究较多，但其发病机制仍未明确，多项研究发现，PE患者会分泌过多的可溶性胎盘血管内皮生长因子受体-1（soluble fms-like ty‐rosine kinase-1,sFlt-1），导致胎盘生长因子（placental growth factor,PIGF）水平进一步降低，从而直接影响血管内皮细胞功能[3-4]。PE患者机体内补体系统过度激活，介导血管生成因子异常表达，在PE的发病过程中起到关键性作用。检测血清中这些因子的水平，对PE进行早期预测及适当干预，能够有效改善孕妇及胎儿的生产结局，但此类研究较少[5]。因此，本研究旨在探讨血清sFlt-1、PIGF和补体系统激活因子水平预测孕中期（20～26周）孕妇PE发病的价值，为临床诊治提供理论依据，现报道如下。

1 对象和方法

1.1 对象 选取2018年6月至2020年6月嘉兴市妇幼保健院产科就诊的至少有1项PE危险因素的孕中期孕妇300例，将发展为PE的46例设为发病组；剩下254例设为未发病组。PE定义参考《中华妇产科学》[6]：在妊娠20周后，孕妇新发高血压并合并有任何一种器官或系统受累，主要判断指标涉及以下一项或多项：（1）胎儿生长受限；（2）血液系统受累：弥漫性血管内凝血、溶血等；（3）神经系统受累：视觉障碍、持续性痉挛等；（4）肝脏受累：转氨酶异常、右上腹疼痛等；（5）心肺受累：肺水肿、心包积液等；（6）肾脏受累：血肌酐＞90 μmol/L，尿蛋白≥300 mg/24 h或蛋白肌酐比值≥30 mg/mmol。两组孕妇一般资料及合并症比较差异均无统计学意义（均P＞0.05），见表1。本研究经医院医学伦理委员会审批通过。

表1 两组孕妇一般资料及合并症比较

1.2 方法 抽取孕妇空腹静脉血5 ml，注射到黄盖惰性分离胶管后3 500 r/min离心5 min，取上清液储存于-70℃冰箱中。采用ELISA法检测sFlt-1和PIGF水平，试剂盒购自美国R&D公司，试剂批号及校准批号分别为P153922、333699和P153321、336774；采用德国DiaSys公司的免疫透射比浊法试剂在Beckman Coulter AU5800全自动生化分析上检测补体3（C3）、B因子。所有操作均严格按照说明书进行。

1.3 观察指标 （1）比较两组孕妇sFlt-1、PIGF、sFlt-1/PIGF、C3以及B因子水平；（2）分析各指标的ROC曲线结果。

1.4 统计学处理 采用SPSS 26.0统计软件。符合正态分布的计量资料以表示，组间比较采用两独立样本t检验；不符合正态分布的计量资料以M（P25，P75）表示，组间比较采用Mann-WhitneyU检验。计数资料组间比较采用χ2检验。采用ROC曲线评估各项血清指标预测PE的效能，AUC越大，诊断效能越高。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组孕妇各项观察指标比较 发病组孕妇血清sFlt-1、sFlt-1/PIGF、C3和B因子水平均高于未发病组，PIGF水平低于未发病组，差异均有统计学意义（均P＜0.01），见表2。

表2 两组孕妇各项观察指标比较

2.2 各项观察指标预测PE的效能 ROC曲线显示，sFlt-1、PIGF、sFlt-1/PIGF、C3和B因子预测PE的AUC分别为0.662、0.771、0.789、0.643和0.691，在对PE的预测中sFlt-1/PIGF效能最佳，其截断值为3.4，灵敏度和特异度分别为0.859、0.771，见表3和图1。

表3 各项观察指标预测PE的效能

图1 各项观察指标预测PE的ROC曲线

3 讨论

PE是孕妇死亡的主要原因之一，目前临床上尚无有效治疗方法，但有研究显示，孕早期预防性治疗可改善PE的病理生理变化[7]。既往关于血清各因子表达水平对PE发展的预测研究较少[8]，但有报道表明，PE在出现典型临床症状之前会伴随血清学指标的改变，其中包括sFlt-1、PIGF等，因此本研究选取300例处于孕中期20～26周的孕妇，对其血清中sFlt-1、PIGF、sFlt-1/PIGF、C3及B因子水平的变化进行观察，以判断其对PE发展的预测价值。

有研究认为，PE的发病与滋养细胞侵入不足、胎盘浅着床等因素有关。PIGF是一种血管内皮生长因子，sFlt-1是机体内一种具有酪氨酸激酶活性的糖蛋白，属于PIGF的衍生物，两者密切相关，且均与PE的发生联系紧密[9]。sFlt-1主要通过结合以及分离促血管生成因子与受体flt-1和flk-1的相互作用，来对PIGF起到一定的拮抗作用，故而PE孕妇分泌较多的sFlt-1会使得PIGF减少，最终导致血管内皮功能受损，出现不同程度的内皮功能障碍和紊乱，诱发PE的发生[10]。本研究结果显示，发病组孕妇血清sFlt-1、sFlt-1/PIGF均高于未发病组，PIGF水平低于未发病组，表示sFlt-1、PIGF表达水平失衡与PE的发生、发展有关，临床可通过该两者水平来预测PE的发生。

PE是一种较为常见的异质性疾病，其发病机制不能仅通过单一信号通路来进行解释，机体内血管生成的不平衡以及补体系统的过度激活均与PE的发生密切相关。研究显示，sFlt-1高表达可竞争性与PIGF结合，降低PIGF水平，从而使sFlt-1/PIGF升高[11]。Saleh等[12]和Chen等[13]研究表明，相较于正常孕妇，PE孕妇体内PIGF水平更低，sFlt-1水平更高，在预测PE中具有准确的应用价值，与本研究结果较为相似。

作为人体正常免疫保护机制之一，补体系统的适度激活对于维持正常的妊娠过程非常重要，但过度激活会对相应靶器官造成不同程度的损伤[14]。C3水平上升后会裂解成为C3a，其会激活血管紧张素Ⅱ型受体，同时在胎盘以及肾脏组织中堆积，导致sFlt-1的释放进一步增加，故对于PE孕妇而言，抑制其机体内C3a的生成可达到减少sFlt-1释放的目的[15]。目前关于B因子在PE的发展中如何活化和升高的机制尚未明确，但是C3的裂解产物C3b会同B因子发生作用产生C3bB，在D因子作用下再次裂解成C3bBb，进一步促进C3的裂解，从而使得激活效应进一步扩大[16]。本研究结果表明，发病组孕妇血清C3和B因子水平均高于未发病组，表明孕中期血清C3和B因子水平可用来预测PE。

本研究中，sFlt-1、PIGF、sFlt-1/PIGF、C3及B因子预测 PE 的 AUC 分别为 0.662、0.771、0.789、0.643及0.691，其中sFlt-1/PIGF表现情况最佳，其截断值为3.4，灵敏度及特异度分别为0.859、0.771，具有较高的临床价值，但与既往研究结果有一定的差别[17]，分析其原因在于本研究样本量较小，可能产生结果上的偏倚。

综上所述，血清sFlt-1、PIGF和补体系统激活因子在预测孕中期孕妇PE发病中有较高的价值，但其对PE发展和母婴预后的评估仍需要进一步研究。