广东草地贪夜蛾不同田间种群对4种杀虫剂的抗药性监测

肖汉祥 袁龙宇 高艳 张振飞 李振宇 李燕芳

摘要

采用飼料浸药法测定了草地贪夜蛾对氯虫苯甲酰胺、多杀霉素、甲氨基阿维菌素苯甲酸盐、虫螨腈的相对敏感基线，并测定了广东省广州、东莞、开平、平远和阳江等5地田间草地贪夜蛾种群对氯虫苯甲酰胺、多杀霉素、甲氨基阿维菌素苯甲酸盐和虫螨腈的抗药性。结果表明：上述4种药剂对敏感草地贪夜蛾种群2龄幼虫的LC50在0.037～0.300 6 mg/L之间。除平远种群对氯虫苯甲酰胺保持敏感外，其余4个种群对氯虫苯甲酰胺抗性在3.51～9.99倍之间，属低水平抗性;阳江和东莞种群对多杀霉素的抗性分别为17.62倍和17.71倍，属中等水平抗性;其他3个种群对多杀霉素抗性在4.69～7.60倍之间，属低水平抗性;除平远草地贪夜蛾种群对甲氨基阿维菌素苯甲酸盐抗性倍数为5.34倍，属低水平抗性外，其他4个草地贪夜蛾种群对甲氨基阿维菌素苯甲酸盐抗性倍数在0.39～1.08倍之间，属于敏感水平;开平草地贪夜蛾种群对虫螨腈的抗性倍数为10.77倍，属中等水平抗性;广州、东莞和阳江草地贪夜蛾种群对虫螨腈的抗性倍数在4.21～8.84倍之间，属低水平抗性;平远草地贪夜蛾种群对虫螨腈的抗性倍数为2.37倍，属敏感水平。

关键词

广东; 草地贪夜蛾; 杀虫剂; 抗药性

中图分类号：

S 482.3

文献标识码： B

DOI： 10.16688/j.zwbh.2022069

Monitoring of Spodoptera frugiperda （J. E. Smith） resistance to four types of insecticides in Guangdong

XIAO Hanxiang1， YUAN Longyu1， GAO Yan1，2， ZHANG Zhenfei1， LI Zhenyu1， LI Yanfang1*

（1. Plant Protection Research Institute， Guangdong Academy of Agricultural Science， Guangdong Provincial Key

Laboratory of High Technology for Plant Protection， Guangzhou 510640， China; 2. South China Agricultural

University， Guangzhou 510640， China）

Abstract

The relative sensitivity baseline of Spodoptera frugiperda （J. E. Smith） to chlorantraniliprole， spinosad， emamectin benzoate and chlorfenapyr was determined by artificial diet dipping bioassay method， and the resistance of S.frugiperda populations to four kinds of pesticides in Guangzhou， Dongguan， Kaiping， Pingyuan and Yangjiang in Guangdong province was determined. The results showed that the LC50 values of the above four insecticides on the 2nd instar larvae of the sensitive S.frugiperda population were between 0.037 mg/L and 0.300 6 mg/L. The results of resistance monitoring showed that the resistance multiple of S.frugiperda population to chlorantraniliprole in Pingyuan was 1.54 times， which belonged to the sensitive level， while that in the other four places to chlorantraniliprole was 3.51-9.99 times than the sensitivity baseline， which belonged to the low level of resistance. The resistance multiples of S.frugiperda populations to spinosad in Yangjiang and Dongguan were 17.62 and 17.71 times， respectively， belonging to medium level resistance， while that in the other three places are between 4.69-7.60， which belonged to lowlevel resistance. Except that the population of S.frugiperda in Pingyuan was 5.34 times resistant to emamectin benzoate， which was a lowlevel resistance， that in other four places was 0.39-1.08 times， which was a sensitive level. The resistance multiple of S.frugiperda population in Kaiping to chlorfenapyr is 10.77 times， which belonged to medium level resistance， while that in Guangzhou， Dongguan and Yangjiang was between 4.21-8.84 times， which belonged to lowlevel resistance， and that in Pingyuan was 2.37 times， which belonged to the sensitive level.

Key words

Guangdong; Spodoptera frugiperda; insecticide; resistance

草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda （J. E. Smith），属鳞翅目Lepidoptera夜蛾科Noctuidae灰翅夜蛾属Spodoptera，原分布于美洲［1］，可为害玉米、水稻、花生、高粱和大豆等作物［2］。在玉米上，草地贪夜蛾幼虫主要取食鲜嫩幼叶，影响玉米生长，降低玉米产量［3］。 2018年12月26日在云南省普洱市江城县宝藏镇进行小春作物病虫害调查期间发现草地贪夜蛾入侵中国［4］，2019年1月-3月该虫在云南多地蔓延为害，4月相继侵入广西、广东、贵州、湖南、海南，5月快速扩散至福建、湖北、浙江、四川、江西、重庆、河南等地［56］。草地贪夜蛾可以在我国北回归线以南的热带、亚热带地区以及中南半岛大部分地区周年繁殖［7］，并且该虫可能在我国形成季节性南北迁飞，成为一种常发性害虫［8］。

2000年之前，美洲地区对草地贪夜蛾的防治以化学防治为主［9］，由于抗药性问题，当地于2000年开始种植 Bt 抗虫玉米，但自2007年起陆续在多个国家发现该虫对Cry1F、 Cry1Ab、Cry2A和Vip3A产生抗性并导致 Bt 抗虫玉米防效下降［1015］，因此南美洲大部分地区又重新使用杀虫剂进行防控。目前草地贪夜蛾已对41种杀虫剂产生了不同程度的抗性，包括有机磷类、拟除虫菊酯类、双酰胺类、多杀霉素等［16］。GutiérrezMoreno等2018年发现美国波多黎各田间草地贪夜蛾种群已对多种新型作用机制杀虫剂产生了高水平抗性，如氟苯虫酰胺（500倍）和氯虫苯甲酰胺（160倍），对乙基多杀菌素（14倍）也显示出了中等水平抗性，此外对多杀霉素（8倍）、甲氨基阿维菌素苯甲酸盐（7倍） 和阿维菌素（7倍） 均处于低水平抗性阶段［9］。

广东位于我国华南地区，属于亚热带季风气候，十分适合草地贪夜蛾周年繁殖，在我国草地贪夜蛾的发生和防治上具有极其重要的地理位置。因此，很有必要定期、系统地监测广东不同地区草地贪夜蛾对常用药剂的抗性水平，为指导田间科学用药和开展草地贪夜蛾抗药性治理提供依据。本研究采用浸渍法，测定了广东省5个不同地区草地贪夜蛾对氯虫苯甲酰胺、多杀霉素、甲氨基阿维菌素苯甲酸盐（甲维盐）和虫螨腈等4种常用杀虫剂的抗药性，为草地贪夜蛾合理用药提供依据。

1 材料与方法

1.1 供试昆虫

草地贪夜蛾敏感种群：由广东省农业科学院植物保护研究所章玉苹研究团队2019年7月从广西北海市合浦县未施用过任何药剂的牧草上采集，后在室内用人工饲料饲养，期间不接触任何杀虫剂。饲养条件：温度（27±1）℃，光照周期L∥D=16 h∥8 h，相对湿度（70±5）%。

供试草地貪夜蛾种群：2021年6月至2021年10月间，分别从广东省广州、东莞、开平、平远、阳江5个地区玉米田采回高龄幼虫或成虫，在室内人工饲料饲养1代，饲养条件：温度（27±1）℃，光照周期L∥D=16 h∥8 h，相对湿度（70±5）%。

1.2 供试药剂

99%氯虫苯甲酰胺原药、92.5%多杀霉素原药、71.2%甲氨基阿维菌素苯甲酸盐（甲维盐）原药、98%虫螨腈原药均由湖南农大海特农化有限公司提供;二甲基亚砜（江苏强盛功能化学股份有限公司，市售）、丙酮（国药集团化学试剂有限公司，市售）均为分析纯，吐温 80（天津市科密欧化学试剂有限公司，市售），化学纯。

1.3 试验方法

1.3.1 草地贪夜蛾对4种药剂敏感基线的测定

供试虫源为草地贪夜蛾敏感种群室内饲养20代的2龄幼虫，测定方法为浸渍法。参照农业行业标准《NY/T 1154.142008 农药室内生物测定试验准则杀虫剂第14部分：浸叶法》［17］进行生物测定，略有改动。具体步骤为：根据预备试验，将原药配制成母液，除氯虫苯甲酰胺用二甲基亚砜溶解外，其余原药均用丙酮溶解，然后用0.1%吐温 80 水溶液将母液等比稀释成5～6个系列浓度，将配制好的人工饲料切成长1.1 cm、宽0.8 cm、高0.4 cm的小片。分别将饲料小片在不同浓度的药液中浸泡20 s 后，放在滤纸上阴干后置于1.8 cm × 2.3 cm × 2.3 cm的有盖透明塑料小盒中。每盒放入一片经药液处理的人工饲料，并接入1头2龄幼虫，每10盒为一组（处理），每处理重复3次。以0.1%吐温 80 和0.1%相对应有机溶剂的水溶液处理为对照。根据不同药剂的作用特点，氯虫苯甲酰胺在处理后96 h检查结果，其余3种药剂均在处理后48 h检查结果。用毛笔轻触幼虫无反应则视为死亡。

1.3.2 广东不同地区草地贪夜蛾田间种群虫源对4种药剂的抗药性

供试虫源为广东5个不同地区田间种群室内饲养1代的2龄幼虫，测定方法同1.3.1方法。

1.4 数据处理

采用DPS数据处理软件进行统计分析，计算药剂毒力回归方程、LC50及95 %置信限和相关系数。以 LC50 的95% 置信区间是否重叠判断不同来源地草地贪夜蛾种群对同一种杀虫剂的抗性是否差异显著［1819］。

抗性倍数（RR）=测试种群LC50/敏感种群LC50。

参考GutiérrezMoreno等的研究设定抗性水平划分标准：抗性倍数<3.0为敏感水平;3.1～10.0为低水平抗性;10.1～40.0为中等水平抗性;40.1～200.0为高水平抗性［9］。

2 结果与分析

2.1 草地贪夜蛾2龄幼虫对4种杀虫剂的相对敏感基线

相对敏感基线测定结果（表1）表明，草地贪夜蛾2龄幼虫对氯虫苯甲酰胺最敏感，LC50为0.037 mg/L;对甲维盐、多杀霉素和虫螨腈3种杀虫剂LC50均小于1 mg/L。草地贪夜蛾2龄幼虫对不同药剂的敏感性由高到低依次为氯虫苯甲酰胺、多杀霉素、甲维盐和虫螨腈。

2.2 广东不同地区草地贪夜蛾种群对氯虫苯甲酰胺的抗药性

由表2可知，除平远草地贪夜蛾种群对氯虫苯甲酰胺抗性倍数为1.54倍，属敏感水平外，其余4个地区草地贪夜蛾种群對氯虫苯甲酰胺抗性倍数在3.51～9.99倍之间，属低水平抗性。从LC50置信限来看，广东省不同地区草地贪夜蛾种群对氯虫苯甲酰胺的抗性差异不显著。

2.3 广东不同地区草地贪夜蛾种群对多杀霉素的抗药性

表3结果表明，阳江草地贪夜蛾种群对多杀霉素抗性倍数最高，为17.62倍，东莞草地贪夜蛾种群对多杀霉素抗性倍数17.71倍，上述2个地区草地贪夜蛾种群对多杀霉素属中等水平抗性;其他3个地区草地贪夜蛾种群对多杀霉素抗性倍数在4.69～7.60倍之间，属低水平抗性。从LC50置信限来看，广州、平远、开平的草地贪夜蛾种群对多杀霉素的抗性差异不显著;阳江草地贪夜蛾种群和东莞草地贪夜蛾种群对多杀霉素的抗性差异不显著，与其余3个地方的抗性差异显著。

2.4 广东不同地区草地贪夜蛾种群对甲维盐的抗药性

表4结果表明，除平远草地贪夜蛾种群对甲维盐抗性倍数为5.34倍，属低水平抗性外，其他4个地区草地贪夜蛾种群对甲维盐抗性倍数在0.39～1.08倍之间，属于敏感水平。从LC50置信限来看，广州、阳江、开平、东莞的草地贪夜蛾种群对甲维盐的抗性差异不显著，与平远的抗性差异显著。

2.5 广东不同地区草地贪夜蛾种群对虫螨腈的抗药性

表5结果表明，开平草地贪夜蛾种群对虫螨腈的抗性倍数最高，为10.77倍，属中等水平抗性;广州、东莞和阳江草地贪夜蛾种群对虫螨腈的抗性倍数在4.21～8.84倍之间，属低水平抗性;平远草地贪夜蛾种群对虫螨腈的抗性倍数为2.37倍，属敏感水平。从LC50置信限来看，广州和开平草地贪夜蛾种群对虫螨腈抗性差异不显著，阳江和东莞草地贪夜蛾种群对虫螨腈抗性差异不显著，平远和阳江草地贪夜蛾种群对虫螨腈抗性差异不显著。

3 结论与讨论

目前我国防控草地贪夜蛾以施用化学杀虫剂为主，但由于我国地域广阔，草地贪夜蛾迁入虫源不同且不同地区草地贪夜蛾的发生情况、用药品种和用药频次存在差异，导致不同地区草地贪夜蛾种群对杀虫剂的抗药性水平也存在差异。因此加强不同地区草地贪夜蛾对常用杀虫剂抗药性水平监测，对于指导不同地区因地制宜地合理用药具有重要意义。建立靶标害虫对不同药剂的敏感基线是进行抗药性监测的前提，目前关于国内草地贪夜蛾对常用杀虫剂敏感基线的报道较少，只王欢欢等报道了草地贪夜蛾3龄幼虫对7种杀虫剂的相对敏感基线［19］。本研究结果与上述报道的差异较大，一方面可能是最初虫源的来源地不同，本文敏感虫源采自广西，其迁入虫源主要来源于泰国、老挝和越南［20］，而王欢欢报道的虫源采自云南，其迁入虫源主要来源于缅甸［19］。另一方面，王欢欢等测试的草地贪夜蛾幼3龄幼虫在室内饲养了5～7代，而本研究测试的草地贪夜蛾2龄幼虫在室内饲养了20代，对各种常用药剂更为敏感。

草地贪夜蛾的化学防治历史悠久，从过去使用有机磷类、氨基甲酸酯类、拟除虫菊酯类， 到近些年的阿维菌素类、酰胺类、多杀霉素类等多种药剂均被用于草地贪夜蛾的防治［21］。目前许多国家的草地贪夜蛾田间种群对多数药剂产生了不同程度抗性。从本次监测结果看，广东不同地区草地贪夜蛾种群对氯虫苯甲酰胺、多杀菌素、甲维盐和虫螨腈均已产生不同程度的抗药性。广州、阳江、开平和东莞草地贪夜蛾种群对氯虫苯甲酰胺已产生低水平抗性;阳江和东莞草地贪夜蛾种群对多杀霉素已产生中等水平抗性，广州、开平和平远草地贪夜蛾对多杀霉素已产生低水平抗性;平远草地贪夜蛾种群对甲维盐已产生低水平抗性;开平草地贪夜蛾种群对虫螨腈已产生中等水平抗性，广州、东莞和阳江草地贪夜蛾对虫螨腈已产生低水平抗药性。本结果与国内一些相关报道［2125］相似。

2019年草地贪夜蛾入侵我国并完成定殖，2020年进入暴发为害阶段［26］，草地贪夜蛾的防控工作形势严峻。草地贪夜蛾常用的防控方法包括农业防治、生物防治、化学防治等，目前化学防治仍是草地贪夜蛾的主要手段，但长期或大量使用化学农药易促使草地贪夜蛾抗药性逐渐形成。因此系统监测我国不同地区草地贪夜蛾对常用杀虫剂的抗药性，为其科学有效防治提供理论支持具有重要的意义。

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（责任编辑：田 喆）